外泌體是各種細胞外泌的直徑在30-100nm之間的膜囊泡。因外泌體內含mRNA、microRNA等核酸和蛋白質對相鄰細胞具有交換信息的功能。作為細胞間信號傳導的通訊工具和作為病等各種疾病的生物標記話題比較熱門。近些年關于外泌體研究很普遍,但是關于外泌體相關的實驗技術,關于需要改進的課題存在很多。例如,外泌體提純方法中,超速離心法和聚合物沉淀法(市售試劑盒)混入多種雜質,給后續實驗產生了許多障礙。抗體親和法和密度梯度離心法,雖然可以提取到高純度的外泌體,但不能提取完整外泌體,無法分析外泌體具有的生理功能,也是兩種提取方法的問題所在。而免疫印跡法(WB)和Elisa檢測法作為被普遍應用的外泌體檢測的一般方法,又存在檢測時需使用大量外泌體和難以檢測到低表達水平的標記蛋白。外泌體被包裹在堅硬的雙層膜中,雙層膜保護外泌體的內容物,使外泌體能夠在組織中長距離移動。外泌體提取試劑盒成分
與PC-3細胞相比,PC-3細胞外泌體中含有較高豐度的鞘糖脂、鞘磷脂、膽固醇和磷脂酰絲氨酸。外泌體常見的表面蛋白質包括四跨膜蛋白(如CD63、CD9、CD81)、黏附蛋白(如L1CAM、LAMP2)、整合素和糖蛋白(如纖連蛋白)等,而外泌體囊泡內蛋白質則與來源細胞內的蛋白質密切相關,包含例如熱休克蛋白(HSP70、HSP90)和細胞骨架蛋白(actin、tubulin、cofilin)等。除此之外,外泌體中還攜帶有來源細胞的miRNAs、mRNAs、non-codingRNAs、circularRNAs和DNA等遺傳物質。外泌體的完整囊泡結構能夠保護其內部生物分子不受體液中各種酶的影響從而保持其完整性和生物活性。外泌體提取試劑盒成分近些年關于外泌體研究很普遍。
外泌體是新型治理劑,惡性瘤細胞往往能夠通過分泌大量外泌體抑制宿主固有免疫。對外泌體的質譜研究發現,惡性瘤細胞的外泌體含有大量活化型的表皮生長因子受體(epidermalgrowthfactorreceptor,EGFR),可以抑制宿主細胞α型干擾素(IFN-α)的產生。這就解釋了為什么部分瘤患者固有免疫低下,也為晚期病癥患者的治理提供一個新的策略和理論依據。除了瘤,外泌體在其他疾病如心血管疾病等的診斷和治理的相關臨床試驗也在世界范圍內開展中。
外泌體的miRNA或蛋白質等遺傳分子與肝臟病理息息相關,在肝臟疾病診斷中可作為潛在的治理靶點或分子標志物。對外泌體的研究,將有利于闡述肝臟及其疾病的發生和發展機制,為尋求臨床可用的biomarkers和開發新的治理方法提供支持。外泌體可以通過轉運蛋白和miRNAs進行細胞間交流,從而作用于周圍的細胞并改變肝臟的微環境。細胞內多泡體(MVBs)與細胞膜融合,釋放內部的外泌體到細胞外,被其他細胞攝取,通過細胞膜融合或內吞作用釋放攜帶的內含物,在受體細胞中調控生理活動。外泌體介導的細胞間交流可以改變瘤的生長、細胞遷移、抗病毒等生理過程。外泌體在化療藥物的促轉移過程中具有重要的作用。
外泌體開始被認為是細胞排出代謝廢物的一種方式,能夠幫助缺乏高效降解能力或位于排泄系統的細胞排出不必要的蛋白質和RNA。近年來,隨著人們對外泌體的深入了解,外泌體的多種生物功能先后被發現。如今外泌體作為一種細胞間交流、傳遞大量的生物功能分子的重要方式日益受到重視。外泌體與受體細胞的信息交流可能通過以下4種途徑實現:(1)外泌體表面膜蛋白質被目的細胞表面的受體識別,從而激huo靶細胞;(2)外泌體在蛋白酶作用下產生的表面膜蛋白質碎片可作為目的細胞表面受體的配體;(3)外泌體脂膜可以與目的細胞膜融合,將蛋白質和RNA等內容物釋放進去,此類膜融合可能改變靶細胞的一些膜特性,例如脂質和膜蛋白質的密度及種類;(4)目的細胞通過胞吞的形式攝入外泌體。從體液和培養上清中高純度提取的高純度外泌體,在活內是否真的能發生作用尚未能確定。外泌體提取試劑盒成分
外泌體被認為是疾病的生物標志物和預后因子,具有重要的臨床診斷和治理意義。外泌體提取試劑盒成分
液體活檢是一種非侵入性的血液檢測突破性技術,能早期快速地檢測中流及其病灶或者轉移過程中釋放到血液中的循環中流細胞(circulatingtumorcell,CTC)、循環中流DNA(circulatingtumorDNA,ctDNA)和中流外泌體等中流組分。中流外泌體作為液體活檢的一個重要組成,基于其內容物成分多樣和穩定等優勢,正成為中流標志物相關研究的熱點。中流來源納米大小的外泌體具有易通過血腦屏障、天然的歸巢特性、雙分子層脂質結構的穩定性和高效的生物相容性等特征。因此,中流外泌體正成為中流靶向zhiliao理想的載體,尤其是工程化外泌體更表現出很好的中流靶向干預和增強藥物zhiliao的效果。外泌體提取試劑盒成分