培養基制備技術：一、玻璃器皿的清洗：在制備培養基的過程中，首先要使用一些玻璃器皿，如試管、三角瓶、培養皿、燒杯和吸管等。這些器皿在使用前都要根據不同的情況，經過一定的處理，洗刷干凈。有的還要進行包裝，經過滅菌等準備就緒后，才能使用。1、新購的玻璃器皿：除去包裝沾染的污垢后，先用熱肥皂水刷洗，流水沖凈，再浸泡于１～２％的工業鹽酸中數小時，使游離的堿性物質除去，再以流水沖凈。對容量較大的器皿，如大燒瓶、量筒等，洗凈后注入濃鹽酸少許，轉動容器使其內部表面均沾有鹽酸，數分鐘后傾去鹽酸，再以流水沖凈，倒置于洗滌架上將水空干，即可使用。2、用過的玻璃器皿：凡確無病原菌或未被帶菌物污染的器皿，使用后可隨時沖洗，吸取過化學試劑的吸管，可先浸泡于清水中，待到一定數量后再集中進行清洗。有可能被病原菌污染的器皿，必須經過適當消毒后，將污垢除去，用皂液洗刷，再用流水沖洗干凈。液體培養基，固體培養基的對應詞，是微生物或動植物細胞的液狀培養基。寧夏瓊脂培養基制備儀

高壓滅菌造成培養基結焦焦化問題：在實驗過程中，檢測人員發現在高壓滅菌后的培養基有結焦焦化現象。微生物認為造成這種現象是：控制培養基在容器中不要超過百分之八十，避免填充過多。注意控制高壓滅菌時間過長（115-116度）二十分鐘即可，溫度不超過121度，而且滅菌后的培養基在高溫環境中不要長時間存放。以上原因都會導致培養基結焦焦化。貯存：培養基在30℃下放置1天，無污染的即可使用。一般用牛皮紙包裹好存放于2-8℃冰箱中備用。寧夏瓊脂培養基制備儀固體培養基，一類配制成的固體狀態的基質。

培養基的分裝：大批量配制時使用的自動分配器須經校準和確認。每次使用前后，均要對分配器的管道系統進行沖洗，在分裝無菌培養基前，則要采用無菌硅膠管。固體培養基一般分裝在250ml、500ml錐形瓶中，高壓滅菌后根據需要分裝平皿或試管。平皿：傾注平皿，應在無菌室中放置3—4h，如用塑料平皿須在35℃培養箱中倒置30—60min。讓水蒸汽自然蒸發。斜面：制備低層斜面分裝于試管，約占容積1/5，滅菌后趁熱斜放在細玻璃棒和木桿上，使成斜度，分裝使注意管口和瓶塞上勿沾有培養基，如沾有培養基應用布抹去，以避免污染。

培養基pH值不在標準范圍內的問題：出現此類情況有很多原因，生物大致分為①廠家質量：出廠時pH不穩定。②滅菌問題：是蒸壓過高或殺菌時間過長，導致葡萄糖焦化，因此，pH值降低。③存放周期：保存時間超過保質期或結塊水的質量有問題。④水質問題：采用去離子水/蒸餾水/純凈水等，不要采用礦泉水和自來水。⑤存儲溫度：儲存溫度過高。⑥光線直射等六種原因，可逐一檢查排除解決問題。這樣的培養基稱之為鑒別培養基。例如用以檢查飲水和乳品中是否含有腸道致病菌的伊紅美藍培養基就是一種常用的鑒別性培養基。為了避免雜菌污染，獲得微生物純培養物，培養基必須及時嚴格滅菌。

培養基防止污染應該注意以下事項：確認工作細胞庫是否被污染，確認毒種工作種子批是否被污染，確認所用培養基及其添加成分(如小牛血清、NaHCO3等)是否被污染，均可用細菌、病菌及支原體無菌試驗來確認并排除。同時要對無菌試驗培養基的靈敏度進行驗證。實際生產中，可以從配制好的培養液中取少量加入營養瓊脂于恒溫培養箱內培養，48小時即可觀察有無污染。其它：高壓滅菌設備、過濾除菌設備均應進行驗證，確保滅菌和除菌效果;前者應在投產前及其后的每6個月進行驗證，后者應在每次除菌前、后進行驗證工作(至少應在除菌后進行一次)。另外，應將有毒區與無毒區嚴格分開，并有各自自立的空氣凈化系統及孵室，有毒區對無毒區應保持相對負壓，防止病毒對培養細胞(尤其是細胞庫)的污染?？刂婆囵B基的條件，控制培養基的pH配制培養基必須根據微生物的特點調節pH。寧夏瓊脂培養基制備儀

要根據不同微生物的營養需求選擇適宜的營養物質，配制針對性強的培養基。寧夏瓊脂培養基制備儀

培養基制備儀-培養基使用規程：1.目的：規范本中心微生物實驗室培養基的使用和管理。2.適用范圍，本規程適用于培養基的儲存、融化和廢棄等。3.職責，3.1檢驗人員：按照本規程規范使用培養基、定期檢查培養基是否失效。3.2科室負責人：負責指導、監督檢驗人員規范使用培養基。4.使用程序，4.1培養基的儲存，4.1.1除特殊說明和標準規定，通常情況下基礎培養基（如營養瓊脂培養基）應在4℃冰箱中保存不超過3個月，或在室溫（20℃）下保存不超過一個月。寧夏瓊脂培養基制備儀

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