培養基防止污染應該注意以下事項：確認工作細胞庫是否被污染，確認毒種工作種子批是否被污染，確認所用培養基及其添加成分(如小牛血清、NaHCO3等)是否被污染，均可用細菌、病菌及支原體無菌試驗來確認并排除。同時要對無菌試驗培養基的靈敏度進行驗證。實際生產中，可以從配制好的培養液中取少量加入營養瓊脂于恒溫培養箱內培養，48小時即可觀察有無污染。其它：高壓滅菌設備、過濾除菌設備均應進行驗證，確保滅菌和除菌效果;前者應在投產前及其后的每6個月進行驗證，后者應在每次除菌前、后進行驗證工作(至少應在除菌后進行一次)。另外，應將有毒區與無毒區嚴格分開，并有各自自立的空氣凈化系統及孵室，有毒區對無毒區應保持相對負壓，防止病毒對培養細胞(尤其是細胞庫)的污染。培養自養微生物的培養基應由簡單的無機物組成。四川Systec培養基制備儀

培養基制備技術：一、玻璃器皿的清洗：在制備培養基的過程中，首先要使用一些玻璃器皿，如試管、三角瓶、培養皿、燒杯和吸管等。這些器皿在使用前都要根據不同的情況，經過一定的處理，洗刷干凈。有的還要進行包裝，經過滅菌等準備就緒后，才能使用。1、新購的玻璃器皿：除去包裝沾染的污垢后，先用熱肥皂水刷洗，流水沖凈，再浸泡于１～２％的工業鹽酸中數小時，使游離的堿性物質除去，再以流水沖凈。對容量較大的器皿，如大燒瓶、量筒等，洗凈后注入濃鹽酸少許，轉動容器使其內部表面均沾有鹽酸，數分鐘后傾去鹽酸，再以流水沖凈，倒置于洗滌架上將水空干，即可使用。2、用過的玻璃器皿：凡確無病原菌或未被帶菌物污染的器皿，使用后可隨時沖洗，吸取過化學試劑的吸管，可先浸泡于清水中，待到一定數量后再集中進行清洗。有可能被病原菌污染的器皿，必須經過適當消毒后，將污垢除去，用皂液洗刷，再用流水沖洗干凈。四川Systec培養基制備儀半固體培養基，指在液體培養基中加入少量的凝固劑而配制成的半固體狀態的培養基。

固體斜面培養基配制步驟：1、培養基配方的選定同一種培養基的配方在不同著作中常會有某些差別。因此，除所用的是標準方法，應嚴格按其規定進行配制外，一般均應盡量收集有關資料，加以比較核對，再依據自己的使用目的，加以選用，記錄其來源。2、培養基的制備記錄：每次制備培養基均應有記錄，包括培養基名稱，配方及其來源，和各種成份的牌號，較終pH值、消毒的溫度和時間制備的日期和制備者等，記錄應復制一份，原記錄保存備查，復制記錄隨制好的培養基一同存放、以防發生混亂。3、培養基成分的稱取：培養基的各種成分必須精確稱取并要注意防止錯亂，較好一次完成，不要中斷。可將配方置于傍側，每稱完一種成分即在配方面軍做出記號，并將所需稱取的藥品一次取齊，置于左側，每種稱取完畢后，即移放于右側。完全稱取完畢后，還應進行一次檢查。

分接觸和利用培養基中的養料，適于作生理等研究，由于發酵率高，操作、方便，也常用于發酵工業。(3)半固體培養基。是在液體培養基中加入少量凝固劑而呈半固體狀態。固體培養基的制作步驟：1、首先我們要準備好一個裝有1000ml的燒杯，然后在準備好的杯中在放入500ml的蒸餾水，在將牛肉膏和蛋白胨、氯化鈉這些都溶解在水中。2、其次我們在調節PH值，調節時需要百分之10的氫氧化鈉溶液，將PH值調到7.2，在此也要定容到1000ml，較后在將這些液體都分別放入10個錐形瓶內，每一瓶都裝100ml。在配制培養基時應盡量利用廉價且易于獲得的原料作為培養基成分。

高壓滅菌造成培養基結焦焦化問題：在實驗過程中，檢測人員發現在高壓滅菌后的培養基有結焦焦化現象。微生物認為造成這種現象是：控制培養基在容器中不要超過百分之八十，避免填充過多。注意控制高壓滅菌時間過長（115-116度）二十分鐘即可，溫度不超過121度，而且滅菌后的培養基在高溫環境中不要長時間存放。以上原因都會導致培養基結焦焦化。貯存：培養基在30℃下放置1天，無污染的即可使用。一般用牛皮紙包裹好存放于2-8℃冰箱中備用。在發酵工業中，培養基用量很大，利用低成本的原料更體現出其經濟價值。四川Systec培養基制備儀

培養基長時間的高溫滅菌會使某些不耐熱的物質破壞，如使糖類物質形成氨基糖、焦糖。四川Systec培養基制備儀

培養基的分裝，應按使用的目的和要求，分裝于試管、燒瓶等適當容器內。分裝量不得超過容器裝盛量的2/3。容器口可用墊有防濕紙的棉塞封堵，其外還須用防水紙包扎（現試管一般多有用螺旋蓋者）。分裝時較好能使用半自動或電動的定量分裝器。分裝瓊脂斜面培養基時，分裝量應以能形成2/3底層和1/3斜面的量為洽當。分裝容器應預先清洗干凈并經干烤消毒，以利于培養基的徹底滅菌。每批培養基應另外分裝20ml培養基于一小玻璃瓶中，隨該批培養基同時滅菌，以為測定該批培養基較終pH之用。四川Systec培養基制備儀

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