外泌體特指直徑在30-150nm的囊泡,其主要來源于細胞內多囊泡體,經多囊泡體外膜與細胞膜融合后釋放到胞外基質中。外泌體膜上富含參與外泌體運輸的四跨膜蛋白家族(CD63,CD81和CD9)、熱休克蛋白家族(HSP60,HSP70和HSP90),本示蹤病毒使用CD63作為生物標記,通過將CD63與熒光蛋白偶聯,帶熒光的膜蛋白會在表達至外泌體膜上,便于后續進行、觀察內化或其他實驗。慢病毒載體的構建原理就是將HIV21基因組中的順式作用元件(如包裝信號、長末端重復序列)和編碼反式作用蛋白的序列進行分離。外泌體介導的細胞間交流可以改變瘤的生長、細胞遷移、抗病毒等生理過程。河南海洋生物外泌體
干細胞外泌體的六大內在改善:細胞排毒:有效活化提高細胞能量加速細胞排毒、淡化色斑。細胞修復:加速細胞修復、促進微循環修復,修復痘坑痘印。增加彈性:重塑彈力纖維膠原纖維網狀纖維,恢復肌膚彈性,提亮皮膚。淡化皺紋、細紋:促進生成纖維細胞,增強皮膚產生蛋白能力,淡化皺紋、頸紋等。減緩衰老:調節機體組織間物質及信息傳遞速度,加強修復,減緩衰老。營養供給:針對肌膚脆弱敏感日夜修復,面部、眼周、肌底多效保護,不斷給皮膚補充充足的營養,喚醒肌膚細胞,有助于后續產品營養更好的吸收。河南海洋生物外泌體目前,提取外泌體的方法主要有超速離心法、PEG沉淀法。
外泌體(Exosome)開始被認為是毫無作用的“垃圾”,但隨著研究的不斷深入,人們發現事實并非如此,外泌體(Exosome)是具有功能活性并可進行細胞間信息傳遞的微囊泡。外泌體(Exosome)介導瘤細胞的免疫耐受。瘤細胞來源的外泌體(Exosome)本身可作為瘤抗原,因此,瘤來源的外泌體(Exosome)既是一種抗原呈遞系統,同時也是瘤排斥抗原的來源。瘤來源的外泌體(Exosome)能夠通過傳遞某些抑制信號,在機體免疫應答過程中起負性調節作用,誘導瘤細胞形成免疫耐受,從而逃避免疫細胞的殺傷。
一類外泌體中常見的細胞質蛋白是Rabs蛋白,是鳥苷酸三磷酸酶(GTPases,)家族的一種。它可以調節外泌體膜與受體細胞的融合,有文獻報道稱RAB4,RAB5和RAB11主要出現于早期以及回收的核內體中,RAB7和RAB9主要出現于晚期的核內體。現有大量的研究發現外泌體中含有40種RAB蛋白。除了RAB蛋白,外泌體中富含具有外泌體膜交換以及融合作用的膜聯蛋白(包括膜聯蛋白1、2、4、5、6、7、11等)。外泌體膜上富含參與外泌體運輸的四跨膜蛋白家族、熱休克蛋白家族。其它一些外泌體中的蛋白包括多種的代謝類的酶、核糖體蛋白(RPS3)、信號轉導因子(黑色素瘤分化相關因子,ARF1,CDC42,人類紅細胞膜整合蛋白,SLC9A3R1)、粘附因子、細胞骨架蛋白以及泛素等。外泌體其純度與超離心法和PEG沉淀法提取外泌體做比較。
利用蛋白質免疫印跡和酶聯免疫吸附分析技術可以對外泌體標志性蛋白質進行定性定量分析。其中蛋白免疫印跡是外泌體的經典表征手段之一,操作時往往需要細胞裂解液作為陰性對照。常用的外泌體標志性蛋白質包括四跨膜蛋白質CD63、CD81、CD9、中流易感基因101蛋白(TSG101)、水通道蛋白2(AQP2,尿液中)和凋亡誘導因子6相互作用蛋白(Alix)等,內參蛋白質可以是肌動蛋白(βActin)或甘油醛-3-磷酸脫氫酶,陰性對照蛋白可以是阻抑素(PHB,線粒體標志蛋白)或鈣聯結蛋白Calnexin。在酶聯免疫吸附析法中,外泌體裂解液通過固載有抗體的固相基質,隨后與檢測抗體共孵育。兩種方法均存在操作繁瑣、耗時長的問題,相比較而言,酶聯免疫吸附分析法比蛋白質免疫印跡法更加快速,適用于高通量分析。外泌體作為細胞間信號傳導的通訊工具和作為病等各種疾病的生物標記話題比較熱門。河南海洋生物外泌體
活內的外泌體動態(哪個外泌體遷移至何處)也會成為今后需要努力研究的重要課題。河南海洋生物外泌體
Pascucci等將包含有紫杉醇的間充質細胞來源外泌體與胰腺ai細胞共培養,發現裝載紫杉醇的間充質細胞外泌體具有很強的抗中流增殖效果。Tian等為降低免疫原性與毒性,采用小鼠未成熟樹突狀細胞所產生外泌體作為藥物載體。同時為實現外泌體運輸的靶向性,使細胞表達能夠識別乳腺ai細胞的外泌體膜蛋白Lamp2b(lysosomeasso[1]ciatedmembraneglycoprotein2b,溶酶體相關膜蛋白2)。并采用電穿孔的方法,在純化所得的小鼠未成熟樹突狀細胞外泌體中載入阿霉素。結果表明該外泌體能夠特異性的將阿霉素傳遞給中流組織,抑制中流生長且無明顯毒性。河南海洋生物外泌體