外泌體運輸的基因類藥物也可以是miRNA,miRNA是一類非編碼的內源性RNA,主要用于調節轉錄后的基因表達。miRNA主要通過與mRNA的未翻譯的區域(UTRs)結合起到抑制基因表達和降解mRNA的作用。與siRNA不同,miRNA抑制mRNA的表達不需要完美的堿基配對,因此每種miRNA可以抑制多種蛋白質的表達,而每種siRNA只針對一種蛋白質。miRNA的運載也存在著種種挑戰:miRNA體內穩定性差、生物分布不理想、易被體內酶降解以及容易引起副反應等。越來越多的研究表明外泌體也是體內運載miRNA的優良載體,并且利用外泌體運輸miRNA的zhiliao方法已經在許多疾病模型中得以應用。外泌體主要來源于細胞內內溶酶體微粒內陷形成的多囊泡體,經多囊泡體外膜與細胞膜融合后釋放到胞外基質中 。細胞中的外泌體
在多細胞生物體內,遠處的細胞可以通過傳遞單個分子或細胞外囊泡(EVs,包括exosomes和microvesicles等)交換信息。該綜述介紹了一些EVs引人注目的功能,以及我們目前對其生理作用認識的局限。盡管有初步研究表明,EVs在體內具有一些生理功能,但EVs的本質特性仍有待進一步澄清。這篇綜述主要關注種瘤細胞和微環境,但類似的結果和挑戰也適用于EVs介導的其他的病理/生理過程。功能神經的能力和完整性需要感覺運動神經元、神經元和神經膠質細胞之間的交互式信息交流。細胞中的外泌體從癥狀患者樹突狀細胞釋放的外泌體中,含有各種癥狀細胞來源的蛋白質。
在血液和大多數體液(如尿液、腦脊液、唾液、胸腹腔積液、羊水和乳汁等)中均可檢測到外泌體。血液外泌體的檢測通常采用EDTA抗凝血分離的血漿,miRNA等一些微小RNA則采用血清樣本。泌尿系統中存在大量的RNA水解酶可降解尿液中的裸miRNAs,但外泌體外膜則可幫助RNA免于被降解,因此研究尿液外泌體miRNAs更具有應用價值。相較于血清中相關miRNA的水平,腦脊液外泌體中的miR-21可作為膠質瘤診斷和預后的指標,特別對預測中流復發或轉移具有價值。唾液樣本在安靜狀態下主要來源于舌下腺和頜下腺,刺激狀態下則主要來源于腮腺。
外泌體開始被認為是細胞排出代謝廢物的一種方式,能夠幫助缺乏高效降解能力或位于排泄系統的細胞排出不必要的蛋白質和RNA。近年來,隨著人們對外泌體的深入了解,外泌體的多種生物功能先后被發現。如今外泌體作為一種細胞間交流、傳遞大量的生物功能分子的重要方式日益受到重視。外泌體與受體細胞的信息交流可能通過以下4種途徑實現:(1)外泌體表面膜蛋白質被目的細胞表面的受體識別,從而激huo靶細胞;(2)外泌體在蛋白酶作用下產生的表面膜蛋白質碎片可作為目的細胞表面受體的配體;(3)外泌體脂膜可以與目的細胞膜融合,將蛋白質和RNA等內容物釋放進去,此類膜融合可能改變靶細胞的一些膜特性,例如脂質和膜蛋白質的密度及種類;(4)目的細胞通過胞吞的形式攝入外泌體。目前,提取外泌體的方法主要有超速離心法、PEG沉淀法。
在免疫系統中,淋巴細胞、樹突狀細胞、巨噬細胞、肥大細胞等均可以產生外泌體。研究表明免疫細胞來源的外泌體能夠明顯影響機體的免疫調節機制,包括調節抗原呈遞、免疫激huo、免疫監督等。不同免疫細胞來源的外泌體功能不同,以樹突狀細胞(該細胞具有免疫刺激能力,是目前能夠激huo初始T細胞的抗原遞呈細胞)來源的外泌體為例,其外泌體的免疫刺激作用取決于來源細胞的成熟狀態。成熟的樹突狀細胞外泌體內包含能夠直接激huoT細胞的MHCclassⅠ和MHCclassⅡ,共刺激分子如CD40、CD8、CD86和熱激蛋白,這些分子使樹突狀細胞來源的外泌體具有抗原呈遞、調節免疫響應的生物功能。細胞分泌到細胞外環境中分別稱為外泌體和微泡的細胞外膜泡。細胞中的外泌體
以前無法用超速離心法提取的微囊泡,也通過運用PS親和法實現高純度提取。細胞中的外泌體
外泌體起源于多泡體,以細胞管腔內囊泡的形式存在.細胞的胞吞形成帶有外源性抗體的內體小泡,在高爾基體等細胞器的作用下形成早期核內體,早期核內體的囊膜內陷、突入形成多個小囊泡,并選擇性的接受細胞內的蛋白質、核酸、脂類等成分,較終形成晚期核內體,晚期核內體與細胞膜融合,并將外泌體排出胞外。這是一個連續而又復雜的過程,從內體小泡到成熟外泌體,需要在各細胞器間傳遞并包裝,包括:TSG101、Alix蛋白、CD63、CD81、神經酰胺、膽固醇等。外泌體的排出跟其他胞內小泡大致相同,受到Rab家族蛋白的調控,敲除細胞的Rab27a和Rab27b蛋白后,外泌體不能排出,且從高爾基體到晚期核內體的囊泡運輸不受影響。細胞中的外泌體