病理實驗外包,病理染色常見染色介紹TUNEL染色:基因組DNA斷裂時,暴露的3’-OH可以在末端脫氧核苷酸轉移酶(TerminalDeoxynucleotidylTransferase,TdT)的催化下加上熒光素(FITC)標記的dUTP(fluorescein-dUTP),從而可以通過熒光顯微鏡或流式細胞儀進行檢測,這就是TUNEL(TdT-mediateddUTPNick-EndLabeling)法檢測細胞凋亡的原理。實驗步驟使細胞或組織貼在載玻片上?固定?洗滌?通透?洗滌?預平衡?用熒光素12-dUTP標記斷裂的DNA鏈?終止反應?洗滌?封片?分析樣品南京英瀚斯,專業的病理染色實驗服務平臺。病理實驗外包所需樣本如何保存。黑龍江整體病理實驗外包推薦
1.取材與固定固定劑同時具有硬化細胞組織的作用,使制片便于進行。2.洗滌與脫水洗滌是把深入組織中的固定劑洗去,防止染色中的結晶產生,驅除組織中的水分,利于透明和浸蠟。3.透明與浸蠟(透蠟)脫水后的組織中水分已被透明劑所代替,而有利于浸蠟。浸蠟的目的是使組織有一定的硬度而有利于切片和細胞組織保持一定的生活時狀態。4.包埋與切片用石蠟和其他包埋劑(組織填充劑作包埋劑)包繞一定的形狀以便于切片。將包埋好的組織塊用切片機切成一定的厚度(厚度以um計)。5.貼片(展片、撈片)和染色將已且妥的切片在溫水中展平整后用載玻片貼上,稍晾干后再烤片。染色可使細胞和組織被染上不同的顏色而產生一定的折射率,便于顯微鏡觀察。6.切片染色后用膠類物質將其封固,便于長期保存。南京英瀚斯,專業的病理染色實驗服務平臺。黑龍江整體病理實驗外包推薦病理實驗外包檢測-南京英瀚斯-第三方檢測機構。
病理實驗外包,病理染色常見染色介紹普魯士藍染色:普魯士藍染色(Prussianbluereaction)又稱為含鐵血黃素染色,即經過亞鐵**鉀和稀酸處理后可以產生藍色,常見于吞噬細胞內會間質內,主要顯示三價鐵鹽。Perls普魯士藍是非常經典的組織化學反應,是顯示組織內三價鐵的一種敏感、傳統優良的方法,其染色原理為:亞鐵**鉀溶液使三價鐵離子從蛋白質中被稀鹽酸分離出來,三價鐵與亞鐵**鉀反應,生成一種不溶解的藍色化合物即三價鐵的亞鐵**物普魯士藍,所以該反應被稱為普魯士藍反應。三價鐵的亞鐵**物是一種很穩定的化合物,在反應后可用紅色染色劑進行復染,如核固紅、伊紅、中性紅等。Perlsstain常用于顯示局部組織內各種出血***變,常見于吞噬細胞內。在判斷含鐵血黃素沉積時,用Perls反應可以得到證實,該染色方法可以很好的區分含鐵血黃素和其他色素。該染色液穩定性好、可以長期保存、不易產生沉淀、應用范圍廣、可以進行復染。南京英瀚斯,專業的病理染色實驗服務平臺。
病理實驗外包,病理染色冰凍切片介紹;冰凍切片是指將組織在冷凍狀態下直接用切片機切片。它實際上是以水為包埋劑,將組織進行冰凍至堅硬后切片的。在冰凍切片前組織不經過任何化學藥品處理或加熱過程,明顯縮短了制片時間。同時,由于此法不需要經過脫水、透明和浸蠟等步驟,因而較適合于脂肪、神經組織和一些組織化學的制片,并作為快速切片的方法應用在臨床診斷。一、取材應盡可能快地采取新鮮的材料,防止組織發生死后變化。二、速凍1.將組織塊平放于軟塑瓶蓋或特制小盒內(直徑約2cm)。2.如組織塊小可適量加OCT包埋劑浸沒組織,然后將特制小盒緩緩平放入盛有液氮的小杯內。3.當盒底部接觸液氮時即開始氣化沸騰,此時小盒保持原位切勿浸入液氮中,大約10~20s組織即迅速冰結成塊。4在制成凍塊后,即可置入恒冷箱切片機冰凍切片。5.若需要保存,應快速以鋁箔或塑料薄膜封包,立即置入-80℃冰箱貯存備用。南京英瀚斯,專業的病理染色實驗服務平臺。病理實驗外包檢測,基礎機制研究好幫手,只做真實實驗。
病理實驗外包,病理染色骨組織的處理方式:組織里存有鈣鹽可妨礙用常規方法制作良好切片。骨組織及鈣化病灶,經過固定后,需要先將鈣鹽除去使組織軟化,才能進行常規切片。如果脫鈣不全,則切片容易撕開或碎裂,損傷切片刀刀刃。脫去鈣鹽的過程,稱為脫鈣。骨組織固定24小時后,鋸下不超過0.5cm厚的薄骨片,以4%甲醛溶液固定后,進行脫鈣。骨組織過厚則需延長脫鈣時間,但長時間浸于強酸會影響切片染色效果。取材骨組織固定于10%甲醛溶液24小時后再鋸取厚度約0.5cm骨片固定以10%甲醛溶液固定2天脫鈣將組織置于脫鈣劑中,每日更換新鮮液,直至組織軟化為止除酸流水沖洗24小時脫水、浸蠟、切片進行常規脫水、透明、浸蠟、切片南京英瀚斯,專業的病理染色實驗服務平臺。實驗外包、病理實驗外包檢測、細胞實驗外包、分子實驗外包。黑龍江整體病理實驗外包推薦
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病理實驗外包,冰凍切片取樣實驗步驟:一、取材應盡可能快地采取新鮮的材料,防止組織發生死后變化。二、速凍1.將組織塊平放于軟塑瓶蓋或特制小盒內(直徑約2cm)。2.如組織塊小可適量加OCT包埋劑浸沒組織,然后將特制小盒緩緩平放入盛有液氮的小杯內。3.當盒底部接觸液氮時即開始氣化沸騰,此時小盒保持原位切勿浸入液氮中,大約10~20s組織即迅速冰結成塊。4在制成凍塊后,即可置入恒冷箱切片機冰凍切片。5.若需要保存,應快速以鋁箔或塑料薄膜封包,立即置入-80℃冰箱貯存備用。三、固定1.樣品托上涂一層OCT包埋膠,將速凍組織置于其上,4℃冰箱預冷5~10min讓OCT膠浸透組織。2.取下組織置于錫箔或者玻片上,樣品托速凍。3.組織置于樣品托上,其上再添一層OCT膠,以完全覆蓋為宜,速凍架(PE)上30min。黑龍江整體病理實驗外包推薦