病理實(shí)驗(yàn)外包比較常見的病理染色實(shí)驗(yàn)是免疫組化染色,用標(biāo)記的特異性抗體對(duì)組織切片或細(xì)胞標(biāo)本中某些化學(xué)成分的分布和含量進(jìn)行組織和細(xì)胞的定性、定位或定量研究,這種技術(shù)稱為免疫組織化學(xué)(immunohistochemistry)技術(shù)或免疫細(xì)胞化學(xué)(immunocytochemistry)技術(shù)。根據(jù)抗原抗體反應(yīng)和化學(xué)顯色原理,組織切片或細(xì)胞標(biāo)本中的抗原先和一抗結(jié)合,再利用一抗與標(biāo)記生物素、熒光素等的二抗進(jìn)行反應(yīng),***通過顯色反應(yīng)或熒光來顯示細(xì)胞或組織中化學(xué)成分,在光學(xué)顯微鏡或熒光顯微鏡下可清晰看見細(xì)胞內(nèi)發(fā)生的抗原抗體反應(yīng)產(chǎn)物,從而能夠在細(xì)胞爬片或組織切片上原位確定某些化學(xué)成分的分布和含量。免疫組化的特點(diǎn)是特異性強(qiáng)、定位準(zhǔn)確,因此能夠明確目的蛋白的細(xì)胞定位、亞細(xì)胞定位及多種蛋白之間的相互位置關(guān)系。免疫組化在醫(yī)學(xué)上應(yīng)用***,尤其在臨床**診斷和鑒別診斷中具有普遍認(rèn)可的實(shí)用價(jià)值。其應(yīng)用于低分化或未分化**的鑒別診斷時(shí),準(zhǔn)確率可達(dá)50% -75%。實(shí)驗(yàn)外包、病理實(shí)驗(yàn)外包檢測(cè)、細(xì)胞實(shí)驗(yàn)外包、分子實(shí)驗(yàn)外包。天津生物病理實(shí)驗(yàn)外包
病理實(shí)驗(yàn)外包,病理染色常見染色介紹普魯士藍(lán)染色:普魯士藍(lán)染色(Prussianbluereaction)又稱為含鐵血黃素染色,即經(jīng)過亞鐵**鉀和稀酸處理后可以產(chǎn)生藍(lán)色,常見于吞噬細(xì)胞內(nèi)會(huì)間質(zhì)內(nèi),主要顯示三價(jià)鐵鹽。Perls普魯士藍(lán)是非常經(jīng)典的組織化學(xué)反應(yīng),是顯示組織內(nèi)三價(jià)鐵的一種敏感、傳統(tǒng)優(yōu)良的方法,其染色原理為:亞鐵**鉀溶液使三價(jià)鐵離子從蛋白質(zhì)中被稀鹽酸分離出來,三價(jià)鐵與亞鐵**鉀反應(yīng),生成一種不溶解的藍(lán)色化合物即三價(jià)鐵的亞鐵**物普魯士藍(lán),所以該反應(yīng)被稱為普魯士藍(lán)反應(yīng)。三價(jià)鐵的亞鐵**物是一種很穩(wěn)定的化合物,在反應(yīng)后可用紅色染色劑進(jìn)行復(fù)染,如核固紅、伊紅、中性紅等。Perlsstain常用于顯示局部組織內(nèi)各種出血***變,常見于吞噬細(xì)胞內(nèi)。在判斷含鐵血黃素沉積時(shí),用Perls反應(yīng)可以得到證實(shí),該染色方法可以很好的區(qū)分含鐵血黃素和其他色素。該染色液穩(wěn)定性好、可以長(zhǎng)期保存、不易產(chǎn)生沉淀、應(yīng)用范圍廣、可以進(jìn)行復(fù)染。南京英瀚斯,專業(yè)的病理染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)平臺(tái)。天津生物病理實(shí)驗(yàn)外包南京英瀚斯-病理實(shí)驗(yàn)外包檢測(cè)-專業(yè)第三方檢測(cè)機(jī)構(gòu)。
病理實(shí)驗(yàn)外包,病理染色組織樣本保存液多聚甲醛的配置:4%多聚甲醛固定液(4%ParaformaldehydeFixSolution,4%PFAFixSolution)是一種普遍用于免疫組化(Immunohistochemistry,IHC)、免疫熒光(Immunofluorescence,IF)、免疫細(xì)胞化學(xué)(Immunocytochemistry,IC)、流式分析(Fluorescence-activatedcellsorting,FACS)等檢測(cè)時(shí)組織、組織切片、細(xì)胞等生物樣品固定的溶液??棇W(xué)上,4%的多聚甲醛穿透力強(qiáng),固定均勻,能使組織硬化,有利于切片。該固定劑造成的組織收縮少,損傷小,較為溫和,能很好的保存固有物質(zhì),保持組織的抗原性和細(xì)微結(jié)構(gòu)。此外,多聚甲醛可用于固定并保存脂肪及脂類物質(zhì)。南京英瀚斯,專業(yè)的病理染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)平臺(tái)。
病理實(shí)驗(yàn)外包,病理染色HE染色常見問題:Q5:細(xì)胞核呈棕紅色改變答:蘇木素染液過度氧化;或蘇木素染色后反藍(lán)不足導(dǎo)致。應(yīng)該立即更換蘇木素染色液?;蛟诹鲃?dòng)自來水(一般自來水PH7.5-7.8),或在稀釋的氨水溶液,或在0.2%碳酸氫鈉中適當(dāng)浸泡,這些步驟均可一定程度地加強(qiáng)蘇木素染色后的反藍(lán)效果。Q6:伊紅染色較淡答:伊紅的PH改變了(PH可能已大于5);或反藍(lán)液體未漂洗干凈,殘留后影響胞漿嗜酸性染色;或者切片太薄并且在隨后的脫水步驟停留過久。對(duì)策:檢查伊紅染色液PH,可采用乙酸調(diào)至4.6-5.0。根據(jù)以上提示,調(diào)整實(shí)驗(yàn)步驟。病理實(shí)驗(yàn)外包所需樣本如何保存。
病理實(shí)驗(yàn)外包,樣品保存和寄送注意事項(xiàng)一、取材注意事項(xiàng)1.取材動(dòng)作要迅速,不宜作太久的拖延以免組織細(xì)胞的成分、結(jié)構(gòu)等發(fā)生變化。2.切片材料應(yīng)根據(jù)需要觀察的部位進(jìn)行選擇,盡可能不要損傷所需要的部分。二、固定注意事項(xiàng)1.一般固定液,都以新配為好,配好后應(yīng)貯存在陰涼處,不宜放在日光下,以免引起化學(xué)變化,失去固定作用。2.有些混合固定液的成份之間會(huì)發(fā)生氧化還原作用,一定要在使用前才混合,如果混合太早,固定時(shí)就沒有作用了。3.固定材料時(shí),固定液必須充足,一般為材料塊的20~30倍,有些水分多的材料,中間應(yīng)更換1~2次新液。4.材料固定完畢后,保存于嚴(yán)密緊塞或加蓋的容器里,同時(shí)在容器外上標(biāo)簽,并隨同材料在溶液中投入相應(yīng)的標(biāo)簽,以免相互混淆。標(biāo)簽上注明固定液、材料來源、日期等。標(biāo)簽上的文字,應(yīng)用黑色鉛筆或繪圖黑墨水書寫。病理實(shí)驗(yàn)外包檢測(cè),經(jīng)驗(yàn)豐富,操作熟練。天津生物病理實(shí)驗(yàn)外包
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病理實(shí)驗(yàn)外包,病理染色切片常見問題及解決方法:1.切片彎曲且不能形成直帶●原因:①蠟塊上下或左右兩邊不平行。②蠟塊與切片刀刀口不平行。③組織塊外形不整齊。④切片刀各處的鋒利程度不一致。●解決方法:①將蠟塊四邊反復(fù)修平對(duì)稱。②調(diào)節(jié)蠟塊夾持器,使其與切片刀平行。③修整組織塊時(shí),注意修切整齊。④移動(dòng)切片刀,更換刀口位置。2.切片上出現(xiàn)裂紋●原因:①切片刀上有小缺口,或刀口不平整。②組織中可能含有較硬之物質(zhì),如固定液之結(jié)晶石灰質(zhì)。③包埋時(shí)石蠟凍結(jié)太慢?!窠鉀Q方法:①切片刀某處有缺口,可調(diào)換刀口部位或重新磨刀。刀口上缺口過多且不平整,可先將刀鋒垂直在磨刀石上輕輕磨數(shù)次,然后按常規(guī)磨刀田。②組織中硬性物質(zhì)太多,則不宜用。③糾正包埋時(shí)的缺點(diǎn)。一般待蠟塊周圍凝結(jié)一層,即可放入冷水中。南京英瀚斯,專業(yè)的病理染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)平臺(tái)。天津生物病理實(shí)驗(yàn)外包