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天津外泌體科技有限公司

來源: 發布時間:2023年04月19日

外泌體的納米球膜型結構由雙層脂質形成。它也由各種類型的脂質和蛋白質組成,這些脂質和蛋白質衍生自形成外泌體的親代細胞。根據外泌體數據庫ExoCarta的資料,目前已知約有8000種蛋白質和194種脂質與外泌體相關。外泌體通過生物體液被多種不同類型的細胞分泌,包括滑膜液,母乳,血液,尿液,唾液,羊水和血液中的血清,這表明它們在細胞間通訊和觸發生理反應中起著重要的作用。外泌體功能在研究初期階段發現是參與細胞成熟過程中去除不必要的蛋白質。簡而言之,它們是天然膜囊泡,將蛋白質,RNA,DNA和脂質從一個細胞攜帶到另一個細胞,調節受體細胞的生物功能。外泌體中含有核酸,包括miRNA、DNA、lncRNA、mRNA。天津外泌體科技有限公司

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細胞外小泡通過充當脂肪組織、肝臟、骨骼肌和免疫細胞之間的細胞間通訊方式,在肥胖及其代謝并發癥的發展中發揮作用。外泌體可能在外周胰島素敏感性的調節中起作用,外周胰島素敏感性是T2D發病機理的主要組成部分。外泌體似乎通過至少兩種不同的機制來調節胰島素敏感性,即通過調節炎癥或通過與胰島素反應性部位的直接相互作用。后者可通過與主要胰島素信號分子(例如磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/Akt信號通路)相互作用而影響胰島素信號通路而直接或間接發生。與對照組相比,糖尿病患者的血漿EV含量更高,并且與對照組相比,糖尿病小鼠的血漿外泌體數量也更高。然而,確定外泌體的作用及其在肝/腸軸通訊中的潛在作用將需要對它們的組成有更好的了解,特別是飲食是否會改變腸源性外泌體的含量,因此就胰島素反應而言它們的生物學功能尚未研究。天津外泌體科技有限公司人體內多種細胞及體液均可分泌外泌體,包括內皮細胞、免疫細胞、血小板、平滑肌細胞等。

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流式細胞技術是細胞和小顆粒定性和定量表征的有效方法,其用于外泌體定量檢測的準確性也在不斷上升。將外泌體表面特異性標志物CD63、CD81等相應抗體進行標記,可用流式細胞儀檢測到陽性表達,從而實現對外泌體的定量。但流式細胞技術檢測時需要單顆粒懸浮液,當外泌體濃度高或分離過程中發生外泌體囊泡聚集時將導致一次觀察到多個顆粒,從而導致數據不準確。因此,為了通過流式細胞儀觀察,需要將外泌體通過免疫捕獲或共價結合固定在磁珠表面上,從而便于將外泌體囊泡暴露于已知或者預期在外泌體表面表達的抗原的熒光偶聯抗體中。在流式細胞術之前,可以在落射熒光顯微鏡(EPI)下觀察與磁珠和熒光抗體偶聯的外泌體囊泡。當樣品通過流式細胞儀時采集熒光信號,不只可以對外泌體進行高通量分析,還可以基于抗原表達對外泌體進行定量或分類。

外泌體是包含了復雜RNA和蛋白質的小膜泡(30–150nm),由所有體外和體內細胞持續分泌。由于人體內復雜的功能,包括細胞間通訊和信號轉導,外泌體正在改變研究。這些細胞外囊泡正在生長,這既是為了了解其生物學功能,也是為了將其用于實際應用,如無創診斷和高級調理開發。Dynabeads提供一系列外泌體分離產品和工具,用于表征和分析其RNA和蛋白質含量,以及體外和體內追蹤,以幫助您進一步了解這些迷人的外泌體。超速離心方案可能冗長乏味且耗時的。您可使用靈活且可擴展的總外泌體分離試劑從細胞培養基或任何體液中即刻分離完整的外泌體。這些試劑及其隨附的方案是多種試驗的理想選擇,包括處理少量樣本和處理多個樣本。外泌體作為蛋白質的藥物遞送載體。

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外泌體的臨床應用:間充質干細胞是目前較普遍使用的細胞類型,它具有自我更新,多向分化、分泌細胞因子和細胞外囊泡體、免疫調節、來源普遍等特點,在臨床診療中取得了良好的成果。間充質干細胞來源外泌體與間充質干細胞有著相似的功能,包括修復與再生組織、阻止炎癥反應及調節機體免疫,但外泌體相對于間充質干細胞又有許多優勢。首先,間充質干細胞來源外泌體更穩定,更好保存,易于管理和控制,可以人為改變其內容物的種類和數量。其次,它們沒有活細胞,不會像間充質干細胞那樣可能會過多增殖而放大療效或者病變導致疾病加重;另外,它有可能避免某些針對間充質干細胞的調控問題,間充質干細胞來源外泌體有代替間充質干細胞的趨勢。干細胞外泌體攝取流式細胞技術是細胞和小顆粒定性和定量表征的有效方法,其用于外泌體定量檢測的準確性也在不斷上升。外泌體內主要含有核酸、蛋白質和脂質等,可作為疾病診斷標記物、調控靶細胞功能、參與細胞生物學活動等。天津外泌體科技有限公司

外泌體顯示出了在診療各種疾?。ㄈ缧募〔『蜕窠洸。┓矫娴臐摿?。天津外泌體科技有限公司

外泌體分離的主要挑戰之一是消除納米級污染物,包括干擾外泌體標志物解析的游離核酸和脂蛋白。超速離心是目前分離外泌體的主要技術。盡管如此,它仍難以符合臨床應用所需的標準,主要是由于該方法得到的外泌體純度不足,產量較低,完整性欠佳且分離純化操作耗時長。其他方法,例如基于聚乙二醇(PEG)的沉淀,磷脂酰絲氨酸親和捕獲,尺寸排阻色譜法和膜親和捕獲,近年來已經出現在特定的應用中,但是只適用于特定場景。近來,非對稱流場-流分離方法已被用于從細胞和瘤子培養基中高分辨率地分選EV亞群,但其通量受到繁瑣的樣品制備程序的影響。單一分析耗時的過程也限制了其普遍的應用。因此,目前亟需開發創新技術以提高外泌體分離純化的效率,純度,產量,速度和耐用性?;诔瑸V的技術提供了潛在的有前途的替代方法,但它們也有缺點。在切向流過濾中,使進料流平行于多孔膜流動,以避免堵塞。然而,盡管已實現使用切向流過濾從大量條件細胞培養基中濃縮外泌體,但受制于其一次性模塊的成本高,高剪切應力,難以處理小體積樣品等因素而難以應用于臨床分析。天津外泌體科技有限公司

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