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GLTx糖尿病細胞模型胰島素分泌性強

來源: 發布時間:2024年08月04日

HumanCellDesign在人源胰島β細胞模型的研發中不斷突破,致力于提供更高效、更可靠的細胞工具。通過多年的研究和實驗,HCD的科學家們成功地開發出了一系列高質量的細胞模型,這些模型在糖尿病研究中表現出優異的功能性和穩定性。這些細胞不僅能夠模擬天然胰島β細胞的胰島素分泌功能,還能夠在實驗室環境中穩定生長和繁殖,為研究人員提供了寶貴的研究資源。作為一個開創性的生物技術公司,HumanCellDesign已經走在了人源細胞模型研發的前沿。通過其獨特的細胞工程技術,HCD能夠生成高度均一、功能性強的人源胰島β細胞。這些細胞不僅能夠在實驗室環境中大量生產,還能穩定表達各種重要的胰島細胞標記物。這些細胞模型廣泛應用于糖尿病研究中,從基礎研究到藥物篩選,HCD的細胞系都發揮了重要作用,為科學家們提供了寶貴的研究工具。糖尿病細胞模型EndoC-BH5 細胞聚集并形成球體,這些球體是大小和形狀均質。GLTx糖尿病細胞模型胰島素分泌性強

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EndoC-βH5細胞是一種新型人類胰腺β細胞解決方案,可用于開發人類糖尿病模型以及藥物篩選和驗證平臺,產生流程為:DNA構建,慢病毒載體產生,人胎兒胰腺外植體與pTRIPDU3loxP-pY-TK-RIP405-SV40-LT和pTRIPDU3loxPpY-TK-RIP405-hTERT慢病毒載體共轉導,移植到SCID小鼠的腎囊下,導致八個月后形成胰島素瘤,從而獲得EndoC-βH5。EndoC-βH1和增殖的EndoC-βH5細胞分別在Opti-β1和Ulti-b1培養基中的βCoat涂層塑料板上培養。使用胰蛋白酶(0.05%)每7天繁殖一次細胞。流式細胞術分析表明所有EndoC-βH5細胞均呈胰島素陽性,并且在絕大多數細胞中檢測到PDX1和NK6.1表達(分別為92.3%和90%)。EndoC-βH5細胞在涂層塑料上形成小的貼壁簇。EndoC-bH細胞家族糖尿病細胞模型中國區總代理商糖尿病細胞模型真實模擬胰島B細胞分泌,且分泌性強。

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HumanCellDesign構建了EndoC-BH1、EndoC-BH3、EndoC-βH5、GLTxEndoC-βH5、HLA-A2EndoC-βH5等一系列的胰島B細胞模型。通過多輪次優化改良,獲得的功能胰腺B細胞,無限接近天然人源胰島B細胞,其胰島素分泌功能與天然細胞類似,基于PDX1/NKX6.1關鍵基因驗證的細胞均一性達到90%以上,在2.8mM和11mM葡萄糖劑量下表現出10倍的胰島素分泌反應,對GLP-1R激動劑、Exendin-4刺激產生明顯增強,且可實現批量化生成,實現穩定供應。此外,HumanCellDesign開發系列人源胰島B細胞模型EndoC-BH5的同時,開發了配套的細胞培養試劑,可用于細胞培養和后續相關實驗。

表達HLA-A2的EndoC-βH5-HLA-A2系是通過每105細胞使用100ngp24衣殼蛋白與pTRIPDU3CMVHLA-A2IRESPURO慢病毒轉導EndoC-βH5來產生的。在1mg/ml嘌呤霉素存在下將細胞擴增三周以選擇轉導的細胞。為了完全成熟,將EndoC-βH5和EndoC-βH5-HLA-A2細胞再培養3周,并用5mM他莫昔芬和0.5mM更昔洛韋處理,以切除永生化基因并選擇切除的細胞。使用胰蛋白酶(25300e054)收集所得細胞,表達EndoC-βH5細胞的修飾HLA-A2引發同種異體反應性T淋巴細胞ji huo,概括了1型糖尿病中涉及的一些自身免疫機制。糖尿病細胞模型可用于糖尿病炎癥研究。

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這些小鼠在 2 至 3 個月內出現低血糖,胰島素陽性細胞大量擴增。這種體內擴增有助于維持大量增殖的胰島素細胞,并允許定義允許的培養條件,在這種條件下,可以在體外建立永生化細胞系。Human Cell Design(HCD)開發了一種用于在人類胎兒組織中使用靶向Zhong liu產生功能的人類β細胞系。在胰島素啟動子的控制下,用表達 SV40LT 的慢病毒載體轉導人類胎兒胰腺芽。Human Cell Design 開發了創新且安全的人類β細胞系生產方法。首先,將每個轉導的人類胎兒胰腺芽移植到 2 或 3 只 SCID 小鼠的腎被膜下,因為該部位是人類胰腺發育的允許部位。在 6 到 8 個月內,所有移植的小鼠都發生了原發性胰島素瘤,這導致它們的血糖水平下降。與其他胰腺移植相比,原發性胰島素瘤是高度血管化的。然后將原發性胰島素瘤中這些高度血管化的區域分離,用在大鼠胰島素啟動子控制下表達 hTERT 的慢病毒進行轉導,并移植到其他 SCID 小鼠中。糖尿病細胞模型EndoC-BH5 細胞以穩健且可重復的方式分泌胰島素以響應葡萄糖刺激。EndoC-BH2糖尿病細胞模型RNA測序驗證胰島細胞基因表達

在 糖尿病細胞模型EndoC-BH5 細胞中檢測到所有對 B 細胞身份和功能重要的轉錄因子的表達.GLTx糖尿病細胞模型胰島素分泌性強

EndoC-βH5細胞dai biao了一種獨特的可儲存且隨時可用的人類胰腺β細胞模型,具有高度穩健和可重復的特征。因此,此類細胞與β細胞功能的研究、新藥的篩選和驗證以及疾病模型的開發相關。RNAseq研究已經證實了β細胞轉錄因子和功能標記物(包括腸促胰島素受體)的豐富表達,并且細胞因子誘導炎癥途徑以及抗原加工和呈遞的基因表達特征。同時表達EndoC-βH5細胞的修飾HLA-A2可以引發特異性A2同種異體反應性CD8T細胞ji huo。Human cell design 構建了EndoC-BH1,En-doC-BH3, EndoC-βH5, GLTx EndoC-βH5 , HLA-A2 EndoC-βH5等一系列的胰島B細胞模型。GLTx糖尿病細胞模型胰島素分泌性強

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