免疫組化的特點：1、特異性強：免疫學的基本原理決定抗原與抗體之間的結合具有高度特異性，因此，免疫組化從理論上講也是組織細胞中抗原的特定顯示，如角蛋白（keratin）顯示上皮成分，LCA顯示淋巴細胞成分。只有當組織細胞中存在交叉抗原時，才會出現交叉反應。 2、敏感性高：在應用免疫組化的起始階段，由于技術上的限制，只有直接法、間接法等敏感性不高的技術，那時的抗體只能稀釋幾倍、幾十倍；由于ABC法或SP三步法的出現，使抗體稀釋上千倍、上萬倍甚至上億倍仍可在組織細胞中與抗原結合，這樣高敏感性的抗體抗原反應，使免疫組化方法越來越方便地應用于常規病理診斷工作。3、定位準確、形態與功能相結合：該技術通過抗原抗體反應及呈色反應，可在組織和細胞中進行抗原的準確定位，因而可同時對不同抗原在同一組織或細胞中進行定位觀察，這樣就可以進行形態與功能相結合的研究，對病理學領域開展深入研究是十分有意義的。免疫組化能提高疾病診斷的準確性。徐州免疫組化掃描

免疫組織化學染色方法：1、按標記物質的種類，如熒光染料、放射性同位素、酶(主要有辣根過氧化物酶和堿性磷酸酶)、鐵蛋白、膠體金等可分為免疫熒光法、放射免疫法、酶標法和免疫金銀法等。2、按染色步驟可分為直接法(又稱一步法)和間接法(二步、三步或多步法);與直接法相比，間接法的靈敏度提高了許多。3、按結合方式可分為抗原一抗體結合，如過氧化物酶-抗過氧化物酶法和親和連接，如卵白素-生物素-過氧化物酶復合物(ABC)法、鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化物酶連結(SP)法等，其中SP法是常用的方法。珠海組織芯片免疫組化掃描免疫組化可助力制定更合理的治療方案。

免疫組化結果的強度半定量或定量分析方法概括為四點：1、視覺評分，如萊比錫系統按強度分級結合陽性比例評分，或HSCORE計算染色強度平均值。2、圖像分析軟件自動/半自動處理，量化顏色強度、分割陽性區域并統計分析。3、累積光密度(IOD)分析，累加特定顏色像素光密度以對比染色強度。4、機器學習與AI輔助，提升分析精度與效率。關鍵在于建立統一標準、確保分析一致性，包括參照區域選擇、拍照條件標準化及軟件校準，并設置陰/陽性對照驗證準確性。

在免疫組化實驗中，切片厚度對實驗結果具有明顯影響，主要體現在以下幾個方面：1、抗原暴露與檢測：較薄的切片能夠更好地展示組織結構的細節，并有助于抗原的充分暴露。這有利于抗體與抗原的充分結合，從而提高檢測的靈敏度和準確性。例如，對于淋巴結、腎等組織，切片厚度通常不超過3μm，以確保抗原的充分暴露。2、觀察效果：切片過厚會導致細胞重疊，影響顯微鏡下的觀察效果。細胞重疊會掩蓋某些細節，使結果分析變得困難。同時，過厚的切片還可能導致脫片現象，進一步影響實驗結果的可靠性。3、試劑滲透性：較薄的切片有利于試劑的滲透，使得抗體、顯色劑等試劑能夠更快地到達抗原所在位置，提高反應效率。相反，過厚的切片會阻礙試劑的滲透，導致反應不充分或結果不準確。4、實驗效率：在相同條件下，較薄的切片更容易被染色和觀察，從而提高實驗效率。同時，薄切片所需的試劑量也相對較少，有助于降低實驗成本。免疫組化實驗中的切片厚度對實驗結果具有重要影響。根據組織類型和實驗需求選擇合適的切片厚度至關重要。一般來說，對于需要較高靈敏度和準確性的實驗，應選擇較薄的切片；而對于需要展示組織結構細節的實驗，可適當增加切片厚度。免疫組化的應用有那些？

免疫組化，全稱為免疫組織化學技術（Immunohistochemistry），是結合了免疫學與組織化學原理的一種檢測技術。它利用抗原與抗體之間特異性的相互作用，通過將標記（如熒光素、酶標記）的特異性抗體應用于組織或細胞切片上，來識別和定位組織或細胞內的目標抗原，如蛋白質或多肽。這一過程不 能夠顯示出目標分子在細胞或組織中的分布情況，還能對其進行定性、定量分析，甚至達到亞細胞結構的分辨率。免疫組化技術是病理學、生物醫學研究中不可或缺的工具，對于疾病的診斷、了解疾病發生機制、指導臨床醫療方案（尤其是Tumor學領域）具有重要意義。免疫組化用于Tumor診斷，可確定細胞特征。佛山多重免疫組化

免疫組化技術有助于鑒別不同的細胞類型。徐州免疫組化掃描

免疫組化實驗中的對照實驗設置對于驗證實驗結果的準確性和可靠性至關重要。以下是對照實驗設置的主要步驟和要點：1、陽性對照：選擇已知含有目的抗原的組織切片或細胞樣本作為陽性對照。與待檢樣本同步進行免疫組化實驗流程，包括一抗、二抗的孵育和顯色反應。目的是驗證實驗流程的有效性，確保在抗原存在的情況下能夠產生陽性信號。2、陰性對照：選擇不表達目的抗原的組織切片或細胞樣本作為陰性對照。同樣與待檢樣本同步進行實驗流程。目的是檢測實驗過程中是否存在非特異性信號或假陽性結果。陰性對照應呈陰性反應。3、空白對照：省略一抗孵育步驟， 進行二抗孵育和顯色反應。用于排除二抗引起的非特異性背景染色。4、同型對照：使用與一抗種屬來源一致、亞型相同、免疫球蛋白相同的抗體作為對照。目的是確定目的蛋白與一抗的結合是特異性的，而不是與其他蛋白質之間的非特異性結合。5、抑制對照：通過添加過量的未標記特異性抗體與熒光抗體混合，抑制其與靶抗原的結合。結果應呈陰性或明顯減弱的熒光，進一步確認實驗結果的特異性。徐州免疫組化掃描