免疫組化在什么情況下進行組織抗原修復,抗原修復的條件是什么?
(1)由于組織中部分抗原在甲醛或多聚甲醛固定過程中,發生了蛋白之間交聯及醛基的封閉作用,從而失去抗原性。通過抗原修復,使得細胞內抗原決定族重新暴露,提高抗原檢測率。
(2)修復方法從強到弱一般分為三種,高壓修復、微波修復、胰酶修復。修復液也分為若干種(具體的可以查閱相關資料,大量的:中性的、高pH的等)。
(3)微波修復,我們一般用6min*4次,效果不錯。
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免疫組化如何比較大限度地降低組織非特異性染色?
(1)縮短一抗/二抗孵育時間、稀釋抗體來控制。這是重要的一條。
(2)一抗用多克隆抗體易出現非特異性著色,建議試用單克隆抗體看看。
(3)內源性過氧化物酶和生物素在肝臟、腎臟等組織含量很高(含血細胞多的組織),需要通過延長滅活時間和增加滅活劑濃度來降低背景染色;
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(4)非特異性組分與抗體結合,這需要通過延長二抗來源的動物免疫血清封閉時間和適當增加濃度來加強封閉效果;
(5)縮短DAB孵育時間或降低DAB濃度/過氧化氫濃度等;
(6)適當增加PBS沖洗次數和浸洗時間,在一抗、二抗或SP孵育之后的浸洗尤為重要;
(7)防止標本染色過程中出現干片,這容易增強非特異性著色。 山西小鼠免疫組化多少錢免疫組化的那些小知識,都在這里!
細胞屬性的判定,免疫組化也可以進行這方面的臨床應用。通過特定抗體標記出細胞內相應的抗原成分,來判定細胞的屬性,確定cancer的來源。如細胞角蛋白(CK)是上皮性標記,CK陽性提示cancer為上皮源性cancer;降鈣素抗體是甲狀腺髓樣cancer特有的標記;甲狀腺球蛋白(Tg)陽性提示是甲狀腺濾泡性cancer;前列腺特異性抗原(PSA)只見于前列腺上皮;膠質纖維酸性蛋白(GFAP)陽性則提示膠質cancer;CD20和CD79a陽性則提示B細胞淋巴瘤;平滑肌肌動蛋白(Actin)陽性提示cancer為平滑肌源性;胃腸道間質瘤中原cancer基因蛋白產物CD117陽性;血管源性cancer中內皮細胞標記物CD34陽性等等。如果您需要做實驗外包,可以與我們英瀚斯生物進行聯系。
免疫組化分類中,免疫熒光方法,英瀚斯生物為您進行介紹。一開始建立的免疫組織化學技術。它利用抗原抗體特異性結合的原理,先將已知抗體標上熒光素,以此作為探針檢查細胞或組織內的相應抗原,在熒光顯微鏡下觀察。當抗原抗體復合物中的熒光素受激發光的照射后即會發出一定波長的熒光,從而可確定組織中某種抗原的定位,進而還可進行定量分析。由于免疫熒光技術特異性強、靈敏度高、快速簡便,所以在臨床病理診斷、檢驗中應用比較廣。英瀚斯生物實驗外包,多種病理染色熟練掌握,可做免疫組化!
免疫組化臨床應用中,可以對傳染性疾病診斷。應用抗病毒、細菌、zhen菌和寄生蟲抗原的特異性抗體進行免疫組化染色,可以檢測和診斷許多傳染性疾病病原微生物,如乙型肝炎病毒(HBV)、巨細胞病毒(CMV)、人乳T狀瘤病毒(HPV)、皰疹病毒(HSV)、丙型肝炎病毒(HVC)、細小病毒B19、人禽流行性感冒病毒(AIV)、嚴重急性呼吸綜合征冠狀病毒(SARS)等等,由于免疫組化在傳染性疾病診斷中具有及時性、低風險性、高敏感性、特異性、有效性等特點,可以用于(1)用于人類新病原微生物的識別;(2)提供快速的形態學診斷,使嚴重傳染性疾病得以早期醫療;(3)在無法取得新鮮組織或尚無培養方法的情況下,提供診斷并對發病機制進行研究和認識。英瀚斯生物專業做實驗外包服務,一站式醫學科研平臺。免疫組化相關知識匯總。山西動物組織免疫組化外包
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確定來源不明的轉移瘤的原發部位,臨床上免疫組化也可以進行操作。對于來源不明的轉移瘤,用免疫組化技術有助于確定惡性cancer的組織學來源,進一步確定原發部位。如角蛋白抗體(CK20)在胃腸道cancer、膽管cancer、胰腺cancer中陽性,而在肺cancer、乳腺cancer、腎cancer中陰性;Tg陽性可考慮甲狀腺轉移;波形蛋白(Vimentin)陽性支持肉瘤的診斷;前列腺特異性抗原(PSA)陽性可考慮前列腺轉移;甲狀腺球蛋白陽性可考慮甲狀腺濾泡細胞cancer;肌動蛋白(Actin)、肌球蛋白(Myosin)、結蛋白(Desmin)、肌紅蛋白(Myoglobin)陽性可考慮橫紋肌肉瘤;S-100蛋白陽性支持黑色素瘤的診斷;等等這些都為cancer的醫療及預后提供了依據。山東切片免疫組化價格