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來源: 發(fā)布時間:2024年12月28日

病理實驗外包,病理染色切片常見問題及解決方法:1.切片彎曲且不能形成直帶●原因:①蠟塊上下或左右兩邊不平行。②蠟塊與切片刀刀口不平行。③組織塊外形不整齊。④切片刀各處的鋒利程度不一致。●解決方法:①將蠟塊四邊反復(fù)修平對稱。②調(diào)節(jié)蠟塊夾持器,使其與切片刀平行。③修整組織塊時,注意修切整齊。④移動切片刀,更換刀口位置。2.切片上出現(xiàn)裂紋●原因:①切片刀上有小缺口,或刀口不平整。②組織中可能含有較硬之物質(zhì),如固定液之結(jié)晶石灰質(zhì)。③包埋時石蠟凍結(jié)太慢。●解決方法:①切片刀某處有缺口,可調(diào)換刀口部位或重新磨刀。刀口上缺口過多且不平整,可先將刀鋒垂直在磨刀石上輕輕磨數(shù)次,然后按常規(guī)磨刀田。②組織中硬性物質(zhì)太多,則不宜用。③糾正包埋時的缺點。一般待蠟塊周圍凝結(jié)一層,即可放入冷水中。南京英瀚斯,專業(yè)的病理染色實驗服務(wù)平臺。病理實驗外包檢測 承接各類大醫(yī)學(xué)實驗!專業(yè)!可靠。湖北比較好的病理實驗外包實驗室

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病理實驗外包,病理染色fish染色介紹,熒光原位雜交技術(shù)(fluorescenceinsituhybridization),簡稱FISH。是利用熒光標記的特異核酸探針與細胞內(nèi)相應(yīng)的靶DNA分子或RNA分子雜交,通過在熒光顯微鏡或共聚焦激光掃描儀下觀察熒光信號,來確定與特異探針雜交后被染色的細胞或細胞器的形態(tài)和分布,或者是結(jié)合了熒光探針的DNA區(qū)域或RNA分子在染色體或其他細胞器中的定位。FISH比較常使用的靶序列是16SrRNA,根據(jù)rRNA目標區(qū)域可設(shè)計寡核苷酸探針,進行種屬特異性鑒定;將處理好的樣品置于熒光顯微鏡下,選擇分散較好的區(qū)域來觀察。三色(或者更多)熒光激發(fā)下,觀察到不同顏色的熒光圖像。通常選用20X物鏡來掃描樣品雜交區(qū)域,40X或100X物鏡下觀察樣品,從一定的方向進行計數(shù),并對計數(shù)情況進行分析。南京英瀚斯,專業(yè)的病理染色實驗服務(wù)平臺。靠譜的病理實驗外包服務(wù)病理實驗外包所需樣本如何保存。

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病理實驗外包比較常見的實驗是免疫組化染色,免疫組織化學(xué)的突出優(yōu)點。1.高度的特異性:抗原--抗體反應(yīng)是特異性比較強的反應(yīng)之一。免疫組織化學(xué)所用的抗體必須是特異性強的多價或單價抗體,具有高度的識別能力,在抗原識別上可達到單個氨基酸的水平。2.敏感性高:現(xiàn)代免疫組織化學(xué)采用各種有效方法比較大限度保存細胞或組織內(nèi)待檢物質(zhì)的抗原性,或采用各種增敏方法,或使用高敏感、高親和力的抗體等手段,保證可檢出細胞內(nèi)超微量的抗原成分,用顯微鏡觀察結(jié)果。因此,它是在細胞、分子水平或基因水平的檢測技術(shù)。3.方法步驟統(tǒng)一:若掌握一種基本的技術(shù)操作方法步驟,則一通百通。4.形態(tài)、機能和代謝密切結(jié)合:免疫組化是一種綜合性檢測手段,將定性、定位和半定量密切結(jié)合;將形態(tài)、機能和代謝密切結(jié)合為一體的研究和檢測技術(shù)。

病理實驗外包,南京英瀚斯可開展冰凍切片免疫熒光染色1.冰凍切片室溫晾干15min,可用含10%正常山羊血清的PBS室溫封閉切片1小時(此步可不洗)。2.滴加適當比例稀釋的一抗或一抗工作液(抗體的量視組織大小而定,原則是可以均勻覆蓋組織面,且保證整個過程中不會使組織干涸)。3.將切片放在加了PBS的免疫組化濕盒,室溫孵育2小時或4℃過夜。4.第二天先將濕盒放到37℃回溫1h,然后吸取片上的一抗進行回收,將切片插入到小染缸PBS沖洗。5.滴加用PBS稀釋好的二抗(避光)置于分子雜交箱中37℃孵育1小時。回收二抗,切片置于染缸內(nèi),PBS洗5min×3次。6.滴加DAPI工作液染核,室溫10~20min(工作濃度0.1%染色15min)。7.回收DAPI,滴加5-10μl抗熒光衰減封片劑或中性樹膠,用處理干凈的蓋玻片封片,即可到熒光顯微鏡或者共聚焦顯微鏡下觀察拍照。8.做好的片放在切片盒內(nèi),置于4℃冰箱,可保存一周左右。南京英瀚斯生物-病理實驗外包檢測_疾病醫(yī)學(xué)模型_。

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病理實驗外包,染色常見染色介紹天狼星紅染色:主要由天狼星紅染色液、Mayer蘇木素染色液組成,主要用于各種組織病變時對膠原纖維異常或纖維增生的研究中,在普通光學(xué)顯微鏡下心臟血管等組織的膠原纖維被染成紅色,在偏振光鏡下對各種纖維化病變的分型和分級研究有一定的幫助作用。采用免疫組化技術(shù)也可顯示Ⅰ、Ⅲ型膠原纖維,但所用抗體昂貴,操作費時,而采用天狼星紅染色試劑便宜,操作簡單。天狼星紅染色液操作步驟1、組織固定于10%福爾馬林固定液,常規(guī)脫水包埋。2、切片厚6μm,常規(guī)脫蠟至水。3、天狼星紅染色液滴染1h。4、流水稍沖洗,去除切片表面染液。5、Mayer蘇木素染色液染細胞核8~10min。6、流水沖洗10min。7、常規(guī)脫水透明,中性樹膠封固。天狼星紅染色可用作肝纖維化以及腎纖維化模型的定性與膠原纖維沉積的半定量分析。南京英瀚斯,專業(yè)的病理染色實驗服務(wù)平臺。南京病理實驗外包檢測,優(yōu)先南京英瀚斯。湖北比較好的病理實驗外包實驗室

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病理實驗外包常見染色介紹Warthin-Starry銀染:Warthin-Starry銀染染色原理在于螺旋體表面的黏蛋白與銀結(jié)合,呈黑色。染色結(jié)果:菌絲及顆粒呈黑色,背景呈黃色。銀染一種是檢測聚丙烯酰胺凝膠中蛋白質(zhì)的方法,其原理是銀離子在堿性pH環(huán)境下被還原成金屬銀,沉淀在蛋白質(zhì)的表面上顯色。銀染的方法種類很多,有文獻報道的就有100多種。但是其準確的染色機制還不是特別地清楚。由于銀染的靈敏度很高,可染出膠上低于1ng的蛋白質(zhì)點,故普遍地用在2D凝膠分析上,及極低蛋白含量測定的垂直凝膠中。主要是用于垂直凝膠電泳中低豐度蛋白的檢測,如內(nèi)源性GST-Pulldown、Co-IP等實驗中相互作用蛋白的研究。南京英瀚斯,專業(yè)的病理染色實驗服務(wù)平臺。湖北比較好的病理實驗外包實驗室

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