ArcticZymes廠家對鹽活性核酸酶系列產品(Salt Active Nucleases,SANs)的生產及質控,在符合ISO13485:2016體系基礎上,增加了cGMP質控標準,如microbes、endotoxin、蛋白酶等,符合USP-EP要求。廠家提供HQ級別和GMP級別的SAN HQ高鹽核酸酶和M-SAN HQ中鹽核酸酶,從成本角度分別滿足臨床前和早期臨床階段、商業化大規模生產階段的需求;且GMP級SAN HQ高鹽核酸酶已完成在FDA的藥物主文件(Drug Master File, DMF)申報備案,助力加快藥物申報流程。M-SAN HQ中鹽核酸酶不含動物源成份,無蛋白酶活性;上海70950-160中鹽核酸酶使用方法
慢病毒大規模純化的捕獲步驟包括:膜過濾澄清,隨后切向流過濾/超濾或者體積排阻色譜濃縮。此外,需用核酸酶(benzonase或M-SAN HQ中鹽核酸酶)來去除細胞殘留的、質粒來源的DNA污染。這兩個步驟順序可以調整,依據項目工藝而定。兩種工藝路線各有優缺點:先用核酸酶消化的優點是可去除大的DNA片段,且后續步驟可以去除殘留核酸酶;但所用的核酸酶的量也非常大。與此相反,將核酸酶步驟后置的優點是大幅降低核酸酶的量(成本降低);但后面的步驟必須有將核酸酶去除的能力。此外,后期用核酸酶的缺點是核酸污染可能會結合慢病毒顆粒形成沉淀,進而導致慢病毒在純化中流失,從而影響得率。鹽城70960-001中鹽核酸酶工廠直銷鑒于biologics制品更嚴格的質量要求,廠家對M-SAN HQ中鹽核酸酶的生產及質控符合更高標準。
Mayer等(2023)以measles virus(麻疹病毒,MV)為例,評估了四種不同核酸酶(BenzonaseTM、DeneraseTM、M-SAN HQ中鹽核酸酶及SAN HQ高鹽核酸酶)對于染色質DNA去除的效果。Vero細胞通過微載體貼壁培養來生產麻疹病毒MV,72h后收獲上清液,使用3μm cellulose filter(Sartorius)過濾后分裝多份,置于-80℃保存便于后續使用。在解凍后的上清中調節對應鹽濃度,并加入50 U/ml核酸酶,37℃孵育2hr進行消化,消化后留樣;將消化后上清液過Capto Core 700 (Cytiva)柱子,收集流穿液,之后洗雜、洗脫,并分別留樣。通過SDS-PAGE分析發現,相比Benzonase等傳統核酸酶,在生理鹽條件下M-SAN HQ中鹽核酸酶更高效將染色質DNA剪切成更小片段,甚至將核小體DNA剪切更徹底。
M-SAN HQ中鹽核酸酶在生理鹽條件下的優勢,讓其成為生物生產工藝中去除核酸污染的更好選擇。經過多年的市場宣傳,M-SAN HQ中鹽核酸酶品質已得到多個全球TOP CDMOs認可,納入其工藝開發篩選平臺。此外,目前全球有10+臨床項目涉及的病毒載體生產用到M-SAN HQ中鹽核酸酶。對于同一個項目,用M-SAN HQ替代Benzonase全能核酸酶,酶量減少、HCD去除效果更優、病毒載體產量也有一定程度的提高,酶相關成本降為原有的1/5以內,極大降低了病毒載體生產成本。江西中鹽核酸酶售后服務哪家好呢,歡迎咨詢上海倍篤生物 。
ArcticZymes Technologies有兩條產品線,分別針對分子診斷和生物藥物生產兩個領域。在分子診斷領域,產品有蝦堿酶(SAP)、UNG酶、等溫擴增酶(IsoPol)、連接酶、蛋白酶、內切核酸酶及外切核酸酶等,涉及核酸抽提、擴增及測序等應用。在生物藥物生產領域,全球創新的鹽活性核酸酶(Salt Active Nucleases, SANs)系列產品以其獨特優勢,在細胞基因藥物及RNA藥物生產中表現出更好的性能。其中,鹽活性核酸酶SANs系列產品包含兩款產品,分別是SAN HQ高鹽核酸酶和M-SAN HQ中鹽核酸酶;兩款酶的差別在于發揮酶活的鹽濃度范圍分別是生理鹽濃度范圍和400-600mM高鹽濃度范圍。常州中鹽核酸酶價格哪家好呢,歡迎咨詢上海倍篤生物 。蕪湖中鹽核酸酶工廠直銷
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文章作者對酶法去除dsDNA進行了優化研究,兩種酶濃度梯度為25U/ml、50U/ml及100U/ml,Mg2+濃度為5mM,通過PicoGreen檢測dsDNA含量。結果發現,25U/ml的M-SAN HQ中鹽核酸酶對dsDNA去除效果明顯優于100U/ml的Benzonase。此外,在酶切反應速度方面,M-SAN HQ有更明顯的優勢,——在低濃度底物dsDNA(如20ng/ml)條件下,50U/ml的M-SAN HQ在5分鐘內將dsDNA降解到2ng/ml左右;而50U/ml的Benzonase在30分鐘孵育消化后,dsDNA濃度依然是12ng/ml左右。上海70950-160中鹽核酸酶使用方法