Medium-Salt Active Nuclease High Quality (M-SAN HQ,中鹽核酸酶),是用Pichia pastoris表達的重組非特異內切核酸酶,廣泛應用于生產工藝流程中,在生理鹽條件下去除雙鏈及單鏈的DNA及RNA。這款核酸酶的適宜pH范圍很廣(pH 7.2-8.7),且在125-250 mM鹽濃度內具有適宜活性。在細胞培養液或收獲的培養上清中,不需調整任何組分,直接加入M-SAN HQ即可表現高核酸酶活性。相比傳統的全能核酸酶,M-SAN HQ中鹽核酸酶在生理鹽條件下,對HCD的去除更高效、更徹底。因此,M-SAN HQ中鹽核酸酶非常適合部分病毒載體(如慢病毒、逆轉錄病毒及溶瘤病毒等)的生產。無錫中鹽核酸酶哪家好呢,歡迎咨詢上海倍篤生物 。四川特色中鹽核酸酶銷售電話
ArcticZymes Technologies成立于20世紀80年代后期,總部位于挪威北部的特羅姆瑟(Troms?);立足北極海洋區,致力于從海洋生物中識別新的冷適應酶,用于分子研究、體外診斷和藥物領域。以其產品的獨特性質及超過30年的生產經驗積淀,ArcticZymes Technologies得到國際分子診斷及生物藥物領域客戶的肯定及大力支持,ArcticZymes產品線已用于診斷產品及生物藥物生產中。2005年,ArcticZymes在Olso證券交易所上市,并且持續得到挪威國家基金的支持。上海中鹽核酸酶用途相比全能核酸酶,M-SAN HQ中鹽核酸酶能將HCD酶切成更小片段,破壞核小體結構。
在干細胞醫治領域, 某些疾病靠單純的細胞替代并不能取得滿意效果。利用逆轉錄病毒和慢病毒將外源目的基因整合到干細胞基因組,對基因功能缺失的遺傳病具有良好療效,但也存在一定致瘤風險。相比之下,CRISPR/Cas9基因編輯技術能夠精確實現基因敲入、敲除及堿基修復。因此, 采用CRISPR/Cas9基因編輯技術對干細胞進行基因改造,不僅能夠增加干細胞醫治的疾病范圍,也能更大程度地保證療效的安全性。目前,CRISPR/Cas9在干細胞醫治領域發揮著重要作用,同時更多由CRISPR/Cas9編輯的干細胞藥物正在開發中。
經典的慢病毒載體(LV)的生產工藝如下,——三質粒系統瞬時轉染HEK293細胞系,轉染24小時后LV由轉染陽性細胞生產并排出到培養上清液中;收獲上清培養液后,加入核酸酶去除HCD污染,通過澄清步驟去除大的細胞碎片等雜質;下游純化步驟分離LV載體,純化方法包括切向流過濾TFF、色譜純化及超速離心;純化后的LV病毒顆粒經過無菌過濾,更換到優化后的配方中,灌裝并冷凍保存。每批Car-T生產時取對應量的LV病毒,切忌反復凍融,否則LV病毒會失活。浙江中鹽核酸酶價格哪家好呢,歡迎咨詢上海倍篤生物 。
在不同的鹽濃度條件下,AAV病毒載體的存在形式不同。低鹽濃度條件下,AAV病毒顆粒表面會通過電荷作用等非特異結合到HCD上,從而產生病毒顆粒團聚現象。隨著溶液鹽濃度上升,AAV病毒顆粒與HCD的離子相互作用會被破壞,AAV病毒顆粒會逐漸解離。當鹽濃度升到更高范圍(>400mM左右),AAV病毒顆粒與HCD的結合更弱,AAV顆粒更穩定。因此,在高鹽濃度溶液中,AAV顆粒更加穩定,且有數據表明高鹽濃度不會削弱AAV的侵染能力。所以,我們推薦提高AAV病毒生產中的鹽濃度。M-SAN HQ中鹽核酸酶的檢測標準,都符合USP-EP要求。上海質量中鹽核酸酶
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在生物工藝流程中,需要使用核酸酶去除終產品中的核酸污染,而核酸酶作為外源成份,也需要在生產流程中去除。核酸酶去除工藝包括熱滅活法、酶抑制劑、離子交換和親合層析法等。慢病毒LV的pI在6.0-6.5左右,包裝了完整基因組DNA后的AAV病毒顆粒PI大致為5.9,來自于S.marcescens的全能核酸酶pI 6.85左右,M-SAN HQ中鹽核酸酶pI 8.7左右。因此,在同樣的條件下,從LV/AAV溶液中去除M-SAN HQ中鹽核酸酶比去除Benzonase全能核酸酶更容易、更徹底。四川特色中鹽核酸酶銷售電話