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云南比較好的外泌體檢測

來源: 發(fā)布時(shí)間:2022年10月20日

外泌體鑒定:雙層囊膜結(jié)構(gòu)是外泌體重要標(biāo)志之一,但普通光學(xué)顯微鏡難以觀察到此種亞顯微結(jié)構(gòu)。而透射電子顯微鏡(Transmissionelectronmicroscope,TEM)分辨率可達(dá)0.1~0.2nm,可將被觀察物體放大至數(shù)百萬倍,非常適合進(jìn)行外泌體雙層囊膜超微結(jié)構(gòu)觀測。英瀚斯生物技術(shù)團(tuán)隊(duì)擁有豐富的外泌體電鏡樣本處理與鑒定經(jīng)驗(yàn),可為客戶提供高質(zhì)量外泌體TEM檢測服務(wù),獲得樣本中外泌體典型形態(tài)特征圖片。外泌體作為直徑在30-150 nm的細(xì)胞外囊泡,***存在于血液、唾液、尿液等多種體液中。在生理和病理?xiàng)l件下外泌體檢測服務(wù),一站式生物外泌體檢測服務(wù)平臺。云南比較好的外泌體檢測

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外泌體表面有其特異性標(biāo)記物(如CD63、CD9蛋白),用包被抗標(biāo)記物抗體的磁珠與外泌體囊泡孵育后結(jié)合,即可將外泌體吸附并分離出來。磁珠法具有特異性高、操作簡便、不影響外泌體形態(tài)完整等優(yōu)點(diǎn),但是效率低,外泌體生物活性易受pH和鹽濃度影響,不利于下游實(shí)驗(yàn),難以***普及。外泌體是大多數(shù)細(xì)胞分泌的40 - 150nm的膜泡,存在于細(xì)胞培養(yǎng)基、血漿、血清、唾液、尿液、羊水和惡性腹水等生物液體中。外泌體檢測可找英瀚斯生物,測序、電鏡、粒徑分析都可做。云南比較好的外泌體檢測外泌體關(guān)鍵知識,你必須知道的那些事,南京英瀚斯生物。

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外泌體是指包含了復(fù)雜 RNA 和蛋白質(zhì)的小膜泡 (30-150nm),現(xiàn)今,其特指直徑在40-100nm的盤狀囊泡。其主要來源于細(xì)胞內(nèi)內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體,經(jīng)多囊泡體外膜與細(xì)胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中。現(xiàn)已證實(shí)可以分泌外泌體的細(xì)胞有:肥大細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、間充質(zhì)干細(xì)胞等。雖然外泌體有諸多開發(fā)潛力,但基于外泌體的臨床應(yīng)用依然發(fā)展緩慢。其中,有兩個主要的技術(shù)障礙限制了外泌體的基礎(chǔ)和應(yīng)用研究。英瀚斯生物外泌體。

外泌體的提取主要包括以下幾種方式。一是超速離心法,這是外泌體提取比較常用的方法。此種方法得到的外泌體量多,但是純度不足,電鏡鑒定時(shí)發(fā)現(xiàn)外泌體聚集成塊,由于微泡和外泌體沒有非常統(tǒng)一的鑒定標(biāo)準(zhǔn),也有一些研究認(rèn)為此種方法得到的是微泡不是外泌體。二是過濾離心,這種操作簡單、省時(shí),不影響外泌體的生物活性,但同樣存在純度不足的問題。三是密度梯度離心法,用此種方法分離到的外泌體純度高,但是前期準(zhǔn)備工作繁雜,耗時(shí),量少。四是免疫磁珠法,這種方法可以保證外泌體形態(tài)的完整,特異性高、操作簡單、不需要昂貴的儀器設(shè)備,但是非中性pH和非生理性鹽濃度會影響外泌體生物活性,不便進(jìn)行下一步的實(shí)驗(yàn)。五是PS親和法,該方法將PS(磷脂酰絲氨酸)與磁珠結(jié)合,利用親和原理捕獲外泌體囊泡外的PS。該方法與免疫磁珠法相似,獲得的外泌體形態(tài)完整,純度比較高。由于不使用變性劑,不影響外泌體的生物活性,外泌體可用于細(xì)胞共培養(yǎng)和體內(nèi)注射。2016.9《ScientificReports》雜志發(fā)表了該方法比較新數(shù)據(jù),表明PS法可提取相當(dāng)高純度的外泌體外泌體提取試劑盒,南京英瀚斯。

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外泌體是細(xì)胞的外膜囊泡,是細(xì)胞外納米級膜囊泡的一個子集,直徑為30 - 150nm。根據(jù)其釋放機(jī)制和大小,EVs分為以下三種類型:外泌體(直徑小于150 nm)、MVs/脫落顆粒(100~1000 nm)和凋亡小體(500~4000 nm)。人體中幾乎所有類型的細(xì)胞均能產(chǎn)生外泌體,包括免疫細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞和干細(xì)胞等。外泌體成分取決于來源、宿主健康和細(xì)胞外刺激。外泌體成分可以從原細(xì)胞轉(zhuǎn)移到靶細(xì)胞。外泌體中包含多種細(xì)胞成分,包括mRNA、miRNAs、HSP90和HSP70等等。南京英瀚斯,專業(yè)的外泌體提取、鑒定服務(wù)。云南比較好的外泌體檢測

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外泌體中常見的細(xì)胞質(zhì)蛋白是Rabs蛋白,是鳥苷酸三磷酸酶(GTPases,)家族的一種。它可以調(diào)節(jié)外泌體膜與受體細(xì)胞的融合,有文獻(xiàn)報(bào)道稱RAB4, RAB5和 RAB11主要出現(xiàn)于早期以及回收的核內(nèi)體中,RAB7 和 RAB9主要出現(xiàn)于晚期的核內(nèi)體。現(xiàn)有大量的研究發(fā)現(xiàn)外泌體中含有40種RAB蛋白。除了RAB蛋白,外泌體中富含具有外泌體膜交換以及融合作用的膜聯(lián)蛋白(包括膜聯(lián)蛋白1、2、4、5、6、7、11等)。外泌體膜上富含參與外泌體運(yùn)輸?shù)乃目缒さ鞍准易澹–D63, CD81 和CD9))、熱休克蛋白家族((HSP60, HSP70, HSPA5, CCT2 和HSP90以及一些細(xì)胞特異性的蛋白包括A33(結(jié)腸上皮細(xì)胞來源)、MHC-Ⅱ(抗原提呈細(xì)胞來源)、CD86(抗原提呈細(xì)胞來源)以及乳凝集素(不成熟的樹突狀細(xì)胞)。云南比較好的外泌體檢測

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