外泌體（Exosome）介導瘤血管的形成和轉(zhuǎn)移。外泌體（Exosome）能將自身的細胞因子IL-8和VEGF釋放到細胞外，作用于內(nèi)皮細胞膜表面受體，導致瘤血管快速形成并較終通過發(fā)生EMT過程促進瘤的遷移。瘤細胞來源的外泌體（Exosome）中含有血管生長素、血管內(nèi)皮生長因子等，這些細胞因子以不同的作用方式促進瘤血管的形成，如VEGF通過喚醒磷酸酯酶C和第二信使的形成，誘導纖維蛋白溶解酶原活化物的表達，使得基底膜降解，從而促進瘤細胞的遷移。外泌體的數(shù)量：人體中大約有1014個，近乎于平均每個細胞產(chǎn)生1000-10000個。上海干細胞外泌體

外泌體運輸?shù)幕蝾愃幬镆部梢允莔iRNA，miRNA是一類非編碼的內(nèi)源性RNA，主要用于調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄后的基因表達。miRNA主要通過與mRNA的未翻譯的區(qū)域(UTRs)結(jié)合起到抑制基因表達和降解mRNA的作用。與siRNA不同，miRNA抑制mRNA的表達不需要完美的堿基配對，因此每種miRNA可以抑制多種蛋白質(zhì)的表達，而每種siRNA只針對一種蛋白質(zhì)。miRNA的運載也存在著種種挑戰(zhàn):miRNA體內(nèi)穩(wěn)定性差、生物分布不理想、易被體內(nèi)酶降解以及容易引起副反應(yīng)等。越來越多的研究表明外泌體也是體內(nèi)運載miRNA的優(yōu)良載體，并且利用外泌體運輸miRNA的zhiliao方法已經(jīng)在許多疾病模型中得以應(yīng)用。上海干細胞外泌體外泌體具有良好的生物兼容性、穩(wěn)定性和內(nèi)在靶向性，使其在藥物遞送方向大有潛力。

外泌體的提取主要包括以下幾種方式。一是超速離心法，這是目前外泌體提取較常用的方法。此種方法得到的外泌體量多，但是純度不足，電鏡鑒定時發(fā)現(xiàn)外泌體聚集成塊，由于微泡和外泌體沒有非常統(tǒng)一的鑒定標準，也有一些研究認為此種方法得到的是微泡不是外泌體。二是過濾離心，這種操作簡單、省時，不影響外泌體的生物活性，但同樣存在純度不足的問題。三是密度梯度離心法，用此種方法分離到的外泌體純度高，但是前期準備工作繁雜，耗時，量少。膜受體的識別是外泌體細胞反應(yīng)的基礎(chǔ)，它可能活躍受體并隨后導致相關(guān)信號通路的活躍。

外泌體的提取、純化和鑒定：每一個外泌體研究者較初都要為外泌體的分離提取而煩惱。選擇的分離方式是利用超速離心的方式分離外泌體，并且可以選用梯度密度離心法得到純度更高的外泌體。另外利用外泌體自身的物理化學性質(zhì)所研發(fā)的各種市售的外泌體分離提取試劑盒也能達到分離效果。提取的外泌體的鑒定方式主要是通過形態(tài)學（電子顯微鏡技術(shù)）、粒子大小以及標志蛋白等方式實現(xiàn)的。近來的研究發(fā)現(xiàn)外泌體在比較多生理病理上起著重要的作用，如免疫中抗原呈遞、瘤子的生長與遷移、組織損傷的修復等。不同細胞分泌的外泌體具有不用的組成成分和功能，可作為疾病診斷的生物標志物。外泌體具有脂質(zhì)雙層膜結(jié)構(gòu)，能比較好的保護其包被的物質(zhì)，且能靶向特定細胞或組織，因此是一種比較好靶向給藥系統(tǒng)。腹水外泌體融合實驗外泌體的膜蛋白有可能與細胞膜蛋白作用，活躍細胞內(nèi)通路。與正常細胞來源外泌體在結(jié)構(gòu)分子上的差異倍受矚目。

外泌體作為疾病診斷的標志物具有其獨特優(yōu)勢:(1)與正常細胞相比，病變細胞產(chǎn)生的外泌體在分泌量和內(nèi)容物方面存在明顯差異。病變的細胞和組織能夠產(chǎn)生更多外泌體。(2)由于特殊的生成方式，外泌體的組成不同于來源細胞。其內(nèi)包含的一些特異性蛋白質(zhì)能夠揭示外泌體的起源、結(jié)構(gòu)和運輸方式，有利于深入了解外泌體的產(chǎn)生機制。(3)病變細胞分泌的外泌體通過胞吐的過程進入血液、尿液等體液，囊泡狀結(jié)構(gòu)能夠保護外泌體內(nèi)部生物分子不受體液中蛋白酶、磷酸酶、核酸酶等干擾，有利于保持其結(jié)構(gòu)完整和生物活性，通過對此類體液進行分析可以實現(xiàn)疾病的無創(chuàng)或微創(chuàng)檢測。外泌體具有檢測包括病癥在內(nèi)的許多病理狀況的潛力，可用于對心血管疾病和病癥等多種疾病的診斷和監(jiān)測。上海干細胞外泌體

外泌體本身的惰性相當高，但它們與細胞膜融合可將所攜帶的物質(zhì)和信號傳遞到受體細胞并改變其生物學功能。上海干細胞外泌體

外泌體（Exosomes）是細胞分泌到胞外的一種囊泡（ExtracellularVesicles，EVs），其大小為30-150nm，具有雙層膜結(jié)構(gòu)和茶托狀形態(tài)，含有豐富的內(nèi)含物（包括核酸、蛋白和脂質(zhì)等），參與細胞間的分子傳遞。外泌體普遍存在于細胞培養(yǎng)上清以及各種體液中，包括血液、唾液、尿液、乳汁等，同時也存在于組織樣本中，如腦組織、肌肉組織、脂肪組織等。腦組織分離方法簡述：將腦組織剪成薄片，放入離心管中加上消化液進行消化，經(jīng)水浴、反復輕輕上下顛倒，再用移液間斷緩慢吹吸至消化結(jié)束。隨后加入培養(yǎng)基于消化液中，混勻，置于冰上。再進行一系列的差速超速離心過程，包括除雜、濾膜過濾、超離等。結(jié)尾用PBS重懸外泌體，用重懸后的外泌體進行下面的透射電鏡（TEM）、納米粒徑追蹤分子（NTA）和markerWB鑒定。上海干細胞外泌體

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