如何避免血清中產生沉淀?按如下操作可避免沉淀的產生:解凍血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發生。血清分裝凍存時,須規則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一。勿直接由-20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質凝結而發生沉淀。勿將血清置于37℃太久,否則血清會變得渾濁,同時血清中許多較不穩定的成份也會因此受到破壞,從而影響血清的品質。血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。若必須做血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時搖晃均勻。溫度過高,時間過久或搖晃不均勻,都會造成沉淀物的增多。血清在凍入低溫冰箱前,必須預留一定體積空間,否則易發生污染或玻璃瓶凍裂。無錫標準級血清哪里有
如何挑選適合細胞生長的血清?原代或是正常細胞株建議使用BI特級胎牛血清,對生長條件要求高的細胞和干細胞可選用所用特級胎牛血清,或胚胎干細胞所用胎牛血清。由于血清有批間差異,細胞種類不同,我們建議客戶購買前可先申請試用樣品,通過篩選得到滿意的血清批號,之后根據項目需求可進行批量囤貨,以保證該項目所需血清質量的一致性,可排除不同批號血清對于實驗帶來的影響。如何正確保存血清:需要長期保存的血清必須儲存于-20℃冰箱(未開封血清有效期為5年)。若存放于4℃,請勿超過1個月,若一次無法用完一瓶,建議將血清無菌分裝并冷凍。無錫標準級血清哪里有血清指在血漿中除去纖維蛋白原及某些凝血因子后分離出的淡黃色透明液體或指纖維蛋白原已被除去的血漿。
添加胎牛血清的時候要注意避免把沉淀加入培養液,因為如果培養液有沉淀的存在,會使得其中培養的細胞產生大量的黑點,除此之外,細胞的表面還很可能會覆蓋一層油狀物質,總之出現這樣的情況會極其不利于細胞的正常生長。那么為了較為大程度減少血清的損失,可以把所有有沉淀的血清進行收集并做離心處理,之后便可將上清液加入培養液中使用。注意解凍的方法:再高質量的胎牛血清也要在使用的時候堅持謹慎的原則,因此在解凍血清的時候,要細心地考慮到其解凍時體積一般會增大的特點,事先為血清預留出能夠容納膨脹體積的空間。如此一來,便不會發生污染或者容器凍裂的情況。另外較為好采用國際通用的解方式解凍血清。
購買回來的血清都是冰凍狀態,使用時需要融化,融化過程在溫度較低的狀態下慢慢進行,待溶解完成,我們觀察到的胎牛血清會表現出黃色或紅色。并不是越紅越好,也不是越黃越好,淡黃色到淡紅色才是比較正常的顏色范圍。很多培養細胞的寶寶會發現進口血清有沉淀,從而懷疑血清的質量問題。那么,血清中可能出現的沉淀物是什么?纖維蛋白,它是經常出現的較大的沉淀物,可以達到1-2mm,可以用肉眼觀察到。磷酸鈣,它也是常見的一種沉淀物,通常會使血清出現渾濁,并且在37℃培養的時候會增加。這種沉淀物在倒置顯微鏡下觀察像小黑點,這些小黑點由于布朗運動看上去可以活動,因此經常被誤認為是微生物污染。膽固醇、脂肪酸酯以及一些蛋白質,它們也是血清中出現沉淀物的常見原因。關于細胞生長,其實很多試驗以及經驗表明沉淀物不會影響細胞培養,當然血清生產商也是這樣說的。每100ml人血清含有蛋白質6-8g,其中主要是白蛋白和球蛋白。
很好的胎牛血清:微生物,包括細菌、霉菌、支原體、噬菌體、各類病原毒等。隨著國內血清廠家生產條件的改善提高,細菌、霉菌等“大型”微生物幾乎能100%控制,支原體經過0.1μm過濾,大多也能消除。大腸桿菌噬菌體的污染還是比較嚴重的,主要是生產環境過程中帶入,又無法過濾,很難徹底消除,但對血清質量影響不大。病原毒,特別是BVDV,在國產血清中幾乎90%以上都存在,這類微生物是影響國產血清質量的重要因素之一,而進口胎牛血清相對國產血清而言,檢出率不高。血清還含有一些微量元素和離子,他們在代謝醫治中起重要作用。無錫標準級血清哪里有
血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養條件不同而異。無錫標準級血清哪里有
血清的保存應該注意:熱滅活是指56℃,30分鐘加熱已完全解凍的血清。加熱過程中須規則搖晃均勻,此熱處理的目的是使血清中的補體成分(complement)滅活,除非必須,一般不建議作此熱處理,因為熱處理會造成血清沉淀物明顯增多,而且還會影響血清的質量,補體參與反應有:細胞毒作用,平滑肌細胞收縮,肥大細胞和血小板釋放組胺,增強吞噬作用,促進淋巴細胞和巨噬細胞發生化學趨化和活化。一般廠商提供的血清為無菌,無需再過濾除菌,如發現血清有懸浮物,則可將血清加入培養液內一起過濾,切勿直接過濾血清。無錫標準級血清哪里有
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