如何挑選適合細(xì)胞生長(zhǎng)的胎牛血清?原代或是正常細(xì)胞株建議使用BI特級(jí)胎牛血清,對(duì)生長(zhǎng)條件要求高的細(xì)胞和干細(xì)胞可選用特級(jí)胎牛血清,或胚胎干細(xì)胞胎牛血清。由于血清有批間差異,細(xì)胞種類不同,我們建議客戶購(gòu)買(mǎi)前可先申請(qǐng)?jiān)囉脴悠罚ㄟ^(guò)篩選得到滿意的血清批號(hào),之后根據(jù)項(xiàng)目需求可進(jìn)行批量囤貨,以保證該項(xiàng)目所需血清質(zhì)量的一致性,可排除不同批號(hào)血清對(duì)于實(shí)驗(yàn)帶來(lái)的影響。如何正確保存胎牛血清?需要長(zhǎng)期保存的血清必須儲(chǔ)存于-20℃冰箱(未開(kāi)封血清有效期為5年)。若存放于4℃,請(qǐng)勿超過(guò)1個(gè)月,若一次無(wú)法用完一瓶,建議將血清無(wú)菌分裝并冷凍。血清提供促接觸和伸展因子使細(xì)胞貼壁免受機(jī)械損傷。杭州標(biāo)準(zhǔn)級(jí)胎牛血清多少錢(qián)
胎牛血清融化:胎牛血清在融化過(guò)程中,瓶子里冰塊的底部你會(huì)看見(jiàn)亮亮的蛋白絲在下沉,如同蜂蜜溶于水時(shí)的亮線,這就是血清中大量的蛋白在快速融化,而水的熔點(diǎn)高于蛋白,融化的速度是比蛋白慢的。(回想一下高級(jí)冰淇淋和大棒冰的區(qū)別,你懂得?。┰囅?,如果采用4℃過(guò)夜的方法,1瓶500毫升的血清融化好,大約需要10小時(shí)左右,蛋白先融化,沉降在瓶子的底部,水融化的速度比蛋白慢,于是造成大量蛋白溶于少量的水,此時(shí)就很容易有一些蛋白飽和析出,(大多是脂蛋白和纖連蛋白),這就是血清融化中產(chǎn)生沉淀的重要原因之一。杭州標(biāo)準(zhǔn)級(jí)胎牛血清多少錢(qián)倘若把胎牛血清存放在4℃冰箱,請(qǐng)不要超過(guò)一個(gè)月。
胎牛血清:解凍胎牛血清時(shí),請(qǐng)按照規(guī)定的的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫),若胎牛血清解凍時(shí)改變的溫度太大(如-20℃至37℃),實(shí)驗(yàn)顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。解凍胎牛血清時(shí),請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。請(qǐng)勿將胎牛血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,胎牛血清會(huì)變得混濁,同時(shí)胎牛血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會(huì)因此受到損害,而影響胎牛血清的質(zhì)量。胎牛血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無(wú)須做此步驟。若必須做胎牛血清的熱滅活,請(qǐng)遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時(shí)搖晃均勻。
胎牛血清都有哪些重要的指標(biāo):一、內(nèi)的毒性,內(nèi)的毒性是革蘭氏陰性菌的細(xì)胞壁外壁層上的特有成分。當(dāng)細(xì)菌死亡自溶或粘附在其它細(xì)胞時(shí),才表現(xiàn)其毒性。內(nèi)的毒性直接參與細(xì)胞凋亡,血清中內(nèi)的毒性含量越低,對(duì)細(xì)胞毒性越小,越利于細(xì)胞的生長(zhǎng)和傳代;內(nèi)的毒性含量過(guò)高,會(huì)直接導(dǎo)致細(xì)胞提前老化。國(guó)際上規(guī)定,胎牛血清的級(jí)別,應(yīng)以內(nèi)的毒性水平的高低來(lái)確定,其中,特級(jí)胎牛血清的內(nèi)的毒性應(yīng)<10EU/ml。二、血紅蛋白含量,胎牛血清的顏色會(huì)根據(jù)血紅蛋白含量的不同表現(xiàn)出黃色、淡黃色、橘紅色、微紅色等。細(xì)胞培養(yǎng)用血清的標(biāo)準(zhǔn)是血紅蛋白含量不高于20mg/dl,顏色越紅,數(shù)值越高;反之,數(shù)值越低。實(shí)際上,血紅蛋白含量的高低對(duì)血清并無(wú)直接影響。這個(gè)指標(biāo)的意義在于能體現(xiàn)出采的血過(guò)程的嚴(yán)謹(jǐn)規(guī)范程度,良好的操作能降低血清的溶血。血清的主要作用是提供基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、提供和各種生長(zhǎng)因子、提供結(jié)合蛋白。
胎牛血清:胎牛血清是由胎牛血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物,含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)物等,其組成成份大部分已知,但還有一部分尚不清楚,這些物質(zhì)對(duì)促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)或抑制生長(zhǎng)活性是達(dá)到生理平衡的。其中不含細(xì)胞、纖維蛋白和凝血因子。胎牛血清在細(xì)胞培養(yǎng)方面通常優(yōu)于其他類型的血清。由于胎牛從未接觸過(guò)外界,與新生牛和小牛血清相比,抗體含量明顯降低,故抗體與培養(yǎng)細(xì)胞發(fā)生交叉反應(yīng)的風(fēng)險(xiǎn)也較低,是理想的細(xì)胞生長(zhǎng)補(bǔ)充劑。所有胎牛血清均在當(dāng)?shù)孬F醫(yī)部門(mén)的監(jiān)督下從注冊(cè)的出口屠場(chǎng)采集,符合國(guó)際動(dòng)物協(xié)會(huì)要求。血清的保存應(yīng)該注意:需要長(zhǎng)期保存的血清必須儲(chǔ)存于-20℃-70℃低溫冰箱中。杭州標(biāo)準(zhǔn)級(jí)胎牛血清多少錢(qián)
胎牛血清經(jīng)自然層析、離心后收集得到去除血細(xì)胞、纖維蛋白等成分的淡黃色透明上清液體。杭州標(biāo)準(zhǔn)級(jí)胎牛血清多少錢(qián)
胎牛血清在細(xì)胞培養(yǎng)中的作用:1.提供對(duì)維持細(xì)胞指數(shù)生長(zhǎng)的Hormone,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒(méi)有或量很少的營(yíng)養(yǎng)物,以及主要的低分子營(yíng)養(yǎng)物。2.提供結(jié)合蛋白,能識(shí)別維生素、脂類、金屬和其他Hormone等,能結(jié)合或調(diào)節(jié)它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。3.有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,起到釋放毒性作用。4.是細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來(lái)源。5.起酸堿度緩沖液作用。6.提供蛋白酶抑制劑,使在細(xì)胞傳代時(shí)使剩余胰蛋白酶失活,保護(hù)細(xì)胞不受傷害。7.參與細(xì)胞凍存。在細(xì)胞培養(yǎng)中,胎牛血清加入基礎(chǔ)培養(yǎng)基的濃度大多為5%~20%(常見(jiàn)為10%)的。具體到不同試驗(yàn),應(yīng)依據(jù)文獻(xiàn)報(bào)導(dǎo),或細(xì)胞類型或基礎(chǔ)培養(yǎng)基的成分來(lái)確定較佳濃度。胎牛血清應(yīng)在-20℃儲(chǔ)存,運(yùn)輸應(yīng)干冰冷鏈運(yùn)輸,避免反復(fù)凍融,確保血清中因子活性不受影響,保證血清優(yōu)良品質(zhì)。杭州標(biāo)準(zhǔn)級(jí)胎牛血清多少錢(qián)
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