胎牛血清:胎牛血清用于細胞培養已經超過半個世紀了,20世紀50年代末TheodorePuck在細胞和組織培養中初次加入胎牛血清(FBS)來刺激細胞生長。后來人們發現,由于胎牛未進食過母乳,所以IgG的含量極低,不會阻礙細胞生長,而且胎牛血清中含有豐富的促進細胞生長的成分,如維生素、運輸蛋白、微量元素、生長因子等,胎牛血清生產的一切環節均有嚴格的質量把控。出廠的血清無細菌、支原體和病毒等微生物的威脅,且內的毒性含量低,滿足絕大多數細胞培養需求。胎牛血清是細胞培養中用量較大的天然培養基。福州OriCell胎牛血清哪里有賣
胎牛血清要求:1、性狀、外觀:淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。2、蛋白質含量:3.5%~5.0%(w/v)。3、血紅蛋白含量:≤0.02%(w/v)。4、無菌檢驗:陰性。5、支原體檢驗:陰性。6、細菌內的毒性:≤5(EU/ml)。7、牛腹瀉病毒:陰性。8、大腸桿菌噬菌體:陰性。9、支持細胞增殖:(Sp2/0-Ag14)生長曲線(接種濃度)較大增殖濃度≥2.5×106個/ml,細胞倍增時間:≤15h,克隆率:≥85%。血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、無機物等。福州OriCell胎牛血清哪里有賣胎牛血清保存需要避免陽光的照射,需要用恒溫冰箱來進行保存。
如果胎牛血清解凍后發現有絮狀沉淀物出現,應該如何去除?胎牛血清中的沉淀物出現有很多種原因,但較普遍的原因是由于胎牛血清中脂蛋白的變性所造成,而血纖維蛋白在胎牛血清解凍后,也會存在于胎牛血清中,這也是造成沉淀物的主要原因之一。但少量絮狀沉淀物,并不影響胎牛血清本身的質量。如果想要去除這些絮狀沉淀物,可以采取離心法,400g,離心1~2分鐘,將上清重新分裝即可使用。胎牛血清中含有豐富的促進細胞生長的成分,如維生素、運輸蛋白、微量元素、生長因子等。
細胞培養用到的胎牛血清需要滅活嗎:細胞培養胎牛血清是不可或缺重要培養基,胎牛血清中含有諸多細胞生長因子,維生素,氨基酸等物質。我們常會看到胎牛血清的標注上有對產品滅活也有沒有滅活的,胎牛血清為什么不需要熱滅活便可以使用。事實上,熱滅活目的是為了去除血清中補體等對熱敏感的物質,但是在胎牛血清中對補體的滅活則明顯沒有必要。胎牛血清中含有的C1,C6單單達成年動物血清的1-3%,而其它補體成分單單有成年動物的5-50%,至于補體的主要成分C3在胎牛血清中則幾乎不能檢出。熱滅活反而影響胎牛血清中的活性成分。
胎牛血清的功能:胎牛血清是細胞培養中用量較大的天然培養基,含有豐富的細胞生長必須的營養成份,常用于動物細胞的體外培養,具有極為重要的功能。1.提供對維持細胞指數生長的Hormone,基礎培養基中沒有或量很少的營養物,以及主要的低分子營養物。2.提供結合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他Hormone等,能結合或調變它們所結合的物質活力。3.有些情況下結合蛋白質能與有毒金屬和熱原質結合,起到釋放毒性作用。4.是細胞貼壁、鋪展在塑料培養基質上所需因子來源。5.起酸堿度緩沖液作用。6.提供蛋白酶抑制劑,使在細胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,保護細胞不受傷害。胎牛血清適合脈沖示蹤實驗(同位素標記研究細胞代謝)適合轉染CHO后的篩選。福州OriCell胎牛血清哪里有賣
胎牛血清在水浴過程中,胎牛血清的液面要完全浸在水中。福州OriCell胎牛血清哪里有賣
胎牛血清的生產工藝:透析胎牛血清,顧名思義,需經過透析。它是在4°C下用特定的透析膜對血清在0.15MNaCl中透析。由于該透析膜只允許10kDa以下的小分子穿過,在滲透壓的作用下,這些小分子便從血清中滲析到透析膜外的NaCl溶液中。10kDa以下的小分子有化學小分子、核苷酸、某些鹽、低分子量蛋白質、氨基酸、細胞因子、葡萄糖、殘留Antibiotic和其他外源分子。那么透析的效果如何?以及透析到何時呢?由于不可能監測全部小分子,因此常選用葡萄糖為體現。血清中葡萄糖<5mg/dL,即可以停止透析了。透析過程中,除監測葡萄糖濃度外(可采用葡萄糖氧化酶方法測定),還需仔細監測pH值和滲透壓。福州OriCell胎牛血清哪里有賣
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