被特定部位的細胞獲取的瘤子外泌體可為肉瘤的轉移準備轉移前微環境。用肺轉傾向的肉瘤細胞來源的外泌體處理小鼠后可使骨轉傾向的肉瘤細胞重新定向。外泌體的蛋白質組學分析發現不同部位傾向性的肉瘤細胞來源的外泌體具有不同的整合素（integrin）表達譜，整合素α6β4和α6β1與肺轉有關，而整合素αvβ5與肝轉有關。敲低整合素α6β4和αvβ5可減少外泌體被靶部位細胞獲取，進而分別降低了肺和肝的轉移。進一步研究發現外泌體整合素被細胞獲取后活躍了Src的磷酸化和促炎的S100基因的表達。通過臨床數據分析顯示外泌體整合素可作為預測肉瘤轉移的部位傾向性的診斷指標。外泌體研究使用血漿樣本進行實驗較好。杭州外泌體粒徑檢測

外泌體的提取分離方法：1、PEG-base沉淀法：聚乙二醇可與疏水性蛋白和脂質分子結合共沉淀，早先應用于從血清等樣本中收集病毒，現在也被用來沉淀外泌體，其原理可能與競爭性結合游離水分子有關。利用PEG沉淀外泌體存在不少問題：比如純度和回收率低，雜蛋白較多（假陽性），顆粒大小不均一，產生難以去除的聚合物，機械力或者吐溫-20等化學添加物將會破壞外泌體等，因此發表文章時易受質疑。2、試劑盒提?。航鼛啄陙?，市場上已出現各種商業化的外泌體提取試劑盒，有的是通過特殊設計的過濾器過濾掉雜質成分，有的則采用空間排阻色譜法(SEC)進行分離純化，也有的則利用化合物沉淀將法外泌體沉淀出來。杭州外泌體粒徑檢測外泌體發揮功能：將細胞或組織中多余的或者有害的分子排除，這為研究生物標志物提供了可能。

PEG沉淀法分離外泌體：通常通過將無水聚合物，如聚乙二醇（PEG），與樣品混合來沉淀外泌體。PEG聚合物競爭性結合水分子，增加疏水性蛋白和脂質分子的相互結合力從而沉淀外泌體，然后通過離心分離外泌體。這種分離的方法快速，簡便，可用于各種起始體積（從100μL到幾毫升）適合于各種研究和臨床設定。然而，這種方法缺乏選擇性，PEG聚合物不只會導致外泌體小泡沉淀，還會引起其他細胞外囊泡、細胞外蛋白質和蛋白質聚集體沉淀。因此，在使用這種方法之前，必須進行樣品預處理，例如過濾或超速離心，以減少較終的外泌體制劑的污染。

外泌體（Exosomes）是細胞分泌到胞外的一種囊泡（ExtracellularVesicles，EVs），其大小為30-150nm，具有雙層膜結構和茶托狀形態，含有豐富的內含物（包括核酸、蛋白和脂質等），參與細胞間的分子傳遞。外泌體普遍存在于細胞培養上清以及各種體液中，包括血液、唾液、尿液、乳汁等，同時也存在于組織樣本中，如腦組織、肌肉組織、脂肪組織等。腦組織分離方法簡述：將腦組織剪成薄片，放入離心管中加上消化液進行消化，經水浴、反復輕輕上下顛倒，再用移液間斷緩慢吹吸至消化結束。隨后加入培養基于消化液中，混勻，置于冰上。再進行一系列的差速超速離心過程，包括除雜、濾膜過濾、超離等。結尾用PBS重懸外泌體，用重懸后的外泌體進行下面的透射電鏡（TEM）、納米粒徑追蹤分子（NTA）和markerWB鑒定。外泌體通過內體途徑分泌到細胞外空間，并將各種生物活性分子（貨物）轉運至靶細胞。

胞外囊泡和外泌體的異質性。細胞外囊泡的兩大類是胞外體和外泌體。胞外體通過質膜出芽釋放，大小在50~1mm之間。外泌體起源于內泌體途徑，通過形成包含ILVs的ESEs、LSEs，較終形成多泡體。當MVBs與質膜融合時，外泌體釋放(尺寸范圍~40~160nm)。外泌體是一個高度異質性的群體，具有獨特的誘導復雜生物學反應的能力。外泌體的異質性可以根據其大小、含量(載物)、對受體細胞的功能影響以及細胞來源來概念化。這些特征的不同組合導致了外泌體的復雜異質性。建立外泌體分離、表征以及效價測定的標準化方法將是外泌體作為診斷和診療用途之前需要解決的問題。杭州外泌體粒徑檢測

NTA技術已被作為外泌體表征手段之一。杭州外泌體粒徑檢測

外泌體的生物發生和鑒定。液體和細胞外成分，如蛋白質、脂類、代謝物、小分子和離子，可以通過內吞作用和質膜內陷，與細胞表面蛋白一起進入細胞。由此產生的胞腔側質膜芽的形成表現為質膜的外-內取向。這一出芽過程導致芽的形成可能與內質網、跨高爾基網絡(TGN)和線粒體預先形成的早期核內體融合。ESEs也可以與ER和TGN融合，這可能解釋了內吞物如何到達它們的。因此，一些ESEs可以包含膜和腔的成分，可以表示不同的起源。外泌體表面蛋白包括四聚體蛋白、整合蛋白、免疫調節蛋白等。外泌體可以包含不同類型的細胞表面蛋白、細胞內蛋白、RNA、DNA、氨基酸和代謝物。杭州外泌體粒徑檢測

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