病理實驗外包，病理染色常見染色介紹免疫熒光染色：免疫熒光技術（Immunofluorescence technique ）又稱熒光抗體技術，是標記免疫技術中發展比較早的一種。它是在免疫學、生物化學和顯微鏡技術的基礎上建立起來的一項技術。熒光抗體示蹤或檢查相應抗原的方法稱熒光抗體法；用已知的熒光抗原標記物示蹤或檢查相應抗體的方法稱熒光抗原法。這兩種方法總稱免疫熒光技術。在實際工作中熒光抗原技術很少應用，所以人們習慣將熒光抗體技術稱為免疫熒光技術。免疫學的基本反應是抗原-抗體反應。由于抗原抗體反應具有高度的特異性，所以當抗原抗體發生反應時，只要知道其中的一個因素，就可以查出另一個因素。免疫熒光技術就是將不影響抗原抗體活性的熒光色素標記在抗體（或抗原）上，與其相應的抗原（或抗體）結合后，在熒光顯微鏡下呈現一種特異性熒光反應。南京英瀚斯，專業的病理染色實驗服務平臺。病理實驗外包，病理染色服務，HE染色。新疆比較好的病理實驗外包

病理實驗外包，病理染色HE染色常見問題：Q1：HE染色比較常見的紅藍失調答：（1）偏藍色：蘇木素染色過深，分化不夠；伊紅試劑過期；伊紅染色時間太短，分化過度。（2）偏紅色：蘇木素染色過淺，分化過度；組織固定不佳，細胞核不著色；脫蠟不徹底，蘇木素染不上；蘇木素氧化成熟不夠；伊紅染色過深，分化不足。Q2：HE染色后出現的大白色斑塊或斑點答：脫蠟前烤片溫度偏低，時間過短，蠟未完全融化；切片在脫蠟溶劑中停留時間過短；脫蠟溶劑使用太久，得更新。新疆比較好的病理實驗外包病理實驗外包檢測,醫學實驗,動物模型構建。

病理實驗外包，病理染色常見染色介紹TUNEL染色：基因組DNA斷裂時，暴露的3’-OH可以在末端脫氧核苷酸轉移酶(TerminalDeoxynucleotidylTransferase,TdT)的催化下加上熒光素(FITC)標記的dUTP(fluorescein-dUTP)，從而可以通過熒光顯微鏡或流式細胞儀進行檢測，這就是TUNEL(TdT-mediateddUTPNick-EndLabeling)法檢測細胞凋亡的原理。實驗步驟使細胞或組織貼在載玻片上?固定?洗滌?通透?洗滌?預平衡?用熒光素12-dUTP標記斷裂的DNA鏈?終止反應?洗滌?封片?分析樣品南京英瀚斯，專業的病理染色實驗服務平臺。

病理實驗外包，病理染色常見染色介紹番紅-固綠（骨）染色：番紅O-固綠染色可直觀反映關節軟骨、軟骨下的骨組織結構，軟骨呈紅色，成骨呈綠色，對比鮮明，區分清晰，在關節軟骨及軟骨下骨的形態學研究中備受青睞。嗜堿性的軟骨組織與堿性染料番紅O結合呈現紅色，嗜酸性的骨組織和酸性染料固綠結合而呈綠色或藍色。本質上，番紅O與蛋白聚糖中的多聚陰離子物質（硫酸軟骨素和硫酸角質素）成正向比例結合（離子濃度），不與膠原結合，可間接反應基質中蛋白聚糖的含量與分布。正常的軟骨基質分布均勻一致，當軟骨受到損傷時，創傷刺激可使軟骨基質中糖蛋白立即釋放活化，使基質成分發生變化，導致番紅O淡染，甚至失染。固綠可與結構疏松的膠原纖維牢固結合，不宜褪色。簡要流程：石蠟切片/細胞爬片/冷凍切片→脫蠟至水→固綠染色→番紅O染色→脫水、透明、封片（中性樹膠）→番紅O-固綠染**（成骨呈綠色，軟骨呈紅色）。南京英瀚斯，專業的病理染色實驗服務平臺。病理實驗外包檢測，實驗經驗豐富，認真負責，方便高效。

病理實驗外包，南京英瀚斯可開展冰凍切片免疫熒光染色1.  冰凍切片室溫晾干15 min，可用含10%正常山羊血清的PBS室溫封閉切片1小時（此步可不洗）。2.  滴加適當比例稀釋的一抗或一抗工作液（抗體的量視組織大小而定，原則是可以均勻覆蓋組織面，且保證整個過程中不會使組織干涸）。3.  將切片放在加了PBS的免疫組化濕盒，室溫孵育2小時或4℃過夜。4.  第二天先將濕盒放到37℃回溫1 h，然后吸取片上的一抗進行回收，將切片插入到小染缸PBS沖洗。5.  滴加用PBS稀釋好的二抗（避光）置于分子雜交箱中37℃孵育1小時。回收二抗，切片置于染缸內，PBS洗5 min×3次。6.  滴加DAPI工作液染核，室溫10~20 min（工作濃度0.1%染色15 min）。7.  回收DAPI，滴加5-10 μl 抗熒光衰減封片劑或中性樹膠，用處理干凈的蓋玻片封片，即可到熒光顯微鏡或者共聚焦顯微鏡下觀察拍照。8.  做好的片放在切片盒內，置于4℃冰箱，可保存一周左右。病理實驗外包檢測-南京英瀚斯-生物實驗外包-大小鼠實驗。新疆比較好的病理實驗外包

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病理實驗外包，病理染色fish染色介紹，熒光原位雜交技術（fluorescence in situ hybridization），簡稱FISH。 是利用熒光標記的特異核酸探針與細胞內相應的靶DNA分子或RNA分子雜交，通過在熒光顯微鏡或共聚焦激光掃描儀下觀察熒光信號，來確定與特異探針雜交后被染色的細胞或細胞器的形態和分布，或者是結合了熒光探針的DNA區域或RNA分子在染色體或其他細胞器中的定位。FISH比較常使用的靶序列是16S rRNA，根據rRNA目標區域可設計寡核苷酸探針，進行種屬特異性鑒定；將處理好的樣品置于熒光顯微鏡下，選擇分散較好的區域來觀察。三色（或者更多）熒光激發下，觀察到不同顏色的熒光圖像。通常選用20X物鏡來掃描樣品雜交區域，40X或100X物鏡下觀察樣品，從一定的方向進行計數，并對計數情況進行分析。南京英瀚斯，專業的病理染色實驗服務平臺。新疆比較好的病理實驗外包

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