流式細胞技術針對外泌體的表面抗原標記物進行檢測，能夠實現外泌體的高通量、多通道分析。但是由于外泌體的粒徑小、折射率低，所以采用常規的流式細胞儀進行檢測時往往需要將外泌體與beads連接以增大表面積、增強反射，操作耗時又費力。Tian等搭建了一種高靈敏度的流式細胞儀(HSFCM)，將可檢測的外泌體粒徑降至40nm，能夠在不連接beads的情況下實現每分鐘10000個外泌體的檢測，并且能夠結合免疫熒光的方法進行外泌體標志蛋白質的定量檢測，目前該儀器已商品化。從外泌體中篩選的生物標志物，可用于疾病的診斷、預后及治理。牛奶提取試劑盒步驟

外泌體特指直徑在30-150nm的囊泡，其主要來源于細胞內多囊泡體，經多囊泡體外膜與細胞膜融合后釋放到胞外基質中。外泌體膜上富含參與外泌體運輸的四跨膜蛋白家族（CD63,CD81和CD9）、熱休克蛋白家族（HSP60,HSP70和HSP90），本示蹤病毒使用CD9作為生物標記，通過將CD9與熒光蛋白偶聯，帶熒光的膜蛋白會在表達至外泌體膜上，便于后續進行、觀察內化或其他實驗。攜帶有外源基因的慢病毒載體在慢病毒包裝質粒、細胞系的輔助下，經過病毒包裝成為有ganran力的病毒顆粒，通過ganran細胞或組織，實現外源基因在細胞或組織中表達。牛奶提取試劑盒步驟在細胞外基質中，外泌體膜蛋白可被蛋白酶剪切，碎片作為配體與細胞膜上的受體結合，喚醒細胞內的信號通路。

獲得囊泡粒徑分布的兩種方法動態光散射(DLS)和納米顆粒跟蹤分析(NTA)都被廣fan應用于外泌體顆粒數目和粒徑分布的測量，但兩種方法也各有不足。動態光散射法中散射光強度依賴于顆粒質量(體積)，混合體系中大囊泡的存在(即使只有很少的量)將嚴重影響測量結果，因此動態光散射法更適用于單分散體系。而且動態光散射法所得的結果強烈依賴于所應用的數學算法。而采用納米顆粒跟蹤分析儀對不同粒徑范圍的囊泡進行檢測時，為了得到準確的濃度和粒徑信息，需要根據所要測量的顆粒粒徑范圍對儀器分別校準，操作繁瑣。受檢測靈敏度所限，納米顆粒跟蹤分析儀適用于粒徑范圍50nm～1μm的顆粒，粒徑小于50nm的外泌體無法檢測。除此之外，兩種方法都依賴光散射和粒子的布朗運動進行分析，難以區分合成的納米材料、大蛋白質聚合體和生物囊泡。

在血液和大多數體液（如尿液、腦脊液、唾液、胸腹腔積液、羊水和乳汁等）中均可檢測到外泌體。血液外泌體的檢測通常采用EDTA抗凝血分離的血漿，miRNA等一些微小RNA則采用血清樣本。泌尿系統中存在大量的RNA水解酶可降解尿液中的裸miRNAs，但外泌體外膜則可幫助RNA免于被降解，因此研究尿液外泌體miRNAs更具有應用價值。相較于血清中相關miRNA的水平，腦脊液外泌體中的miR-21可作為膠質瘤診斷和預后的指標，特別對預測中流復發或轉移具有價值。唾液樣本在安靜狀態下主要來源于舌下腺和頜下腺，刺激狀態下則主要來源于腮腺。所有培養的細胞類型均可分泌外泌體。

血清中的miR-122和miR-145非常不穩定,將血清在4°C短期保存期間即發生降解,這可能是由外泌體的異質性所導致的。–80°C保存被公認是保存各種生物標本如尿、牛奶、血液和支氣管肺泡灌洗液適宜的保存環境,雖然這樣保存血漿可能產生含有大量“污染物”的外泌體。4°C保存雖然容易導致外泌體中蛋白和核酸的損失,但卻能夠避免凍融過程造成的囊泡破壞。外泌體雖然建議保存于-80°C環境下,但在處理或運輸過程中有時很難維持這種低溫條件。CHAROENVIRIYAKUL等提出一種凍干法以保存外泌體,在冷凍過程中使用海藻糖作為保護劑,海藻糖可以提供生物保護作用,如穩定蛋白質、細胞膜和脂質體;減少冷凍過程中冰的形成;防止蛋白質以及外泌體的聚集;減少分離和保存過程中細胞外囊泡的損失等。外泌體具有良好的生物兼容性、穩定性和內在靶向性，使其在藥物遞送方向大有潛力。牛奶提取試劑盒步驟

外泌體無法分析外泌體具有的生理功能，也是兩種提取方法的問題所在。牛奶提取試劑盒步驟

外泌體攜帶的與疾病進展緊密關聯的分子標志物可用于疾病進展的監視、檢測和診斷,是一種潛在的非侵入性生物標志物。由于外泌體本身可以作為抗原提呈小泡,且有較長的循環半衰期,可用于免疫學相關研究,同時,源自ai細胞的外泌體可以被工程化,發揮免疫刺激作用,可作為中流疫苗應用于ai癥的免疫zhiliao。此外,外泌體穩定而廣fan地分布在qi官和組織中,具有低免疫原性、高耐受性等特點,且良好的膜滲透性可使其通過血腦屏障,因此可用作組織和qi官特異藥物輸送系統,兼有高輸送效率和低副作用。因此,外泌體適合用作藥物載體遞送zhiliao劑(如阿霉素或姜黃素),zhiliao性miRNA、siRNA等核酸和蛋白質,運送至靶位點后實現靶向zhiliao。牛奶提取試劑盒步驟

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