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血液外泌體miRNA芯片

來源: 發布時間:2023年09月24日

外泌體是指包含了復雜RNA和蛋白質的小膜泡(30-150nm),現今,其特指直徑在40-100nm的盤狀囊泡。多種細胞在正常及病理狀態下均可分泌外泌體。其主要來源于細胞內溶酶體微粒內陷形成的多囊泡體,經多囊泡體外膜與細胞膜融合后釋放到胞外基質中。現在外泌體特指直徑在40-100nm的盤狀囊泡。多種細胞在正常及病理狀態下均可分泌外泌體。其主要來源于細胞內內溶酶體微粒內陷形成的多囊泡體,經多囊泡體外膜與細胞膜融合后釋放到胞外基質中。外泌體提純方法中,超速離心法和聚合物沉淀法(市售試劑盒)混入多種雜質。血液外泌體miRNA芯片

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外泌體作為細胞外囊泡的一個亞群,直徑集中于30~150nm。目前,基于粒徑大小分離外泌體的方法有超濾法、尺寸排除色譜法、靜水過濾透析法和非對稱場流分離法等。超濾法利用不同孔徑的濾膜,對樣品進行選擇性分離以獲得外泌體,一般分為壓力超濾和離心超濾。其中離心超濾效果更好,不jin能減輕力對外泌體的破壞,而且可通過增大離心力和延長離心時間提高外泌體產物濃度。但離心力過大或離心時間過長均有可能導致超濾膜或外泌體破裂。此外,超濾法可以和切向流過濾法、微控流法、超速離心法或凝膠過濾色譜法等方法結合進一步提高分離效率。血液外泌體miRNA芯片外泌體是內源性和質膜起源的不同類型的膜囊泡。

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由于卵巢中流細胞質膜上的磷脂酰絲氨酸(phosphati[1]dylserine,PS)可以外泌體形式分泌入血,惡性卵巢ai患者血漿外泌體中的PS水平明顯高于卵巢良xing病變患者和健康對照者,因此外泌體中的PS可用于協助早期卵巢惡性中流的篩查和診斷。外泌體可穿透血-腦脊液屏障的特點也為腦中流患者提供了早期診斷的重要工具。血漿微囊泡EGFRvIIImRNA已被證明可作為膠質母細胞瘤患者診斷的支持證據。2020年,DavidLyden和WilliamR.Jarnagin教授團隊合作,通過探究來自不同ai種組織、血漿和其他體液的426個人類樣品中細胞外囊泡和顆粒(extracellularvesicleandparticle,EVP)的蛋白質組學特征,鑒定出一批中流特異性血漿EVP蛋白(特異度和靈敏度分別為95%和90%),并可區分患者的中流類型,使基于外泌體的中流診斷和鑒別診斷向前邁進了一步。

各種細胞粘著分子在外泌體膜表面表達,由其決定外泌體被運輸往哪一種細胞,期望開發利用該特征的新型DDS。外泌體在體液中十分穩定,同時外囊泡所含的蛋白質和RNA被外泌體的脂質雙層膜所包被也不會分解。另外在從體液中提取外泌體后,體液可長期穩定保存,因此外泌體有望成為臨床檢測的新型疾病生物標記。外泌體與各種疾病的相關性被檢測出,特別是血液中釋放的病細胞來源的外泌體,其與正常細胞來源外泌體在結構分子上的差異倍受矚目,并作為癥狀早期診斷技術,應用于與癥狀進展相關的研究。甚至人們期望將尿液中的外泌體作為腎臟、前列腺疾病、膀胱疾病的新型診斷標記,髓液中的外泌體作為腦內種瘤和神經退行性疾病的新型標記物。有關外泌體分泌和攝取及其組成、“運載物”和相應功能的精確分子機制剛剛開始研究。

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外泌體(Exosome)是由細胞分泌而來的微小囊泡,直徑約為30-200nm,形態也呈現出多樣性。長鏈非編碼RNA(longnon-codingRNA)是一類轉錄本長度超過200nt、不編碼蛋白的RNA。近年來的研究表明lncRNA能在標貫遺傳、轉錄及轉錄后水平上調控基因表達,參與了X染色體沉默、基因組印記以及染色質修飾、轉錄jihuo、轉錄干擾、核內運輸等多種重要的調控過程,與人類疾病的發生、發展和防治都有著密切聯系。lncRNA芯片對lncRNA進行功能研究也被更多的關注,通過設計不同的lncRNA探針,可以更加快速、高通量地篩選出疾病或特定生物學過程中差異表達的lncRNA和mRNA信息,找到lncRNA的靶基因位點深入分析調控機制。干細胞外泌體可以有效活化提高細胞能量加速細胞排毒、淡化色斑。血液外泌體miRNA芯片

在抗原呈遞細胞中的外泌體發揮作用的報道后,人們對外泌體的興趣增強。血液外泌體miRNA芯片

Knepper等通過對透射電鏡得到的200個囊泡進行粒徑分析,結果表明尿液中外泌體的粒徑分布約為35~40nm,磷脂雙分子層厚度約為直徑的1/5~1/10。透射電鏡結合免疫金標記法能夠得到外泌體表面特征分子的信息,有助于揭示外泌體的產生機制與來源。動態光散射(dynamiclightscattering,DLS)和納米顆粒跟蹤分析(nanoparticletrackinganaly[1]sis,NTA)都是利用光學手段獲得囊泡粒徑分布的方法。兩者的不同之處在于動態光散射通過檢測散射光的強度計算得到顆粒粒徑,而納米顆粒跟蹤分析通過追蹤單個粒子的運動軌跡計算得到樣品濃度、粒徑分布等信息。血液外泌體miRNA芯片

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