病理實驗外包,病理染色fish染色介紹,熒光原位雜交技術(fluorescence in situ hybridization),簡稱FISH。 是利用熒光標記的特異核酸探針與細胞內相應的靶DNA分子或RNA分子雜交,通過在熒光顯微鏡或共聚焦激光掃描儀下觀察熒光信號,來確定與特異探針雜交后被染色的細胞或細胞器的形態(tài)和分布,或者是結合了熒光探針的DNA區(qū)域或RNA分子在染色體或其他細胞器中的定位。FISH比較常使用的靶序列是16S rRNA,根據(jù)rRNA目標區(qū)域可設計寡核苷酸探針,進行種屬特異性鑒定;將處理好的樣品置于熒光顯微鏡下,選擇分散較好的區(qū)域來觀察。三色(或者更多)熒光激發(fā)下,觀察到不同顏色的熒光圖像。通常選用20X物鏡來掃描樣品雜交區(qū)域,40X或100X物鏡下觀察樣品,從一定的方向進行計數(shù),并對計數(shù)情況進行分析。南京英瀚斯,專業(yè)的病理染色實驗服務平臺。病理實驗外包檢測,醫(yī)學實驗,動物模型構建。河南病理實驗外包服務
病理實驗外包,病理染色骨組織的處理方式:組織里存有鈣鹽可妨礙用常規(guī)方法制作良好切片。骨組織及鈣化病灶,經過固定后,需要先將鈣鹽除去使組織軟化,才能進行常規(guī)切片。如果脫鈣不全,則切片容易撕開或碎裂,損傷切片刀刀刃。脫去鈣鹽的過程,稱為脫鈣。骨組織固定24小時后,鋸下不超過0.5cm厚的薄骨片,以4%甲醛溶液固定后,進行脫鈣。骨組織過厚則需延長脫鈣時間,但長時間浸于強酸會影響切片染色效果。取材骨組織固定于10%甲醛溶液24小時后再鋸取厚度約0.5cm骨片固定以10%甲醛溶液固定2天脫鈣將組織置于脫鈣劑中,每日更換新鮮液,直至組織軟化為止除酸流水沖洗24小時脫水、浸蠟、切片進行常規(guī)脫水、透明、浸蠟、切片南京英瀚斯,專業(yè)的病理染色實驗服務平臺。河南病理實驗外包服務病理實驗外包,病理染色服務,HE染色。
病理實驗外包,病理染色常見染色介紹普魯士藍染色:普魯士藍染色(Prussianbluereaction)又稱為含鐵血黃素染色,即經過亞鐵**鉀和稀酸處理后可以產生藍色,常見于吞噬細胞內會間質內,主要顯示三價鐵鹽。Perls普魯士藍是非常經典的組織化學反應,是顯示組織內三價鐵的一種敏感、傳統(tǒng)優(yōu)良的方法,其染色原理為:亞鐵**鉀溶液使三價鐵離子從蛋白質中被稀鹽酸分離出來,三價鐵與亞鐵**鉀反應,生成一種不溶解的藍色化合物即三價鐵的亞鐵**物普魯士藍,所以該反應被稱為普魯士藍反應。三價鐵的亞鐵**物是一種很穩(wěn)定的化合物,在反應后可用紅色染色劑進行復染,如核固紅、伊紅、中性紅等。Perlsstain常用于顯示局部組織內各種出血***變,常見于吞噬細胞內。在判斷含鐵血黃素沉積時,用Perls反應可以得到證實,該染色方法可以很好的區(qū)分含鐵血黃素和其他色素。該染色液穩(wěn)定性好、可以長期保存、不易產生沉淀、應用范圍廣、可以進行復染。南京英瀚斯,專業(yè)的病理染色實驗服務平臺。
病理實驗外包,病理染色膠原纖維染色法1.VanGieson(V.G)***-酸性品紅法鮮紅色:膠原纖維黃色:肌纖維、細胞質、紅細胞藍褐色:胞核2.天狼星紅(Siriusred)***染色法紅色:膠原纖維綠色:細胞核黃色:其他另:天狼星紅***染色法:(偏光顯微鏡)Ⅰ型:強雙折光性,呈黃色或紅色纖維Ⅱ型:弱雙折光,呈多種色彩疏網狀分布Ⅲ型:弱雙折光,呈綠色的細纖維Ⅳ型:弱雙折光的基膜,呈淡黃色 公司自建有標準的細胞培養(yǎng)房,配備有生物安全柜、超凈工作臺、三氣細胞培養(yǎng)箱、二氧化碳細胞培養(yǎng)箱、熒光倒置顯微鏡、體視鏡、酶標儀、流式細胞儀等設備。病理實驗外包檢測 承接各類大醫(yī)學實驗!專業(yè)!可靠。
病理實驗外包,病理染色常見染色介紹甲苯胺藍染色:甲苯胺藍(Toloniumchloride),是一種化合物,分子式為C28H20N2O10S2·2Na,分子量為656.62,甲苯胺藍深綠色粉末,具古銅色光澤,易溶于水,呈藍紫色溶液。微溶于醇呈藍色,極微溶于氯仿,幾乎不溶于醚。商品大部分為氯化鋅復鹽。主要用于氧化還原指示劑。用于眼科檢查角膜缺陷和損傷部分,組織化學中用于測定脫氧核糖核酸和診斷白喉。甲苯胺藍是常用的人工合成染料的一種,屬于醌亞胺染料類,這類染料一般含有兩個發(fā)色團,一個是胺基,一個是醌型苯環(huán),來構成色原顯色。染料除有發(fā)色團外,還要有能使色原對組織及其他被染物產生親和力的原子團即助色。助色團能促使染料產生電離成鹽類,幫助發(fā)色團對組織產生染色力,使切片上的組織細胞著色。甲苯胺藍不僅含有兩個發(fā)色團,還含有兩個助色團,為堿性染料,甲苯胺藍中的陽離子有染色作用,組織細胞的酸性物質與其中的陽離子相結合而被染色。軟骨基質對甲苯胺藍的異染性,是因為軟骨基質的主要成分是軟骨黏蛋白、多糖物質,而酸性硫酸根與嗜堿性染料有親和力。病理實驗外包檢測,一站式生物病理實驗外包檢測平臺。河南病理實驗外包服務
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病理實驗外包,病理染色熒光原位雜交技術詳細介紹1、原理FISH(fluorescenceinsituhybridization)技術是一種重要的非放射性原位雜交技術。它的基本原理是:如果被檢測的染色體或DNA纖維切片上的靶DNA與所用的核酸探針是同源互補的,二者經變性-退火-復性,即可形成靶DNA與核酸探針的雜交體。將核酸探針的某一種核苷酸標記上報告分子如生物素、地高辛,可利用該報告分子與熒光素標記的特異親和素之間的**化學反應,經熒光檢測體系在鏡下對待測DNA進行定性、定量或相對定位分析。2、實驗流程FISH樣本的制備→探針的制備→探針標記→雜交→(染色體顯帶)→熒光顯微鏡檢測→結果分析。3、特點原位雜交的探針按標記分子類型分為放射性標記和非放射性標記。用同位素標記的放射性探針優(yōu)勢在于對制備樣品的要求不高,可以通過延長曝光時間加強信號強度,故較靈敏。缺點是探針不穩(wěn)定、自顯影時間長、放射線的散射使得空間分辨率不高、及同位素操作較繁瑣等。南京英瀚斯,專業(yè)的病理染色實驗服務平臺。河南病理實驗外包服務