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杭州JUE對(duì)定量數(shù)字PCR簡介

來源: 發(fā)布時(shí)間:2022年10月18日

研究方向基因表達(dá)差異研究檢測時(shí)完全不依賴傳統(tǒng)的Ct值即可實(shí)現(xiàn)真正意義上的***定量,從而提供了比實(shí)時(shí)熒光定量PCR更精確的基因差異表達(dá)研究,尤其對(duì)于那些靶基因表達(dá)差異微小的情況:microRNA、lncRNAs等的表達(dá)分析、等位基因的不平衡表達(dá)、單細(xì)胞基因表達(dá)分析、Exosome內(nèi)核酸分子定量分析等??截悢?shù)變異(CNV)研究微滴化的樣品處理及檢測,這種擺脫Ct值的計(jì)算方法而直接獲取目標(biāo)基因的***拷貝數(shù),為拷貝數(shù)變異的研究提供了***的檢測精度。是其他諸如二代測序、芯片雜交等平臺(tái)無法達(dá)到的,因此采用數(shù)字PCR能夠有效對(duì)NGS、aCGH的實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行驗(yàn)證,并具有成本低、通量高的特點(diǎn)。具備一鍵式自動(dòng)化操作。杭州JUE對(duì)定量數(shù)字PCR簡介

MicroDrop-100數(shù)字PCR系統(tǒng)具有如下優(yōu)點(diǎn):

1、JUE對(duì)定量,結(jié)果判讀不需要依賴標(biāo)準(zhǔn)曲線;

2、突破局限,檢測靈敏度可低至萬分之一;

3、專利設(shè)計(jì)的具有高精度復(fù)雜三維微納防污染結(jié)構(gòu)的微流控芯片,單張可同時(shí)處理1-8個(gè)樣本;

4、一鍵式自動(dòng)操作,20uL PCR體系可生成100,000微滴,8個(gè)樣本單次微滴生成*需2分鐘;

5、FAM、HEX(VIC)雙熒光通道,半導(dǎo)體激光器做為激發(fā)光源相比LED光源,穩(wěn)定性高,功率穩(wěn)定不影響檢測靈敏度,單色性能優(yōu)異降低對(duì)檢測特異性的影響,且方向性好;

6、檢測器為2個(gè)光電倍增管,靈敏度及增益優(yōu)于MPCC或CCD,普通的硅光子計(jì)數(shù)器,增益為10^5,光電倍增管增益可以達(dá)到10^9;

7、**知識(shí)產(chǎn)權(quán)的軟件系統(tǒng)可直接計(jì)算拷貝數(shù)、拷貝數(shù)濃度,CNV 值,突變豐度;閾值線可自動(dòng)或手動(dòng)完成,每個(gè)樣本可單獨(dú)設(shè)定閾值線;輸出數(shù)據(jù)圖標(biāo)、直方圖、一維圖、二維圖、濃度圖、95%置信度不確定性區(qū)間等;軟件可自動(dòng)識(shí)別復(fù)雜微滴分簇四簇;軟件具備數(shù)據(jù)質(zhì)控功能,支持陽性微滴數(shù)、陰性微滴數(shù)、總微滴數(shù)統(tǒng)計(jì)及這些指標(biāo)的任意組合;單個(gè)樣本100,000微滴的反應(yīng)體系以及高靈敏度的檢測系統(tǒng),配以獨(dú)特的軟件系統(tǒng),可以實(shí)現(xiàn)高達(dá)20重的PCR分析;

8、單次檢測通量96個(gè)樣本,操作靈活; 杭州JUE對(duì)定量數(shù)字PCR簡介不依賴Ct值,無需標(biāo)準(zhǔn)曲線。

數(shù)字PCR為juedui定量,qPCR為相對(duì)定量,數(shù)字PCR較qPCR更精細(xì)、更靈敏。所以說,未來數(shù)字PCR將成為qPCR的重要補(bǔ)充,在部分領(lǐng)域逐步替代熒光定量PCR。未來這些領(lǐng)域?qū)V泛應(yīng)用到數(shù)字PCR:科研:高校(生命科學(xué)學(xué)院、環(huán)境學(xué)院、醫(yī)學(xué)院、藥學(xué)院)等。醫(yī)院:病理科、血液科、婦產(chǎn)科、心血管科、檢驗(yàn)科、轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)中心:研究院單位、疾控中心、海關(guān)(出入境檢驗(yàn)檢疫)、質(zhì)監(jiān)局、環(huán)境/環(huán)保局等。企業(yè):第三方檢測機(jī)構(gòu)、IVD(分子體外診斷試劑)、生物制藥等。

數(shù)字PCR(DigitalPCR-dPCR)技術(shù)是一種新的核酸檢測和定量方法,與傳統(tǒng)定量PCR(qPCR)技術(shù)不同,數(shù)字PCR采用***定量的方式,不依賴于標(biāo)準(zhǔn)曲線和參照樣本,直接檢測目標(biāo)序列的拷貝數(shù)。由于這種檢測方式具有比傳統(tǒng)qPCR更加出色的靈敏度和特異性、精確性,dPCR迅速得到***的應(yīng)用,這項(xiàng)技術(shù)在極微量核酸樣本檢測、復(fù)雜背景下稀有突變檢測和表達(dá)量微小差異鑒定方面變現(xiàn)出的優(yōu)勢(shì)已被普遍認(rèn)可,而其在基因表達(dá)研究、microRNA研究、基因組拷貝數(shù)鑒定、**標(biāo)志物稀有突變檢測、致病微生物鑒定、轉(zhuǎn)基因成分鑒定、NGS測序文庫精確定量和結(jié)果驗(yàn)證等諸多方面具有的廣闊應(yīng)用前景已經(jīng)受到越來越多的關(guān)注。準(zhǔn)確度不完全依賴于擴(kuò)增效率。

定量PCR和數(shù)字PCR的特點(diǎn):1.在20多年的使用和發(fā)展中,定量PCR作為一種技術(shù)平臺(tái),已經(jīng)產(chǎn)出海量的數(shù)據(jù),在工業(yè)界和分子檢測的某些應(yīng)用上,定量PCR已經(jīng)成為“金標(biāo)準(zhǔn)”?;A(chǔ)研究方面,則形成了被稱為MIQE的“定量PCR標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)指南”。2.在定量PCR的各種應(yīng)用中,基因表達(dá)分析(geneexpressionanalysis)的應(yīng)用比重約占七成,綜合各種因素來看,眼下定量PCR還是進(jìn)行基因表達(dá)研究的理想手段。3.上述的“各種因素”具體展開,主要包括:通量、自動(dòng)化程度、各種檢測探針與染料、檢測通道、成本和可參考文獻(xiàn)與protocol的數(shù)目等等。4.就目前市場上已有的數(shù)字PCR設(shè)備來看,定量PCR在檢測的線性范圍上具有優(yōu)勢(shì),意味著同一個(gè)run內(nèi)可對(duì)各種表達(dá)豐度的樣品進(jìn)行分析。永諾生物MicroDrop-100微滴式數(shù)字PCR儀超越行業(yè)的10萬個(gè)微滴數(shù),保證泊松分布所需要的充分的樣本量。杭州JUE對(duì)定量數(shù)字PCR簡介

單張芯片一次可處理8個(gè)樣本。杭州JUE對(duì)定量數(shù)字PCR簡介

與常規(guī)PCR方法相比,數(shù)字PCR有如下優(yōu)勢(shì):1、能夠完全定量:常規(guī)PCR定量需要制定已知拷貝數(shù)的標(biāo)準(zhǔn)DNA曲線,但是由于待檢樣本與標(biāo)準(zhǔn)曲線不在統(tǒng)一體系,條件上會(huì)存在差異,另外加上PCR擴(kuò)增效率的差異從而影響定量結(jié)果的準(zhǔn)確性。而數(shù)字PCR不受標(biāo)準(zhǔn)曲線和擴(kuò)增動(dòng)力學(xué)影響,可進(jìn)行完全定量。2、樣本需求量低:適用于珍貴樣本或核酸降解嚴(yán)重的樣本3、靈敏度高:數(shù)字PCR是將傳統(tǒng)PCR反應(yīng)體系分割成數(shù)萬個(gè) PCR反應(yīng),這些反應(yīng)可以精確地檢測很小的目的片段差異、單拷貝甚至低濃度的混雜樣本。且能避免非同源異質(zhì)雙鏈的形成。4、高耐受性:由于目的序列被分配到多個(gè) 反應(yīng)體系中,明顯降低了背景信號(hào)和yìzhì物對(duì)反應(yīng)的干擾,擴(kuò)增基質(zhì)效應(yīng)大大減小。杭州JUE對(duì)定量數(shù)字PCR簡介

浚和(上海)儀器有限公司是一家供應(yīng)國內(nèi)外先進(jìn)儀器和設(shè)備的專業(yè)供應(yīng)商和服務(wù)商,致力于為客戶提供專業(yè)的定制化解決方案。多年來,持續(xù)為醫(yī)藥、化工、高校、科研單位、檢測院等多個(gè)行業(yè)提供先進(jìn)的產(chǎn)品和專業(yè)的服務(wù)。

浚和在不斷引進(jìn)國內(nèi)外先進(jìn)儀器設(shè)備的同時(shí),結(jié)合行業(yè)和市場需求,加強(qiáng)和客戶之間的溝通,并與國際上多家**儀器設(shè)備制造商保持著長期穩(wěn)定的合作關(guān)系,不定期地與合作商進(jìn)行技術(shù)交流,努力加強(qiáng)自身技術(shù)力量。公司配備了數(shù)名有著多年行業(yè)經(jīng)驗(yàn)的技術(shù)人員,依靠雄厚的技術(shù)實(shí)力、科學(xué)合理的配置方案、專業(yè)的安裝調(diào)試和周到的售后服務(wù),得到了廣大用戶的支持與信賴。

公司主要經(jīng)營產(chǎn)品包括:等離子清洗機(jī)、真空泵、噴霧干燥器、數(shù)字PCR、高壓滅菌鍋、培養(yǎng)箱、切片機(jī)、水分測定儀、激光粒度儀、光譜儀、溫濕度記錄儀等,目前主要合作品牌有:日本雅馬拓YAMATO、日本KASHIYAMA、日本HORIBA、廣州永諾 、日本KEM等。同時(shí),公司還提供專業(yè)的技術(shù)服務(wù),如設(shè)備的維護(hù)、驗(yàn)證等。

浚和儀器將始終以行業(yè)特點(diǎn)為立足點(diǎn),以客戶需求為導(dǎo)向,不斷地提高自身專業(yè)技術(shù)能力,不停地完善客戶服務(wù)質(zhì)量,在發(fā)展中保持創(chuàng)新的精神,力求與客戶共同進(jìn)步,為行業(yè)的發(fā)展作出不懈的努力。

擴(kuò)展資料

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