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JUE對定量數字PCR解決方案

來源: 發布時間:2022年11月07日

數字PCR采用的策略概括起來非常簡單,就是“分而治之”(divideandconquer)[1],這種做法非常類似于計算機科學中的“分治算法”,將一個標準PCR反應分配到大量微小的反應器中,在每個反應器中包含或不包含一個或多個拷貝的目標分子(DNA模板),實現“單分子模板PCR擴增”,擴增結束后,通過陽性反應器的數目“數出”目標序列的拷貝數。在實際的數字PCR實驗中,事實上是通過呈現兩種信號類型的反應器比例和數目進行統計學分析,計算出原始樣本中的模板拷貝數。檢測數量一次可達96個樣品。JUE對定量數字PCR解決方案

與常規PCR方法相比,數字PCR有如下優勢:1、能夠***定量:常規PCR定量需要制定已知拷貝數的標準DNA曲線,但是由于待檢樣本與標準曲線不在統一體系,條件上會存在差異,另外加上PCR擴增效率的差異從而影響定量結果的準確性。而數字PCR不受標準曲線和擴增動力學影響,可進行***定量。2、樣本需求量低:適用于珍貴樣本或核酸降解嚴重的樣本。3、靈敏度高:數字PCR是將傳統PCR反應體系分割成數萬個 PCR反應,這些反應可以精確地檢測很小的目的片段差異、單拷貝甚至低濃度的混雜樣本。且能避免非同源異質雙鏈的形成。4、高耐受性:由于目的序列被分配到多個 反應體系中,***降低了背景信號和***物對反應的干擾,擴增基質效應大大減小。JUE對定量數字PCR解決方案不依賴Ct值,無需標準曲線。

數字PCR也叫DigitalPCR(dPCR),是近幾年發展起來的一種核酸定量分析技術。相較于傳統熒光定量PCR來說,數字PCR對結果的判定不依賴于擴增曲線循環Ct值,不受擴增效率的影響,能夠直接讀出DNA的分子個數,能夠對起始樣本核酸分子***定量。數字PCR基本原理是將一個樣本分成幾十到幾萬份,然后再將其分配到不同的反應單元中,使每個微滴單元包含一個或多個拷貝的核酸分子(即DNA模板),每個單元都會對目標分子進行擴增,然后再對每個單元進行熒光信號的統計并計算。相對而言,傳統PCR或qPCR反應都是發生于同一體系當中,這也是數字PCR與其比較大的區別。   

數字PCR也叫DigitalPCR(dPCR),是近幾年發展起來的一種核酸定量分析技術。相較于傳統熒光定量PCR來說,數字PCR對結果的判定不依賴于擴增曲線循環Ct值,不受擴增效率的影響,能夠直接讀出DNA的分子個數,能夠對起始樣本核酸分子***定量。數字PCR基本原理是將一個樣本分成幾十到幾萬份,然后再將其分配到不同的反應單元中,使每個微滴單元包含一個或多個拷貝的核酸分子(即DNA模板),每個單元都會對目標分子進行擴增,然后再對每個單元進行熒光信號的統計并計算。相對而言,傳統PCR或qPCR反應都是發生于同一體系當中,這也是數字PCR與其比較大的區別。 無創產前篩查:低成本、快速。

數字PCR也叫DigitalPCR(dPCR),是近幾年發展起來的一種核酸定量分析技術。相較于傳統熒光定量PCR來說,數字PCR對結果的判定不依賴于擴增曲線循環Ct值,不受擴增效率的影響,能夠直接讀出DNA的分子個數,能夠對起始樣本核酸分子***定量。數字PCR基本原理是將一個樣本分成幾十到幾萬份,然后再將其分配到不同的反應單元中,使每個微滴單元包含一個或多個拷貝的核酸分子(即DNA模板),每個單元都會對目標分子進行擴增,然后再對每個單元進行熒光信號的統計并計算。相對而言,傳統PCR或qPCR反應都是發生于同一體系當中,這也是數字PCR與其比較大的區別。率先行業的10萬個微滴數,保證泊松分布所需要的充分的樣本量。JUE對定量數字PCR解決方案

超高靈敏度,適用于稀有序列及稀有突變的檢測。JUE對定量數字PCR解決方案

MicroDrop-100微滴式數字PCR是具有國內自主知識產權的第三代JUE對定量PCR系統,整套系統由MicroDrop-100A微滴生成儀、MicroDrop-100B微滴檢測儀以及結果數據分析設備等構成。系統通過自主設計的微流控芯片,利用油水相不兼容的原理,在2分鐘時間內將PCR體系分割成100,000油包水的體系,每個體系為 的PCR反應體系,體積約為0.2nL,單次實驗一次可生成8個樣本的油包水體系。由于油包水體系的分割效應,使得數字PCR受PCRYi制物的影響相對較小,有利于復雜環境樣本的實驗操作。區別于熒光定量PCR的過程性判讀方法,數字PCR結果判讀為終點法,故其對PCR擴增效率的依賴也相對較小。JUE對定量數字PCR解決方案

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