MicroDrop-100數字PCR系統具有如下優點:1、JUE對定量,結果判讀不需要依賴標準曲線;2、突破局限,檢測靈敏度可低至萬分之一;3、專利設計的具有高精度復雜三維微納防污染結構的微流控芯片,單張可同時處理1-8個樣本;4、一鍵式自動操作,20uLPCR體系可生成100,000微滴,8個樣本單次微滴生成 需2分鐘;5、FAM、HEX(VIC)雙熒光通道,半導體激光器做為激發光源相比LED光源,穩定性高,功率穩定不影響檢測靈敏度,單色性能優異降低對檢測特異性的影響,且方向性好;6、檢測器為2個光電倍增管,靈敏度及增益優于MPCC或CCD,普通的硅光子計數器,增益為10^5,光電倍增管增益可以達 到10^9;7、 知識產權的軟件系統可直接計算拷貝數、拷貝數濃度,CNV值,突變豐度;閾值線可自動或手動完成,每個樣本可單獨設定閾值線;輸出數據圖標、直方圖、一維圖、二維圖、濃度圖、95%置信度不確定性區間等;軟件可自動識別復雜微滴分簇四簇;軟件具備數據質控功能,支持陽性微滴數、陰性微滴數、總微滴數統計及這些指標的任意組合;單個樣本100,000微滴的反應體系以及高靈敏度的檢測系統,配以獨特的軟件系統,可以實現高達20重的PCR分析;8、單次檢測通量96個樣本,操作靈活;高靈敏度——數字PCR的靈敏度與同體積反應體系的分割份數成正比。上海JUE對定量數字PCR
微滴式數字PCR系統在傳統的PCR擴增前對樣品進行微滴化處理,即將含有核酸分子的反應體系分成成千上萬個納升級的微滴,其中每個微滴或不含待檢核酸靶分子,或者含有一個至數個待檢核酸靶分子。經PCR擴增后,逐個對每個微滴進行檢測,有熒光信號的微滴判讀為1,沒有熒光信號的微滴判讀為0,根據泊松分布原理及陽性微滴的個數與比例即可得出靶分子的起始拷貝數或濃度。與傳統PCR相比所具有的優勢不依賴Ct值或內參基因,即可確定低至單拷貝的待檢靶分子的***數目。微滴技術讓數字PCR更低成本,且更實用。上海JUE對定量數字PCRMiniDrop?研發團隊由微流控、光學、機電學、化學、臨床醫學、分子生物學等多學科交叉領域的**組成。
數字PCR(dPCR)是近年來引起重視并迅速發展起來的一種突破性的核酸定量分析技術。該技術先將核酸模板進行稀釋,分配到大量 的反應單元中,使每個反應單元中只有單個模板分子,然后進行PCR擴增反應,擴增結束后對每個反應室的熒光信號進行統計學分析,來定量DNA拷貝數。數字PCR采用先擴增后定量,因此不依賴擴增曲線的循環閾值(Ct),也無需采用內參基因和標準曲線,準確度高、重現性好,可以實現***定量分析。由于其獨特的技術優勢,已經在臨床診斷、轉基因成分定量、單細胞基因表達分析、環境微生物檢測和下一代測序等研究領域顯示出巨大的優勢和應用前景。
MicroDrop-100微滴式數字PCR應用范圍如下:a.動植物檢驗檢疫,動物源性分析、極微量病原菌檢測定量分析、轉基因產品檢測;b.降低篩查成本、縮短檢測周期,適用于T13\T18\T21三體綜合征等遺傳病的風險評估;適用于zhong瘤早期篩查、分子分型、靶向用藥和療效監測等;適用于傳染性疾病的早期診斷和診療指導;c.可用于DNA甲基化的檢測、CRISPR-Cas9基因編輯效率檢測等。d.基因表達差異監測單細胞研究:測序、PCRe.無創產前篩查:低成本、快速、傳染性疾病:HBV、HIV、COVID-19定量準確度不完全依賴于擴增效率。
研究方向基因表達差異研究檢測時完全不依賴傳統的Ct值即可實現真正意義上的***定量,從而提供了比實時熒光定量PCR更精確的基因差異表達研究,尤其對于那些靶基因表達差異微小的情況:microRNA、lncRNAs等的表達分析、等位基因的不平衡表達、單細胞基因表達分析、Exosome內核酸分子定量分析等。拷貝數變異(CNV)研究微滴化的樣品處理及檢測,這種擺脫Ct值的計算方法而直接獲取目標基因的***拷貝數,為拷貝數變異的研究提供了***的檢測精度。是其他諸如二代測序、芯片雜交等平臺無法達到的,因此采用數字PCR能夠有效對NGS、aCGH的實驗結果進行驗證,并具有成本低、通量高的特點。支持多重數字PCR,可選全中文分析軟件。上海JUE對定量數字PCR
可使用第三方PCR反應液,配備PCR A300(溫度范圍4°C-98°C,擴增模塊溫控精度±0.2°C)。上海JUE對定量數字PCR
研究方向甲基化含量鑒定作為表觀遺傳學研究中重要的一個研究方向——甲基化程度分析,現階段有不同的方法或技術來進行研究:如傳統的亞硫酸氫鹽處理后的克隆測序統計法、抗體檢測法、定量PCR檢測法等。這些方法皆因方法學的問題而不能獲得精確的定量,而微滴式 數字PCR系統通過對樣品的微滴化處理及目標因子的***拷貝數定量,為甲基化程度的精確定量檢測提供了一種全新的技術。*****的伴隨診斷常用體液來源(如血液,胸腹水,唾液及尿液等)的待檢標本中的DNA,有正常脫落體細胞和病變脫落細胞兩種來源,前者的量遠大于后者。通過微液滴處理能在每個微液滴中有效減少正常體細胞DNA的干擾,實現**標記物的有效檢測,如EGFR,ALK,ROS1,KRAS、BRAF等基因的突變檢測、乳腺*/胃*的HER2基因擴增檢測等,應用于**精細醫學的伴隨診斷。上海JUE對定量數字PCR
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