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蘇州數(shù)字PCR簡(jiǎn)介

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2022年12月19日

數(shù)字PCR是一種核酸分子 定量技術(shù)。當(dāng)前核酸分子的定量有三種方法,光度法基于核酸分子的吸光度來(lái)定量;,Ct值就是指可以檢測(cè)到熒光值對(duì)應(yīng)的循環(huán)數(shù);數(shù)字PCR是***的定量技術(shù),基于單分子PCR方法來(lái)進(jìn)行計(jì)數(shù)的核酸定量,是一種 定量的方法。主要采用當(dāng)前分析化學(xué)熱門(mén)研究領(lǐng)域的微流控或微滴化方法,將大量稀釋后的核酸溶液分散至芯片的微反應(yīng)器或微滴中,每個(gè)反應(yīng)器的核酸模板數(shù)少于或者等于1個(gè)。這樣經(jīng)過(guò)PCR循環(huán)之后,有一個(gè)核酸分子模板的反應(yīng)器就會(huì)給出熒光信號(hào),沒(méi)有模板的反應(yīng)器就沒(méi)有熒光信號(hào)。根據(jù)相對(duì)比例和反應(yīng)器的體積,就可以推算出原始溶液的核酸濃度。動(dòng)物源性的檢測(cè)分析。蘇州數(shù)字PCR簡(jiǎn)介

MiniDrop數(shù)字PCR儀由Creator微滴生成儀、Detector微滴檢測(cè)儀、MDMicrochip微流控芯片及MDPlotter數(shù)據(jù)分析軟件組成,該系統(tǒng)的**為微流控微滴生成技術(shù),采用原創(chuàng)性的油液,在40um微管道中利用氣壓驅(qū)動(dòng)在2分鐘內(nèi)生成50萬(wàn)微滴,單次運(yùn)行生成400萬(wàn)微滴,微滴體積達(dá)皮升級(jí),檢測(cè)線性范圍達(dá)到5個(gè)數(shù)量級(jí),各項(xiàng)指標(biāo)均超越國(guó)內(nèi)外的主流產(chǎn)品。MiniDrop創(chuàng)新性采用高壓驅(qū)動(dòng)的方法將樣本分割成50萬(wàn)份,打破了國(guó)外廠商在微滴式數(shù)字PCR領(lǐng)域的壟斷。蘇州數(shù)字PCR簡(jiǎn)介具備一鍵式自動(dòng)化操作。

數(shù)字PCR為juedui定量,qPCR為相對(duì)定量,數(shù)字PCR較qPCR更精細(xì)、更靈敏。所以說(shuō),未來(lái)數(shù)字PCR將成為qPCR的重要補(bǔ)充,在部分領(lǐng)域逐步替代熒光定量PCR。未 來(lái)這些領(lǐng)域?qū)V泛應(yīng)用到數(shù)字PCR:科研:高校(生命科學(xué)學(xué)院、環(huán)境學(xué)院、醫(yī)學(xué)院、藥學(xué)院)等。醫(yī)院:病理科、血液科、婦產(chǎn)科、心血管科、檢驗(yàn)科、轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)中心:研究院?jiǎn)挝弧⒓部刂行摹⒑jP(guān)(出入境檢驗(yàn)檢疫)、質(zhì)監(jiān)局、環(huán)境/環(huán)保局等。企業(yè):第三方檢測(cè)機(jī)構(gòu)、IVD(分子體外診斷試劑)、生物制藥等。

研究方向甲基化含量鑒定作為表觀遺傳學(xué)研究中重要的一個(gè)研究方向——甲基化程度分析,現(xiàn)階段有不同的方法或技術(shù)來(lái)進(jìn)行研究:如傳統(tǒng)的亞硫酸氫鹽處理后的克隆測(cè)序統(tǒng)計(jì)法、抗體檢測(cè)法、定量PCR檢測(cè)法等。這些方法皆因方法學(xué)的問(wèn)題而不能獲得精確的定量,而微滴式 數(shù)字PCR系統(tǒng)通過(guò)對(duì)樣品的微滴化處理及目標(biāo)因子的***拷貝數(shù)定量,為甲基化程度的精確定量檢測(cè)提供了一種全新的技術(shù)。*****的伴隨診斷常用體液來(lái)源(如血液,胸腹水,唾液及尿液等)的待檢標(biāo)本中的DNA,有正常脫落體細(xì)胞和病變脫落細(xì)胞兩種來(lái)源,前者的量遠(yuǎn)大于后者。通過(guò)微液滴處理能在每個(gè)微液滴中有效減少正常體細(xì)胞DNA的干擾,實(shí)現(xiàn)**標(biāo)記物的有效檢測(cè),如EGFR,ALK,ROS1,KRAS、BRAF等基因的突變檢測(cè)、乳腺*/胃*的HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)等,應(yīng)用于**精細(xì)醫(yī)學(xué)的伴隨診斷。您了解數(shù)字PCR儀的優(yōu)勢(shì)嗎?

數(shù)字PCR(DigtalPCR)是一種核酸定量精密檢測(cè)的新興技術(shù)手段,于20世紀(jì)由Vogelstein等提出。它是將稀釋后的核酸模板分配到大量不同的反應(yīng)單元中,使每個(gè)反應(yīng)單元中有一個(gè)或沒(méi)有核酸。利用PCR擴(kuò)增的同時(shí),加入可檢測(cè)熒光。待擴(kuò)增結(jié)束時(shí),使用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采集每個(gè)反應(yīng)單元出現(xiàn)的熒光次數(shù),從而定量檢測(cè)樣本中的核酸濃度。基于分液方式的不同,數(shù)字PCR主要分為3種:微流體數(shù)字PCR(MicrofluidicdigitalPCR,mdPCR)、微滴數(shù)字PCR(DropletdigitalPCR,ddPCR)和芯片數(shù)字PCR(ChipdigitalPCR,cdPCR)。無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前篩查:低成本、快速。蘇州數(shù)字PCR簡(jiǎn)介

基因表達(dá)差異的監(jiān)測(cè)。蘇州數(shù)字PCR簡(jiǎn)介

無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前檢查鐮狀細(xì)胞貧血(sicklecellanemia)是HBB基因突變引起的常染色體顯性遺傳病,有嚴(yán)重的危害,可以導(dǎo)致高達(dá)5%的胎兒死亡率及4.62%的孕婦死亡率。而精細(xì)有效的無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前診斷是預(yù)防鐮狀細(xì)胞貧血患兒出生的有效方法。研究人員采用dPCR技術(shù)檢測(cè)孕婦胎兒游離DNA(cff-DNA)HBB基因突變。結(jié)果顯示,dPCR技術(shù)能夠確定87%的男性胎兒(n=45)和75%的女性胎兒(n=20)H BB基因的突變狀態(tài)。當(dāng)cff-DNA濃度大于7%時(shí),可以**的檢測(cè)出HBB基因突變[3],可以說(shuō)是相當(dāng)厲害了。蘇州數(shù)字PCR簡(jiǎn)介

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