數字PCR為juedui定量,qPCR為相對定量,數字PCR較qPCR更精細、更靈敏。所以說,未來數字PCR將成為qPCR的重要補充,在部分領域逐步替代熒光定量PCR。未 來這些領域將廣泛應用到數字PCR:科研:高校(生命科學學院、環境學院、醫學院、藥學院)等。醫院:病理科、血液科、婦產科、心血管科、檢驗科、轉化醫學中心:研究院單位、疾控中心、海關(出入境檢驗檢疫)、質監局、環境/環保局等。企業:第三方檢測機構、IVD(分子體外診斷試劑)、生物制藥等。20微升體系生成100,000微滴。寧波廣州永諾數字PCR現貨
在定量PCR時,我們常常糾結一個問題,究竟是相對定量還是***定量呢?如今,你無需糾結了,因為數字PCR(digitalPCR)來了。盡管這兩種技術有些類似,都是估計起始樣品中的核酸量,但它們有一個重要的區別。定量PCR是依靠標準曲線或參照基因來測定核酸量,而數字PCR則讓你能夠直接數出DNA分子的個數,是對起始樣品的***定量。因此特別適用于依靠Ct值不能很好分辨的應用領域:拷貝數變異、突變檢測、基因相對表達研究(如等位基因不平衡表達)、二代測序結果驗證、miRNA表達分析、單細胞基因表達分析等。寧波廣州永諾數字PCR現貨高靈敏度——數字PCR的靈敏度與同體積反應體系的分割份數成正比。
產品特點無需依賴傳統熒光定量PCR的標準曲線即可實現核酸的***定量。全封閉防污染設計,一鍵式自動化操作。采用主流可靠的解決方案,系統由微滴生成儀、微滴檢測儀、數據分析軟件組成,并可選配同品牌封膜儀、PCR儀等微滴生成采用油包水乳化微滴技術,在微管道中利用氣壓驅動,2mins生成高達10萬個皮升級的微滴,高效高產,支持多重數字PCR的開發。微滴生成芯片為高精度微流控芯片設計,三維微納防污染結構,一張芯片可同時處理8個樣本。微滴檢測使用雙通道熒光,支持EvaGreen染料法及探針法。檢測線性范圍達到6個數量級,基因突變檢測靈敏度高達0.01%。檢測通量高,可一次檢測高達96個樣本,支持靈活設定。全中文分析軟件,人性化界面設置,多種分析工具供用戶選擇。本系統為開放式平臺,可使用第三方PCR反應液,支持用戶自行開發試劑、產品。
數字PCR采用的策略概括起來非常簡單,就是“分而治之”(divideandconquer)[1],這種做法非常類似于計算機科學中的“分治算法”,將一個標準PCR反應分配到大量微小的反應器中,在每個反應器中包含或不包含一個或多個拷貝的目標分子(DNA模板),實現“單分子模板PCR擴增”,擴增結束后,通過陽性反應器的數目“數出”目標序列的拷貝數。在實際的數字PCR實驗中,事實上是通過呈現兩種信號類型的反應器比例和數目進行統計學分析,計算出原始樣本中的模板拷貝數。流式檢測,順序逐一檢測每個微滴,無熒光交叉干擾,微滴陰性陽性判讀準確。
研究方向無創產前篩查無創傷的產前診斷,如21號染色體為3倍體的唐氏綜合征、已知父母基因型的胎兒地貧檢測或已知父母基因型的其它核酸病檢測(孟德爾相關遺傳疾病)。目前標本來源主要為血液,而待檢測的胎兒DNA受到母體DNA的干擾,影響了檢測的準確性。而QX200檢測系統獨特的微滴化技術完全可以作為二代測序法的補充來進行的無創傷產前診斷,從而提高工作效率及節約成本。轉基因食品或成分的檢測目前在確定轉基因作物或成分的含量時采取定量PCR的標準曲線法,這種方法需要依賴于已知濃度的標準品(CertifiedReferenceMaterialsCalibrants,CRMCs)。ddPCR***定量的方式可以徹底解決這些標準物質的定標工作。全封閉體系,自動化流程操作。寧波廣州永諾數字PCR現貨
單張芯片一次可處理8個樣本。寧波廣州永諾數字PCR現貨
數字PCR(DigtalPCR)是一種核酸定量精密檢測的新興技術手段,源于于20世紀由Vogelstein等提出。它是將稀釋后的核酸模板分配到大量不同的反應單元中,使每個反應單元中有一個或沒有核酸。利用PCR擴增的同時,加入可檢測熒光。待擴增結束時,使用統計學方法采集每個反應單元出現的熒光次數,從而定量檢測樣本中的核酸濃度。基于分液方式的不同,數字PCR主要分為3種:微流體數字PCR、微滴數字PCR和芯片數字PCR,數字PCR儀器目前是市場測試校準高的。寧波廣州永諾數字PCR現貨
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