研究方向甲基化含量鑒定作為表觀遺傳學研究中重要的一個研究方向——甲基化程度分析，現階段有不同的方法或技術來進行研究：如傳統的亞硫酸氫鹽處理后的克隆測序統計法、抗體檢測法、定量PCR檢測法等。這些方法皆因方法學的問題而不能獲得精確的定量，而微滴式數字PCR系統通過對樣品的微滴化處理及目標因子的***拷貝數定量，為甲基化程度的精確定量檢測提供了一種全新 的技術。*****的伴隨診斷常用體液來源(如血液，胸腹水，唾液及尿液等)的待檢標本中的DNA，有正常脫落體細胞和病變脫落細胞兩種來源，前者的量遠大于后者。通過微液滴處理能在每個微液滴中有效減少正常體細胞DNA的干擾，實現**標記物的有效檢測，如EGFR，ALK，ROS1，KRAS、BRAF等基因的突變檢測、乳腺*/胃*的HER2基因擴增檢測等，應用于**精細醫學的伴隨診斷。關于病原菌的檢測鑒定。杭州MicroDrop-100數字PCR

相對于二代測序、基因芯片和定量PCR而言，數字PCR具備以下優勢:●靈敏度可達到單個核酸分子：檢測限低至0.001%，主要系為數字PCR可以實現靶標DNA/RNA的生物濃縮；●無需標準曲線活參照基因進行對比來測定核算量，可對靶分子起始量進行***定量，直接獨處DNA分子 的個數；●適合環境復雜樣品的檢測：終點PCR檢測，不依賴Ct值，不依賴擴增效率，能克服PCR 劑的影響，避免樣品間的交叉 問題，適合各類復雜環境中的樣本進行 定量，如動血樣、糞便、尿液、痰液、水樣、土壤、植物等；杭州MicroDrop-100數字PCR分辨率——低至0.1倍基因表達差異。

我國***擁有完全自主知識產權的微滴式數字PCR儀MiniDrop?研發成功并投入生產。這是國內***微滴式數字PCR檢測系統，能廣泛應用于醫療、農業、環境等領域，未來，采用外周血、唾液、尿液、腦脊液等樣本進行低成本、高靈敏、快速的無創檢測成為可能。MiniDrop?數字PCR儀由Creator微滴生成儀、Detector微滴檢測儀、MDMicrochip微流控芯片及MDPlotter數據分析軟件組成，該系統的**為微 流控微滴生成技術，采用原創性的油液，在40um微管道中利用氣壓驅動在2分鐘內生成50萬微滴，單次運行生成400萬微滴，微滴體積達皮升級，檢測線性范圍達到5個數量級，各項指標均超越國內外主流產品。

MicroDrop-100數字PCR系統具有如下優點：1、JUE對定量，結果判讀不需要依賴標準曲線；2、突破局限，檢測靈敏度可低至萬分之一；3、專利設計的具有高精度復雜三維微納防污染結構的微流控芯片，單張可同時處理1-8個樣本；4、一鍵式自動操作，20uLPCR體系可生成100,000微滴，8個樣本單次微滴生成 需2分鐘；5、FAM、HEX（VIC）雙熒光通道，半導體激光器做為激發光 源相比LED光源，穩定性高，功率穩定不影響檢測靈敏度，單色性能優異降低對檢測特異性的影響，且方向性好；6、檢測器為2個光電倍增管，靈敏度及增益優于MPCC或CCD,普通的硅光子計數器，增益為10^5，光電倍增管增益可以達到10^9；7、 知識產權的軟件系統可直接計算拷貝數、拷貝數濃度，CNV值，突變豐度；閾值線可自動或手動完成，每個樣本可單獨設定閾值線；輸出數據圖標、直方圖、一維圖、二維圖、濃度圖、95%置信度不確定性區間等；軟件可自動識別復雜微滴分簇四簇；軟件具備數據質控功能，支持陽性微滴數、陰性微滴數、總微滴數統計及這些指標的任意組合；單個樣本100,000微滴的反應體系以及高靈敏度的檢測系統，配以獨特的軟件系統，可以實現高達20重的PCR分析；8、單次檢測通量96個樣本，操作靈活；MicroDrop?數字PCR是擁有完全自主知識產權的微滴式數字PCR儀。

無創產前檢查鐮狀細胞貧血（sicklecellanemia）是HBB基因突變引起的常染色體顯性遺傳病，有嚴重的危害，可以導致高達5%的胎兒死亡率及4.62%的孕婦死亡率 。而精細有效的無創產前診斷是預防鐮狀細胞貧血患兒出生的有效方法。研究人員采用dPCR技術檢測孕婦胎兒游離DNA（cff-DNA）HBB基因突變。結果顯示，dPCR技術能夠確定87%的男性胎兒（n=45）和75%的女性胎兒（n=20）HBB基因的突變狀態。當cff-DNA濃度大于7%時，可以**的檢測出HBB基因突變[3]，可以說是相當厲害了。20微升體系生成100,000微滴。杭州MicroDrop-100數字PCR

準確度不完全依賴于擴增效率。杭州MicroDrop-100數字PCR

數字PCR（DigtalPCR）是一種核酸定量精密檢測的新興技術手段，于20世紀由Vogelstein等提出。它是將稀釋后的核酸模板分配到大量不同的反應單元中，使每個反應單元中有一個或沒有核酸。利用PCR擴增的同時，加入可檢測熒光。待擴增結束時，使用統計學方法采集每個反應單元出現的熒光次數，從而定量檢測樣本中的核酸濃度。基于分液方式的不同，數字PCR主要分為3種：微流體數字PCR(MicrofluidicdigitalPCR，mdPCR)、微滴數字PCR(DropletdigitalPCR，ddPCR)和芯片數字PCR(ChipdigitalPCR，cdPCR)。杭州MicroDrop-100數字PCR

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