數字PCR采用的策略概括起來非常簡單,就是“分而治之”(divideandconquer)[1],這種做法非常類似于計算機科學中的“分治算法”,將一個標準PCR反應分配到大量微小的反應器中,在每個反應器中包含或不包含一個或多個拷貝的目標分子(DNA模板),實現“單分子模板PCR擴增”,擴增結束后,通過陽性反應器的數目“數出”目標序列的拷貝數。在實際的數字PCR實驗中,事實上是通過呈現兩種信號類型的反應器比例和數目進行統計學分析,計算出原始樣本中的模板拷貝數。全封閉防污染設計,一鍵式自動化操作。青海便攜式數字PCR電話
MicroDrop-100微滴式數字PCR是具有國內自主知識產權的第三代JUE對定量PCR系統,整套系統由MicroDrop-100A微滴生成儀、MicroDrop-100B微滴檢測儀以及結果數據分析設備等構成。系統通過自主設計的微流控芯片,利用油水相不兼容的原理,在2分鐘時間內將PCR體系分割成100,000油包水的體系,每個體系為 的PCR反應體系,體積約為0.2nL,單次實驗一次可生成8個樣本的油包水體系。由于油包水體系的分割效應,使得數字PCR受PCRYi制物的影響相對較小,有利于復雜環境樣本的實驗操作。區別于熒光定量PCR的過程性判讀方法,數字PCR結果判讀為終點法,故其對PCR擴增效率的依賴也相對較小。青海便攜式數字PCR電話基因表達差異的監測。
數字PCR的應用檢驗檢疫食品安全?轉基因食品檢測(國標)?病原菌鑒定?動物源性檢測分析科研?基因表達差異監測?CRISPR-Cas9基因編輯結果驗證?甲基化含量鑒定?單細胞研究:測序、PCR臨床?**液體活檢:早篩、用藥、監測、復發?無創產前篩查:低成本、快速?***性疾病:HBV、HIV定量據悉,MiniDrop?**團隊由微流控、光學、機電學、化學、臨床醫學、分子生物學等多學科交叉領域的**組成,依托精密儀器研發、生物納米材料與分子生物學等平臺,以微滴式數字PCR儀為**,打造了全自動液體處理工作站、核酸提取試劑盒等創新產品,致力于解決**、***領域的精細診斷。
數字PCR也叫DigitalPCR(dPCR),是近幾年發展起來的一種核酸定量分析技術。相較于傳統熒光定量PCR來說,數字PCR對結果的判定不依賴于擴增曲線循環Ct值,不受擴增效率的影響,能夠直接讀出DNA的分子個數,能夠對起始樣本核酸分子***定量。數字PCR基本原理是將一個樣本分成幾十到幾萬份,然后再將其分配到不同的反應單元中,使每個微滴單元包含一個或多個拷貝的核酸分子(即DNA模板),每個單元都會對目標分子進行擴增,然后再對每個單元進行熒光信號的統計并計算。相對而言,傳統PCR或qPCR反應都是發生于同一體系當中,這也是數字PCR與其比較大的區別。采用主流可靠的解決方案,由微滴生成儀、微滴檢測儀、數據分析軟件組成。
目前數字PCR技術在臨床領域已經有著非常***且***地應用,例如在病原微生物檢測中的應用:HBV檢測、HIV檢測、甲型流感病毒檢測等;在產前診斷中的應用:13/18/21號染色體三倍體檢測、遺傳性耳聾檢測、地中海貧血檢測及優生五項的病毒檢測等;在**靶向***相關基因檢測中的應用:肺*EGFR基因突變、ALK基因融合檢測、結直腸*KRAS、BRAF基因突變檢測、乳腺*HER2基因 擴增檢測、神經膠質瘤IDH基因突變檢測等。以**靶向***相關基因檢測為例,在**形成的超早期,會出現**細胞的壞死和凋亡,這些凋亡或壞死的**細胞會釋放其DNA進入外周血,因此通過分析循環血液中是否含有**特異的游離DNA就可以達到**早期篩查的目的。然而此時DNA含量極低,對檢測的靈敏度和精確性要求極高,目前只有數字PCR技術可以檢測出來。另外進行個體化***時,需要對基因組樣本進行分析,此時利用數字PCR技術也能**提高結果的可信性,進而建立合理***方案。樣本多樣性,樣本通量可達96個樣本,支持靈活設定。青海便攜式數字PCR電話
MicroDrop?數字PCR可廣泛應用于科研、醫療、出入境檢驗檢疫等領域。青海便攜式數字PCR電話
MicroDrop-100系統產品特點:一、適應性廣,靈活性高1、理論上可覆蓋qPCR(熒光定量PCR)的所有應用2、樣本多樣性,樣本通量可達96個樣本,支持靈活設定3、開放式平臺,支持用戶自行開發試劑、產品。二、靈敏度高,準確性高1、***定量——無需依賴標準曲線2、采用微滴式技術高達100,000個的微滴3、線性范圍達到6個數量級,靈敏度高達萬分之一三、可分析復雜混合物1、準確度不完全依賴于擴增效率2、雙通道熒光檢測,支持EvaGreen染料及探針法3、支持多重數字PCR四、操作簡單,使用方便1、全封閉防污染設計,一鍵式自動化操作。2、可選全中文分析軟件青海便攜式數字PCR電話
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