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來源: 發布時間:2023年11月08日

糖原及粘液染色法:操作方法:(1)石蠟切片脫蠟至水。(2)0.5%過碘酸水溶液5分鐘。或1%過碘酸95%酒精溶液(過碘酸再結晶應重新配制使用)。(3)蒸餾水洗,70%酒精洗。(4)Schiff氏液15-30分鐘。(Schiff氏液從冰箱取出升至室溫使用)(5)流水沖洗10分鐘。(6)蘇木素浸染細胞核2-3分鐘。(7)脫水、透明、封蓋。結果:糖原呈紅色,細胞核呈藍色。試劑配制:(1)0.5%過碘酸(HIO4)水溶液或70%酒精溶液。(2)Schiff氏試劑。堿性品紅1g蒸餾水200ml1N鹽酸(98.3ml比重1.16鹽酸,加入蒸餾水成1000ml)20ml偏重亞硫酸鈉或鉀1g堿性品紅1g加入200ml蒸餾水,攪拌加熱沸騰,待冷卻至50℃過濾,加入當量鹽酸至25℃時加入偏重亞硫酸鈉。置于暗處,兩天后溶液變桔黃色或草黃色,然后加入少量活性碳并震蕩、過濾,此時溶液應為無色。保存冰箱備用。溶液如顯淺紅色或草黃色,染色效果較差在肝糖原染色中用10%甲醛液固定肝組織。北京正規糖原染色試劑盒哪家便宜

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糖類染色:糖類從組織化學技術角度來分,可分為多糖、中性粘液物質、酸性粘液物質、粘蛋白及粘脂質。多糖主要指糖原,它是一種膠樣液態存在于肝細胞、骨骼肌、心肌等處。因糖原在肝臟及心肌疾患及某些的病變中分布和量都有一定改變,故糖原的染色在臨床病理診斷上具有重要意義。(1)肝及心肌糖原沉著癥的診斷:糖原染色顯示在肝或心肌細胞內有大量糖原存在即可確診。(2)糖尿病性腎小球硬化癥或血管病的診斷。(3)高雪氏病與尼曼——匹克氏病的鑒別:前者為陽性、后者為陰性,做此染色較易鑒別。(4)骨內骨外尤文氏肉瘤的診斷:此瘤80%細胞內有較多糖原,糖原染色為陽性,所以糖原染色為陽性(大多數細胞)可以協助診斷。(5)腺泡狀軟組織肉瘤與化感瘤:前者棒狀小體糖原染色為陽性。北京正規糖原染色試劑盒哪家便宜糖原染色顯示在肝或心肌細胞內有大量糖原存在即可確診。

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糖原染色:1、概況PAS染色法(PeriodicAcid-Schiffstain)在組織學上,主要用來檢測組織中的糖類。過碘酸把糖類相鄰兩個碳上的羥基氧化成醛基,再用Schiff試劑和醛基反應使呈現紫紅色。2、原理PAS染色又稱過碘酸雪夫染色,糖原染色。一般用來顯示糖元和其它多糖物質。過碘酸能使細胞內的多糖乙二醇基氧化成二醛,再與Schiff氏液的無色品紅結合,紅色,定位于胞漿上。3、應用隨著醫學實驗技術的發展,糖原染色應用的范圍更加普遍,如用以證明與鑒別細胞內空泡狀的性質,心肌病變及其他心血管疾病的診斷,糖原累積病診斷和研究,糖尿病的診斷和研究,用于某些的診斷等~

特殊染色方法選擇應遵循:染色結果對比鮮明、結果易保存、陽性突出的染色方法;突出的陽性結果在于所選擇方法表達的色調及如何進行背景的復染。結果能夠長時間保存、不褪色對于后續的調閱、科研、論文均較為有利。如顯示淀粉樣物質,甲基紫染色法雖然流程較為簡單,但結果不易保存,陽性對比度相對不突出;剛果紅染色法陽性結果明顯,長時間保存不褪色,流程簡便,更是實用的方法。如顯示彈性纖維,地衣紅染色染液雖配制較方便,但結果對比度相對欠佳,與其他幾個染色法相比,多不選擇使用。在滴加染液時,務必使染液完全覆蓋組織,但不能溢出圈外,避免浪費試劑。

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染色的一般原則:因檢測細胞的類型、凋亡誘導劑種類、使用的檢測儀器不同,因而流式檢測的熒光補償也不同,因此建議每次檢測均需使用凋亡誘導處理的細胞做單陽對照,進行熒光補償的調節。標記抗體常用熒光素FITC,EGFP激發光:488nm發射光:525nm;使用面較廣,價格便宜。PE激發光488nm發射光575nm,此熒光的激發效率較佳,故此熒光得到的信號較強;檢測某些弱表達的抗原,推薦使用此熒光素。價格較FITC昂貴。APC激發光633nm,發射光660nm,在配有雙激光的流式細胞儀上,此熒光染料可與7-AAD或PI共同使用來避開自帶綠色熒光的樣本。流式細胞儀相關試劑盒。應該盡可能割取生活著的組織塊,并隨即投入固定液。北京正規糖原染色試劑盒哪家便宜

利用化學試劑與細胞內的某些物質進行化學反應。北京正規糖原染色試劑盒哪家便宜

注意事項:染色時:①染色時必須嚴格按照染色操作說明書進行染色。②在染色過程中,前一個染液浸染完成后,在進行下一個染液的步驟之前,必須徹底充分水洗,使前一個染液沖洗干凈后再進行下一步驟。③每次滴加染液前,務必吸干組織上多余的水分,避免多余的水把染液稀釋了,造成染色不佳。④在滴加染液時,務必使染液完全覆蓋組織,但不能溢出圈外,避免浪費試劑。在染色時,用有色鉛筆在組織周圍劃一個圈,這樣在滴加染液時就不會使染液溢出北京正規糖原染色試劑盒哪家便宜

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