染色試劑盒:GUS基因就是β-葡萄糖苷酸酶基因(β-glucuronidase),是從大腸桿菌K-12菌株分離出的一種酸性水解酶。該基因產物為β-葡萄糖苷酸酶,屬水解酶類,相當穩定而不易降解,以β-葡萄糖苷酸酯類物質為底物,其反應產物可用多種方法檢測出來。由于絕大多數植物沒有檢測到葡萄糖苷酸酶的背景活性,因此這個基因被普遍應用于基因調控的研究中。根據GUS基因檢測所用的底物不同,可以選擇三種檢測方法:組織化學法、分光光度法和熒光法(靈感度為分光光度檢測法較高)。其中較為常用的是組織化學法。本試劑盒適用于骨髓細胞涂片,血液細胞涂片。上??诒玫奶窃旧噭┖袌髢r
糖原染色:細胞內含1,2-乙二醇基的多糖類經過碘酸氧化后產生醛基,與特殊染液作用,使無色品紅變成紅色化合物,沉淀于胞質之中。紅色的深淺與細胞中起反應的1,2-乙二醇基的量呈正比。用于不典型巨核細胞與李—斯細胞的鑒別,前者PAS反應為強陽性,后者為陰性或弱陽性;用于高雪細胞和尼曼一匹克細胞的鑒別,前者PAS反應為強陽性,而后者反應為陰性或弱性。正常值正常情況下,紅細胞系統的原、幼紅細胞和成熟紅細胞;粒細胞系統的原粒細胞、原單核細胞和大多數淋巴細胞為陰性反應。自早幼粒階段以后的粒細胞和幼單核細胞可呈弱陽性反應。上??诒玫奶窃旧噭┖袌髢r在染色過程中較好不要在玻片上貼標簽紙。
特殊染色方法選擇應遵循:1、特異性高、傳統或經典的染色方法;特異、傳統/經典的一些染色法在特殊染色方法的選擇中往往作為選擇。如顯示淀粉樣物質。剛果紅染色作為經典的方法,比天狼星紅、甲基紫等其他方法都要實用。淀粉樣物質(剛果紅及天狼星紅染色)。2、染色流程相對簡便、染液易配制的染色方法;選擇染色流程簡便的方法,無論對于量較多的整批次染色,還是較少量的染色均能夠節省時間、更為便捷。選擇染液易配制的方法,對自配染液(尤其是保存較短的染液)是較為重要的選擇,不容易造成因染液配制問題而影響染色結果。如顯示彈性纖維。醛品紅染色法無論是從染色流程,還是染液配制都要比鐵蘇木精、間苯二酚堿性品紅等染色方法要簡單方便、省時,同時陽性著染對比度也很明顯。
糖原染色(PAS):(1)原理:過碘酸將血細胞內的糖原氧化,生成醛基。醛基與雪夫液中的無色品紅結合,形成紫色化合物,定位于細胞質中。(2)操作方法:干燥涂片,滴加甲醛固定液固定10分鐘,流水沖洗,晾干。滴加過碘酸溶液作用20分鐘,流水沖洗,晾干。滴加雪夫液作用60分鐘,流水沖洗,晾干。滴加甲基綠溶液復染10分鐘,流水沖洗,晾干鏡檢。(4)臨床意義:根據染色陽性程度和陽性物形態鑒別主要用于急性淋巴細胞白血病和急性非淋巴細胞白血病鑒別,還有助于紅白血病與巨幼細胞貧血和溶血性貧血的鑒別診斷推薦用于骨和軟骨的染色。
糖原染色――檢查項目的注意細節:其判斷標準隨細胞不同而異,一般分為5級,即0~4級。糖原染色――檢查項目的一般步驟:(1)新鮮干燥血片或骨髓片于95%乙醇中固定10min,蒸餾水沖洗數次,待干。(2)浸入10g/L過碘酸水溶液中10min,蒸餾水沖洗數次,待完全干燥。(3)放入雪夫液30min,用自來水沖洗約5min,再用蒸餾水沖洗,然后用20g/L甲基綠復染20min,水洗,晾干。糖原染色――檢查項目結果解讀:(1)新鮮干燥血片或骨髓片于95%乙醇中固定10min,蒸餾水沖洗數次,待干。(2)浸入10g/L過碘酸水溶液中10min,蒸餾水沖洗數次,待完全干燥。(3)放入雪夫液30min,用自來水沖洗約5min,再用蒸餾水沖洗,然后用20g/L甲基綠復染20min,水洗,晾干。加入少量活性碳并震蕩、過濾,此時溶液應為無色。上??诒玫奶窃旧噭┖袌髢r
本試劑盒常用于常規組織切片染色,對于細胞、極其薄的切片。上海口碑好的糖原染色試劑盒報價
特染的應用價值:現代病理學中免疫組織化學技術、電子顯微鏡技術以及其它細胞及分子生物學技術應用日益普遍,但由于這些技術要求一定的實驗條件以及所需的試劑價格較為昂貴,對于一部分病人以及某一些基層醫院是比較難以接受的。而組織化學技術則具有無需復雜的實驗條件以及較為昂貴的試劑操作又比較簡單的優勢,在臨床病理學診斷中具有重要的應用價值。比如,當細胞中出現色素,是黑色素還是含鐵血黃素以及當組織中出現均一化學物質是否為淀粉樣變性等,用組織化學技術區別起來很簡單,所以組織化學技術,雖然已有幾十年到幾百年的歷史,仍是一個很有實用價值的技術~上??诒玫奶窃旧噭┖袌髢r