無血清細(xì)胞凍存液:解凍解凍后,應(yīng)該立即鋪板在預(yù)先包被好的培養(yǎng)皿中。上述凍存的一管細(xì)胞可以成功的鋪板到6孔板的1-2孔。1.開始之前,提前準(zhǔn)備好以下材料:試管,恢復(fù)至室溫的培養(yǎng)基,預(yù)先包被的培養(yǎng)板,確保整個解凍復(fù)蘇程序可以在較短的時(shí)間內(nèi)完成。注意:不要在37°C水浴中加熱培養(yǎng)基。2.在37°C水浴中快速解凍,持續(xù)溫和的在水中晃動凍存管,直到剩余少量細(xì)胞還處于凍存狀態(tài)。3.水浴中取出凍存管,用70%的酒精或異丙醇擦拭除菌。4.用2mL的血清移液管把細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到一個15mL的錐形試管。注意:用2mL的血清移液管代替1mL的頭可以減少細(xì)胞聚集體的分解。無血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品性能:為了避免反復(fù)凍融,傳統(tǒng)的細(xì)胞凍存液,分裝成小管后置于-20℃環(huán)境下保存。無血清細(xì)胞凍存液廠家直銷
凍存細(xì)胞復(fù)蘇方法:1.從冰箱里取出細(xì)胞冷凍保存管,立即放入37℃振動水浴槽中快速解凍。2.待凍存管中細(xì)胞混合液完全融化后,立即加入1ml細(xì)胞培養(yǎng)基于該冷凍管中與細(xì)胞混合,再將細(xì)胞混合液從凍存管中移入含有9ml該細(xì)胞培養(yǎng)基的試管中,混合均勻。3.離心收集培養(yǎng)細(xì)胞(參考離心條件:1,000~2,000rpm,4℃,3~5min),移去上清液。4.清洗細(xì)胞,充分洗凈殘留凍存液。5.加入適量的新鮮細(xì)胞培養(yǎng)基,使用移液管緩緩地均勻細(xì)胞混合液。適量地稀釋后,將細(xì)胞混合液移至事先準(zhǔn)備好的培養(yǎng)瓶中。6.鏡檢后,研究者可根據(jù)各自方法和需要來進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。無血清細(xì)胞凍存液廠家直銷無血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品特色:可微量,原位凍存,例如雜交瘤細(xì)胞的凍存,省時(shí)高效。
細(xì)胞凍存,我們應(yīng)該注意哪些事項(xiàng):凍存細(xì)胞的效果好壞要看細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)的存活率。細(xì)胞凍存時(shí),細(xì)胞內(nèi)部會產(chǎn)生晶體,水凝固形成的高濃度溶質(zhì)會對細(xì)胞產(chǎn)生損傷,所以在凍存過程中要盡可能降低晶體的產(chǎn)生。為了提高復(fù)蘇存活率,可通過以下方法完成:a)降溫的速度不能太快,讓細(xì)胞內(nèi)的水分緩慢離開細(xì)胞;b)在低溫環(huán)境下凍存細(xì)胞可以降低高濃度鹽對細(xì)胞中蛋白質(zhì)的影響;c)凍存試劑要采用親水的低溫保護(hù)劑;d)復(fù)蘇時(shí)的速度要快,這樣可以減少細(xì)胞內(nèi)部冰晶溶解時(shí)產(chǎn)生的某些可溶性成分。
細(xì)胞凍存概念:細(xì)胞凍存是細(xì)胞保存的主要方法之一。利用凍存技術(shù)將細(xì)胞置于-196℃液氮中低溫保存,可以使細(xì)胞暫時(shí)脫離生長狀態(tài)而將其細(xì)胞特性保存起來,這樣在需要的時(shí)候再復(fù)蘇細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。而且適度地保存一定量的細(xì)胞,可以防止因正在培養(yǎng)的細(xì)胞被污染或其他意外事件而使細(xì)胞丟種,起到了細(xì)胞保種的作用。細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的原則是:慢凍速融,這樣更加有利于保持細(xì)胞的活力。凍存細(xì)胞不加任何保護(hù)劑,會導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生,從而使細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機(jī)械損傷,引起細(xì)胞內(nèi)環(huán)境滲透壓,PH,電解質(zhì)等的改變,進(jìn)而促使細(xì)胞死亡。無血清凍存液注意事項(xiàng):請選擇對數(shù)生長期細(xì)胞進(jìn)行凍存。
無血清快速細(xì)胞凍存液凍存液成分。無血清細(xì)胞,無血清干細(xì)胞及MSC凍存液。保存條件:儲存于4℃以下。質(zhì)量保障期從產(chǎn)品的生產(chǎn)日期起,為期3年。3個月以上沒有使用凍存液計(jì)劃時(shí),盡可能冷凍保存。為避免重復(fù)凍融過程可能導(dǎo)致的凍存液品質(zhì)下降和性能降低,推薦將100ml產(chǎn)品分裝小瓶后,再存放于4℃以下或-20℃冰箱凍存。無血清細(xì)胞凍存液,細(xì)胞凍存與復(fù)蘇后,平均活細(xì)胞回收比例超過80%。與含血清凍存液比較,BI無血清凍存液細(xì)胞存活率都有較佳的表,BI無血清細(xì)胞凍存液也適用于動物血清培養(yǎng)的細(xì)胞凍存。無血清細(xì)胞凍存液存儲條件:推薦將產(chǎn)品分裝成小管后,再存放于4℃以下或-20℃冰箱凍存。無血清細(xì)胞凍存液廠家直銷
根據(jù)凍存方式不同可以分為慢速凍存(程序降溫法)與快速凍存(非程序降溫法)。無血清細(xì)胞凍存液廠家直銷
細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的原則:慢凍速融,這樣更加有利于保持細(xì)胞的活力。凍存細(xì)胞不加任何保護(hù)劑,會導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生,從而使細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機(jī)械損傷,引起細(xì)胞內(nèi)環(huán)境滲透壓,PH,電解質(zhì)等的改變,進(jìn)而促使細(xì)胞死亡。細(xì)胞凍存液除去蛋白酶,添加適量配置好的凍存細(xì)胞培養(yǎng)液.細(xì)胞培養(yǎng)的傳代及日常維持過程中,在培養(yǎng)器具、培養(yǎng)液及各種準(zhǔn)備工作方面都需大量的耗費(fèi),而且細(xì)胞一旦開始原代培養(yǎng),它的各種生物特性都將逐漸發(fā)生變化并隨著傳代次數(shù)的增加和體外環(huán)境條件的變化而不斷有新的變化。無血清細(xì)胞凍存液廠家直銷