糖原染色在使用過程中需要注意以下幾個方面:盡可能選取小塊新鮮組織及時固定。糖原易溶于水,在酶的作用下很容易分解葡萄糖,更易溶于水,固定之前決不能用水或生理鹽水等浸洗。應避免用水溶性固定液,宜采用酒精性固定液,如Carnoy液,能較好地保存糖原,但有使糖原流動到細胞一側的現象,多數人認為是由于固定劑把細胞內的糖原推向固定劑對組織浸透的方向而造成。其他組織應用中性福爾馬林固定為佳。組織在4℃左右溫度內固定與保存,是針對糖的性質和避免糖原溶于水而采取的相應措施。乙醇能沉淀白蛋白、球蛋白,亦能**白和糖原沉淀,但仍可溶于水,因此較好不單獨使用乙醇固定,以乙醇為溶劑的混合固定液固定為佳應該盡可能割取生活著的組織塊,并隨即投入固定液。安徽品牌糖原染色試劑盒廠家供應
糖原染色在使用過程中需要注意以下幾個方面:PAS染色時需于暗處加蓋反應,染色時間10~20min(染色時間長短取決于試劑的質量和環境溫度,SO濃度高,染色時間適當縮短;環境溫度高,染色時間也應適當縮短,反之則需適當延長反應時間)。染色過程中不能接觸伊紅,以免造成顏色誤差[4]。作糖原染色時,較好作消化對照,即取兩張連續切片,其中一張脫蠟至水后,用1%淀粉酶于37℃消化30min,水洗后與不經消化處理的切片一起置0.5%高碘酸液氧化,如經消化處理的切片染色陰性,不經消化處理的切片染色陽性,即肯定為糖原[6]。偏重亞硫酸鈉(鉀)溶液配置后,不能保存,因此,必須現配現用,用過一次即應廢棄。各種試劑必須是化學純或者分析純。器皿、染色缸必須潔凈而干燥。安徽品牌糖原染色試劑盒廠家供應糖原染色顯示在肝或心肌細胞內有大量糖原存在即可確診。
糖原染色(過碘酸-雪夫反應)原理多糖中乙二醇基經過碘酸氧化成二醛基與無色品紅結合,形成紫紅色化合物。沉積于含糖原的胞漿中。結果:胞漿中出現彌散狀,顆粒狀,塊狀紅色為陽性。無紅色顆粒為陰性_x005f_x000c_臨床意義1、正常血細胞的染色反應粒系:原粒細胞糖原含量很低,隨著細胞的分化成熟,糖原含量逐增加,至成熟階段糖原含量十分豐富。淋巴細胞:糖原常凝聚成顆粒或塊狀。巨核細胞-血小板系統:PAS反應呈粗大的紫色顆粒或團塊。正常紅系:陰性。對疾病診斷的意義白血病類型的鑒別:急性粒細胞白血病:原始粒細胞呈陰性或弱陽性反應,以彌散性為主;急性淋巴細胞白血病原、幼淋巴細胞多呈粗顆粒、塊狀陽性反應~
可以通過pas染色計算糖原含量嗎:PAS染色又稱過碘酸雪夫染色,糖原染色.一般用來顯示糖元和其它多糖物質.具體現象例舉:陽性反應,胞漿呈紅色,陰性反應,胞漿呈無色;在正常血片中RBC不染色;PLT染成深紅色;中性粒細胞胞漿染成紅色或深紅色,有些細胞有陽性顆粒;單核細胞的胞漿染成淡紅色,可含有細小或粗大陽性顆粒;少數淋巴細胞的胞漿內含有少許小的淡紅色或紅色顆粒;正常骨髓的幼稚細胞和有核RBC都不染色;巨核細胞的胞漿內呈彌散紅色或深紅色.巨核細胞的胞漿內呈彌散紅色或深紅色.顏色深淺與濃度相關。糖原的固定要及時,而且標本要新鮮。
特殊染色化學試劑的選擇:化學試劑的選擇主要針對自配試劑而言,對于商品化試劑盒則在于染液質量。1、一般要求選用很好品牌的化學試劑,特別是一些染色中關鍵的試劑。很好的化學試劑(如Sigma、國藥、阿拉丁、西隴等)是保證高質量染液的前提和關鍵,特別對于染液中的關鍵試劑尤為重要。如堿性品紅在一些染色液(抗酸、無色品紅、醛品紅等)中均為主要試劑,其質量決定了較終的染色效果。如配制無色品紅染液時,所使用的偏重亞硫酸鈉試劑質量不合格,則會導致染液配制失敗,無法染出合格的切片。2、純度一般以分析純為主。0.5%過碘酸水溶液5分鐘。或1%過碘酸95%酒精溶液。安徽品牌糖原染色試劑盒廠家供應
自早幼粒階段以后的粒細胞和幼單核細胞可呈弱陽性反應。安徽品牌糖原染色試劑盒廠家供應
糖原及粘液染色法注意事項:1、糖原的固定要及時,而且標本要新鮮。2、如用無水酒精作糖原的固定劑,有它的弊病,因無水酒精滲透較慢,而且容易產生極化,(極化是糖原顆粒趨向于細胞的一端)。故用Gendre氏固定液效果較佳,其配法如下:苦味酸飽和于95%酒精85ml40%甲醛10ml冰醋酸5ml3、各種試劑必須化學純,亞硫酸鈉須有濃厚氣味,器皿必須潔凈而干燥,染色缸亦是。4、如果Schiff氏試劑,在經過活性碳吸附漂白后不顯無色,首先應考慮試劑中的偏重亞硫酸鈉是否失效。如果偏重亞硫酸鈉氣味不濃,使用時可考慮適當的增加用量。其次考慮堿性品紅本身,常常雖屬同一生產廠家,但不同批號,其效果就可能不同,應特別引起注意~安徽品牌糖原染色試劑盒廠家供應