無血清細(xì)胞凍存液：凍存注意：開蓋之前，用70%的乙醇或異丙醇擦拭瓶身。以下說明適用于在6孔板內(nèi)的培養(yǎng)物的凍存。培養(yǎng)物應(yīng)該在適合傳代的時候進(jìn)行收集和凍存。每管所含有的細(xì)胞應(yīng)當(dāng)來源于6孔板的1個培養(yǎng)孔。如果使用其他的培養(yǎng)器皿，請相應(yīng)的調(diào)整體積。1.在室溫（15-25°C）以300xg離心5分鐘。2.輕輕吸走上清液，注意不要擾動細(xì)胞團(tuán)。3.用血清學(xué)吸管以1mL的TBD-698重懸細(xì)胞。在打散細(xì)胞團(tuán)時，盡量減少細(xì)胞聚集體分解。4.用2mL的血清學(xué)吸管將1mL的細(xì)胞聚集體轉(zhuǎn)移到標(biāo)記好的凍存管中。5.用以下方法凍存細(xì)胞聚集體:推薦使用緩速降溫方法，每分鐘降低1度，隨后可以在-196°C液氮長期保存。不推薦在-80°C長期保存。逐步降溫法：-20°C保存2個小時，然后-80°C中保存2個小時，隨后可以在-196°C液氮中長期保存。細(xì)胞存儲中對細(xì)胞凍存更有特殊要求。無錫鄭州無血清細(xì)胞凍存液

細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的原則：慢凍速融，這樣更加有利于保持細(xì)胞的活力。凍存細(xì)胞不加任何保護(hù)劑，會導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生，從而使細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機(jī)械損傷，引起細(xì)胞內(nèi)環(huán)境滲透壓，PH，電解質(zhì)等的改變，進(jìn)而促使細(xì)胞死亡。細(xì)胞凍存液除去蛋白酶，添加適量配置好的凍存細(xì)胞培養(yǎng)液.細(xì)胞培養(yǎng)的傳代及日常維持過程中，在培養(yǎng)器具、培養(yǎng)液及各種準(zhǔn)備工作方面都需大量的耗費(fèi)，而且細(xì)胞一旦開始原代培養(yǎng)，它的各種生物特性都將逐漸發(fā)生變化并隨著傳代次數(shù)的增加和體外環(huán)境條件的變化而不斷有新的變化。因此及時進(jìn)行細(xì)胞凍存十分必要。細(xì)胞冷凍儲存在-70℃冰箱中可以保存一年之久；細(xì)胞儲存在液氮中，溫度達(dá)-196℃，理論上儲存時間是無限的。無錫鄭州無血清細(xì)胞凍存液無血清細(xì)胞凍存液使用方法：直接將含細(xì)胞混合液的凍存管放入-80℃以下冰箱，長期冷凍保存。

永生化的細(xì)胞系往往相當(dāng)健壯，因此，使用實(shí)驗(yàn)室自制的凍存培養(yǎng)基，效果也不錯。典型的配方是在生長培養(yǎng)基中加入5%到10%的DMSO和5%到40%的血清，或只是在血清中加入10%的DMSO。DMSO的作用是取代細(xì)胞中的一些水，以防止冰晶形成，刺穿細(xì)胞。據(jù)賽默飛世爾科技的較深科學(xué)家RhondaNewman介紹，DMSO還能防止細(xì)胞在冷凍期間發(fā)生收縮，而后在解凍時又變得腫脹。血清，這種富含營養(yǎng)成分的物質(zhì)，直接支持細(xì)胞。“當(dāng)細(xì)胞處于這種營養(yǎng)豐富的環(huán)境時，它們能夠更好地復(fù)蘇。

無血清凍存液注意事項(xiàng)：1、請選擇對數(shù)生長期細(xì)胞進(jìn)行凍存。2、凍存液加入細(xì)胞后，請盡快放入-80C冰箱凍存。3、本產(chǎn)品凍存細(xì)胞可以在-80°C冰箱保存3年以上。4、若需長期凍存細(xì)胞，請轉(zhuǎn)移至液氮罐中貯存。5、凍存液中含DMSO成分，為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套。無血清凍存液特性：1.不含動物成分。2.不需回溫，完全即用型。3.適合各種動物細(xì)胞。4.適合無血清培養(yǎng)細(xì)胞與含血清培養(yǎng)細(xì)胞。5.復(fù)蘇細(xì)胞存活率高。無血清凍存液用途：1、無血清細(xì)胞凍存液用于免疫細(xì)胞及干細(xì)胞的存儲。2、細(xì)胞保藏中心，無血清細(xì)胞凍存液用于細(xì)胞株的長期保存。3、科研高校，無血清細(xì)胞凍存液用于細(xì)胞株凍存。4、無血清細(xì)胞凍存液用于醫(yī)院樣本庫細(xì)胞樣本保存。無血清凍存液穩(wěn)定性及保存條件：1、置于2～8℃避光保存，有效期為1年；置于-20℃保存，有效期為3年；2、本產(chǎn)品請于保質(zhì)期內(nèi)使用，超過保質(zhì)期，必須放棄使用；3、為確保產(chǎn)品質(zhì)量，請避免反復(fù)凍融相關(guān)產(chǎn)品。無血清凍存液注意事項(xiàng)：本產(chǎn)品凍存細(xì)胞可以在-80°C冰箱保存3年以上。

如何提高細(xì)胞凍存成功率：無菌！無菌！無菌！要折騰嬌貴的細(xì)胞寶寶，必須要在無菌超凈環(huán)境下才行。超凈工作臺，所有的儀器用品提前滅菌，培養(yǎng)箱什么的定期用酒精擦干凈。微生物污染對細(xì)胞的影響經(jīng)常是開始的時候沒發(fā)現(xiàn)，發(fā)現(xiàn)的時候已經(jīng)結(jié)束了，所以千萬要小心。除了操作中的各種小細(xì)節(jié)，還有一個實(shí)驗(yàn)雷區(qū)，就是配制細(xì)胞凍存液。常見的凍存液配制要遵循培養(yǎng)基+血清+DMSO的成分要求，根據(jù)細(xì)胞實(shí)際判斷成分配比，還建議使用程控儀，注意配制溫度，一個不小心就又會影響細(xì)胞的存活效果。無血清細(xì)胞凍存液存儲條件：3個月以上沒有使用凍存液計劃時，盡可能-20℃冷凍保存。無錫鄭州無血清細(xì)胞凍存液

無血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品特色：即用型，無需現(xiàn)配，即開即用。無錫鄭州無血清細(xì)胞凍存液

細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的基本原則是慢凍快融，實(shí)驗(yàn)證明這樣可以較大限度的保存細(xì)胞活力。目前細(xì)胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑，這兩種物質(zhì)能提高細(xì)胞膜對水的通透性，加上緩慢冷凍可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外，減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成，從而減少由于冰晶形成造成的細(xì)胞損傷。復(fù)蘇細(xì)胞應(yīng)采用快速融化的方法，這樣可以保證細(xì)胞外結(jié)晶在很短的時間內(nèi)即融化，避免由于緩慢融化使水分滲入細(xì)胞內(nèi)形成胞內(nèi)再結(jié)晶對細(xì)胞造成損傷。細(xì)胞凍存是細(xì)胞培養(yǎng)、引種、保種和保證實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行的重要技術(shù)手段。在細(xì)胞建株和建系中，及時凍存原始細(xì)胞是十分重要的。在雜交瘤單克隆抗體的制備過程中，雜交瘤細(xì)胞、每次克隆化得到的亞克隆細(xì)胞的凍存保種常常是必不可少的實(shí)驗(yàn)操作。因?yàn)樵跊]有建立一個穩(wěn)定的細(xì)胞系或穩(wěn)定分泌抗體的細(xì)胞系的時候，細(xì)胞的培養(yǎng)過程中隨時可能因細(xì)胞的污染、分泌抗體能力的喪失或遺傳變異等等導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗，如果沒有原始細(xì)胞的凍存，則因?yàn)樯鲜龅囊馔舛肮ΡM棄。無錫鄭州無血清細(xì)胞凍存液