以前在另一家實驗室的時候，凍存細胞根本就沒有講究這些標準操作。凍存的細胞有293T、PT67、C2C12、MEF(鼠胚胎成纖維細胞）、HelaS3、HelaD、U2OS、HKC、RK3E、ECO、H292、HSY、COS7、SupT1等。將細胞酶消化后直接參與離心，加入凍存液（含90%的血清和10%的DMS0)，直接放在-80℃冰箱。兩三天后移入液氮中，較久保存，幾年后細胞的活力仍沒有什么受損，照常能復蘇，成活率高。但有三點須注意：（1）一是細胞的生長狀態要好，不能長得過稀，同樣也不能過密，細胞的狀態看起來相當健康。70%密度的要保存的細胞須再長24h才能全滿，萬一細胞狀態不好，可以酶消化后再繁殖一次；（2）凍存細胞的量要留心，不能太密也不能太稀，一般1OOmm培養皿的細胞凍存為3~4管；（3）存放在-80℃冰箱的時間不能過長，一兩天后轉移到液氮罐里。我們也曾取出存放在-80℃冰箱的細胞，半年還有30%~50%的細胞有活性，但一年的細胞就沒有活的。使細胞產生內源性的機械損傷，引起細胞內環境滲透壓。武漢正規無血清細胞凍存液廠家推薦

血清血液成分（加入抗凝劑）血液凝固析出的淡黃色透明液體。如將血液自血管內抽出，放入試管中，不加抗凝劑，則凝血反應，血液迅速凝固，形成膠凍。凝血塊收縮，其周圍所析出之淡黃色透明液體即為血清，也可于凝血后經離心取得。在凝血過程中，纖維蛋白原轉變成纖維蛋白塊，所以血清中無纖維蛋白原，這一點是與血漿比較大的區別。而在凝血反應中，血小板釋放出許多物質，各凝血因子也都發生了變化。這些成分都留在血清中并繼續發生變化，如凝血酶原變成凝血酶，并隨血清存放時間逐漸減少以至消失。這些也都是與血漿區別之處。但大量未參加凝血反應的物質則與血漿基本相同。為避免抗凝劑的干擾，血液中許多化學成分的分析，都以血清為樣品。杭州無血清細胞凍存液生產廠家無血清細胞凍存液 產品原理：無血清細胞凍存液，含多種保護劑成分。

無血清快速細胞凍存液，通用于各種動物細胞株。特別配方具有有效提高細胞凍存活率和復蘇活力。不含動物來源性蛋白，能減少各類病毒、霉菌和支原體等的污染，確保凍存細胞安全。既適用于一般培養細胞的凍存，也適用于無血清培養細胞和蛋白表達細胞的凍存。產品特色：1.高安全性，完全使用醫藥品等級原料進行生產，不含動物成分，病毒、霉菌和支原體等污染可能性低，各批產品之間有更高的產品質量一致性。2.細胞存活率高，無批次差異。3.完全凍存液配方，可直接使用，方便簡捷，可直接存放于-80℃冰箱凍存，無需經過費時的程序降溫過程（省時、省力、省錢）。

無血清細胞凍存液與含血清細胞凍存液對比：傳統的細胞凍存液是使用培養基、血清和DMSO按照一定的比例混合，其中DMSO的含量是10%，血清的含量是10%，統稱為含血清細胞凍存液。含血清細胞凍存液的一般的凍存方法是梯度降溫凍存法，如先將冷凍管置于4℃冰箱10分鐘，然后移至-20℃冰箱30分鐘，再移至-80℃冰箱保存16-18個小時（或隔夜），較后才移至液氮罐中進行長期的儲存?？梢姡寮毎麅龃嬉簝龃婕毎麜r遇到的問題：1.凍存細胞時需現配凍存液(如購買市面上通用的含血清細胞凍存液，此步可省略)。2.需要程序降溫（4℃→-20℃→-80℃→液氮），步驟繁瑣，耗時耗力。3.含血清，細胞污染(病毒、霉菌和支原體等)的風險更高。4.血清批次、品質間差異導致凍存液的批次間差異。5.需液氮凍存，且不能原位（如孔板）凍存。無血清凍存液使用方法：儲存條件：2-8C保存，年有效：-20C保存，兩年有效。

細胞凍存：就凍存細胞而言，為了防止細胞在溫度下降時產生胞內細微冰晶，其溫度的下降不能太快。標準的操作是每一分鐘下降一度。有以下三種建議：（1）優先推薦使用程控降溫儀。（2）其次，加有異丙醇的細胞凍存盒，基本上也可以保證每分鐘1℃左右的降溫速度；（3）還有一些普遍的簡易凍存方法。如4℃半小時，-20℃半小時，然后-80℃過夜，再放入液氮；用泡沫盒（裝15mL離心管的那種）加一個保鮮袋，直接放在-80℃凍存；也可以用紗布做成袋子，將細胞懸掛在液氮上方，隔天轉入液氮；在凍存管外面包上棉花，直接放在-80℃冰箱就能夠達到緩慢降溫的效果；有的時候如果確實比較緊急的話，向96孔凍存盒的內部加滿自來水，再將凍存管放置孔中，直接置于-80℃，這樣也能夠達到緩慢降溫的目的?？焖賰龃婕床恍枰涍^梯度降溫，直接將細胞放入-80 ℃冰箱24h。杭州無血清細胞凍存液直銷價

無需程序降溫，細胞復蘇率90%以上。武漢正規無血清細胞凍存液廠家推薦

無血清細胞凍存液，通用于各種動物細胞株（tumour細胞和常規細胞），凍存細胞可在-80℃長期保存（>5年）。CellFreezingMedium配方成分明確，不含動物來源性蛋白，Chemicalbook不含血清，可減少各類細菌、病毒和支原體等污染，保證凍存細胞的安全。該凍存液含DMSO、葡萄糖等各種細胞營養成分，提高細胞存活率和活力，亦適合于無血清培養細胞和蛋白表達細胞。細胞凍存是細胞實驗中的一個常規技術，通常細胞凍存液的配方是由胎牛血清加上DMSO組成，由于血清含有異源成分且生長過程中可能帶來的風險Chemicalbook，故傳統的細胞凍存配方并不適于體內研究。本產品完全由化學成分組成，無動物來源，目前測試可以很好的凍存T細胞，NK細胞以及MSC等細胞。武漢正規無血清細胞凍存液廠家推薦