有的外泌體分離方法需要高速離心,需要使用大型機器,耗費近24小時的時間才能獲得,非常不便。而高離心力也可能破壞囊泡。降低樣品的質(zhì)量。這項研究有望解決這一難題。在論文中,研究人員們提供了一種通過微流體和聲學的獨特組合從體液樣品中捕獲外泌體的新穎方法。他們開發(fā)的原始聲學分選裝置由兩個傾斜的聲學換能器和一個微流體通道組成,當這些傳感器產(chǎn)生的聲波相互碰撞時,形成產(chǎn)生一系列壓力節(jié)點的駐波。每當細胞或顆粒流過通道并遇到一個節(jié)點時,壓力會將細胞引導(dǎo)離開中心一點點。細胞移動的距離取決于大小和其他屬性(如可壓縮性),這樣,當?shù)竭_通道末尾時,不同大小和性質(zhì)的細胞就能夠被分離開來。這種方法分離得到的外泌體,基本上不改變其生物或物理特征,為開發(fā)評估人類健康以及疾病診斷和進展提供了有吸引力的新方法。這些試劑盒不需要特殊設(shè)備,隨著產(chǎn)品不斷更新?lián)Q代,提取效率和純化效果逐漸提高。杭州外泌體提取試劑直銷廠家
外泌體與免疫系統(tǒng):不同的細胞來源的外泌體,包括免疫細胞(B細胞和樹突狀細胞)、病細胞、上皮細胞和間充質(zhì)細胞,釋放出帶有載體的外泌體,可影響先天免疫系統(tǒng)和適應(yīng)性免疫系統(tǒng)中受體細胞的增殖和各自的活性。CD4+和CD8+T細胞可直接或間接地受到外泌體的影響,刺激或壓制其增殖和功能。外泌體與代謝性和心血管疾?。和饷隗w可以通過攜帶miRNA或代謝物分子在代謝性疾病和心血管疾病的發(fā)生的發(fā)展過程中起作用。體外培養(yǎng)心血管疾病的細胞收集的外泌體與疾病相關(guān)的代謝適應(yīng)有關(guān);體外培養(yǎng)的間充質(zhì)干細胞和胚胎干細胞的外泌體具有保護心血管的作用。這些發(fā)現(xiàn)表明不同來源的外泌體可以通過傳遞miRNA,蛋白等物質(zhì)改變受體細胞的代謝狀態(tài)。外泌體檢測作為一種新型的液體活檢熱點技術(shù)已被許多臨床科研機構(gòu)普遍地應(yīng)用于一些病癥和疾病的無創(chuàng)診斷開封外泌體提取試劑產(chǎn)品介紹外泌體的提取、分離方法:尺寸排阻色譜法和超濾法。
外泌體(exosome),特指直徑在40-100nm的盤狀囊泡。其主要來源于細胞內(nèi)內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體,經(jīng)多囊泡體外膜與細胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中?,F(xiàn)已證實可以分泌外泌體的細胞有:肥大細胞、淋巴細胞、樹突狀細胞、瘤細胞、間充質(zhì)干細胞等。外泌體在免疫中抗原呈遞、瘤的生長與遷移、組織損傷的修復(fù)等生理病理上起著重要的作用。同時,不同細胞分泌的外泌體具有不用的組成成分和功能,可作為疾病診斷的生物標志物。細胞外囊泡是蛋白質(zhì)、mRNA、miRNA和脂質(zhì)運輸來完成細胞間通訊通路的重要媒介,根據(jù)它們的大小和發(fā)生分為三類,包括外泌體、微泡和凋亡小體。
外泌體(exosomes,Exos)是細胞分泌的一種膜囊泡,因其可以將供體細胞的信息通過其攜帶的蛋白質(zhì)、mRNA、miRNA等傳遞到受體細胞,實現(xiàn)細胞之間的信息交流及物質(zhì)交換,并且可以作為藥物載體轉(zhuǎn)運藥物而引起科學家的普遍關(guān)注(Fig1)。外泌體作為內(nèi)源性的天然藥物載體有著獨特的優(yōu)勢,表面由脂質(zhì)和蛋白質(zhì)組成,使其可以穿透許多生物膜,提高藥物的運輸效率和靶向性,可以穩(wěn)定存在于血液中,納米級尺寸明顯增強藥物在瘤部位的滲透滯留效應(yīng)(permeabilityandretentioneffect,EPR)。目前,許多抗藥物、基因藥物及藥物均被成功載入外泌體。但是由于沒有較好的外泌體分離純化和載藥的方法,使得其作為藥物載體的應(yīng)用受到限制。目前人們多采用超速離心、免疫磁珠、超濾、沉淀或試劑盒等方法實現(xiàn)外泌體的提取分離。
外泌體在肺病進程中的作用:肺病細胞來源外泌體(LCC-exosome)可以通過刺激一些病癥血管的形成來促進一些病癥的生長。據(jù)相關(guān)報道稱,LCC-exosome中的miR-210可以通過調(diào)節(jié)基質(zhì)細胞中酪氨酸受體激酶A3的含量,促進一些病癥血管的生成;而LCC-exosome中的miR-23a則可以通過啟動脯氨酰羥化酶及壓制緊密結(jié)合蛋白ZO-1來促進肺病的生血管作用。此外,有研究發(fā)現(xiàn),外泌體中的內(nèi)容物可以觸發(fā)上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)。晚期肺病患者血清中外泌體波形蛋白表達增加,促使人正常支氣管上皮細胞出現(xiàn)EMT,從而使肺支氣管正常上皮細胞出現(xiàn)增殖,遷移能力。色譜法。這種方法分離到的外泌體在電鏡下大小均一,但是需要特殊的設(shè)備,應(yīng)用不普遍首先在無菌條件下提取人體體液,并用PBS緩沖液進行稀釋。重慶外泌體提取試劑供應(yīng)商
近年來,隨著人們對外泌體的研究和認識加深。杭州外泌體提取試劑直銷廠家
1983年,外泌體初次于綿羊網(wǎng)織紅細胞中被發(fā)現(xiàn),1987年Johnstone將其命名為“exosome”。多種細胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體。其主要來源于細胞內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體,經(jīng)多囊泡體外膜與細胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中。所有培養(yǎng)的細胞類型均可分泌外泌體,且外泌體天然存在于體液中,包括血液、唾液、尿液、腦脊液和乳汁中。有關(guān)他們分泌和攝取及其組成、“運載物”和相應(yīng)功能的精確分子機制剛剛開始研究。外泌體目前被視為特異性分泌的膜泡,參與細胞間通訊,對外泌體的研究興趣日益增長,無論是研究其功能還是了解如何將其用于微創(chuàng)診斷的開發(fā)。如何高效地提取外泌體是實現(xiàn)這項新興液體活檢技術(shù)臨床常規(guī)化應(yīng)用的關(guān)鍵杭州外泌體提取試劑直銷廠家