糞便總RNA快速提取試劑盒:獨特裂解劑/裂解液迅速裂解細胞和滅活細胞內核酸酶,然后RNA在高離序鹽狀態下選擇性吸附于玻璃奶,然后將粗純化的玻璃奶轉移到離心柱,再通過一系列快速的漂洗-離心的步驟,漂洗液將腐植酸、細胞代謝物、蛋白等雜質去除,較后低鹽的洗脫緩沖液將純凈RNA從硅基質膜上洗脫。試劑盒特點:離心吸附柱內硅基質膜全部采用進口世界有名公司特制吸附膜,柱與柱之間吸附量差異極小,可重復性好。克服了國產試劑盒膜質量不穩定的弊端。兼容性強,適用于各種不同的土壤、糞便以及其他soil.不需要使用有毒的苯酚等試劑,也不需要乙醇沉淀等步驟。快速,簡捷,單個樣品操作一般可在1小時內完成。多次柱漂洗確保高純度,OD260/OD280典型的比值達1.9以上,可直接用于PCR,Northern-blot和各種酶切反應。拭子RNA提取試劑的選擇?如果離心柱硅膠膜吸附能力不好,裂解液和洗脫液沒有經過很好的優化。南京正規RNA提取試劑進貨價
RNA提取注意事項:所有實驗所用的泵頭、離心管等消耗品均要使用RNase-free的;整個過程要在無RNase污染的條件下進行,通常可以在無菌操作臺中進行實驗,并用75%的酒精進行擦拭殺菌,如有必要也可在實驗前噴灑一些商用的RNase壓制劑;所有相關溶液的配制要使用RNase-free水或DEPC水(包括75%酒精也需要用無水乙醇與DEPC水配制);溶液的配制使用移液器進行操作,切勿使用量筒等中間器皿;研缽、研棒、鑷子、剪刀等用錫箔紙包好后,200℃干熱滅菌4h;實驗過程中一定要戴手套和口罩;異丙醇、氯仿、乙醇等試劑要使用未開封的,或者開封之后直接分裝至小容量離心管的,以避免多次使用的交叉污染;南京正規RNA提取試劑進貨價目前常用Trizol法進行提取組織或細胞中的RNA。
法爾和梅洛的發現。科學家在矮牽牛花實驗中所觀察到的奇怪現象,其實是因為生物體內某種特定基因“沉默”了。導致基因“沉默”的機制就是RNA干擾機制。此前,RNA分子只是被當作從DNA(脫氧核糖核酸)到蛋白質的“中間人”、將遺傳信息從“藍圖”傳到“工人”手中的“信使”。但法爾和梅洛的研究讓人們認識到,RNA作用不可小視,它可以使特定基因開啟、關閉、更活躍或更不活躍,從而影響生物的體型和發育等。諾貝爾獎評審會在評價法爾和梅洛的研究成果時說:“他們的發現能解釋許多令人困惑、相互矛盾的實驗觀察結果,并揭示了控制遺傳信息流動的自然機制。這開啟了一個新的研究領域。”
拭子RNA提取試劑的選擇?應有較高的提取得率。對離心柱法而言,拭子核酸得率的高低,主要取決于離心柱對核酸的吸附能力、洗脫能力以及裂解液的裂解消化能力。離心柱的硅膠膜RNA吸附性能好、裂解液細胞裂解能力強、洗脫液洗脫能力好,核酸的提取得率就高。反之,如果離心柱硅膠膜吸附能力不好,裂解液和洗脫液沒有經過很好的優化,RNA的提取得率就不高。至于RNA提取得率的確定,我們可以使用紫外分光光度法,但是不能作為判斷得率的單獨標準,較好還是要做個PCR或熒光定量。提取的RNA樣品中不應存在對酶存在壓制作用的有機溶劑及過高濃度的金屬離子。
miRNA是一類內源性的約22個核苷酸的非編碼RNA分子,可參與轉錄后的基因調控。在細胞的分化和發育,細胞信號轉導和對傳染的應答等生物學過程中,miRNA發揮了重要作用。成熟的miRNA主要通過翻譯壓制來調控內源性基因的表達。miRNA的應用有miRNA模擬物和壓制劑。miRNA模擬物是化學合成的雙鏈RNA分子,通過傳染到細胞中,模擬成熟的內源性miRNA分子;miRNA壓制劑是單鏈經過修飾的RNA分子,通過傳染到細胞中,特異性的壓制miRNA的功能。miRNA模擬物和壓制劑可以用于研究單個miRNA錯誤調節所造成的生物學影響,也能用于確定某個miRNA分子的特異性靶標基因。同時有研究發現miR-143可調控KRAS原病基因,為病癥的醫治提供了新的靶點和醫治方法。許多樣品中含有高水平的 RNase,這種酶也會加速 RNA 的降解。南京正規RNA提取試劑進貨價
血漿/血清中miRNA提取試劑盒:是專門針對血清、血漿樣本中miRNA提取而開發的。南京正規RNA提取試劑進貨價
RNA組成結構:RNA和DNA一樣,也是由各種核苷酸通過3′,5′-磷酸二酯鍵連接構成的多核苷酸鏈,但與DNA有一系列差異。1.在化學組成方面,RNA含核糖而不含脫氧核糖。含尿嘧啶而不含胸腺密啶。例外的是,每個tNA分子含有一個胸腺嘧啶,這是在RNA鏈合成后由尿嘧啶甲基化生的,此外,前面已提到,少數DNA含有少量核糖,但這些個別的例外并不能以此否定兩類核酸組成上的差異。2.RNA一級結構的概念雖與DNA相同.但其基本結構單位是核糖核苷酸而不是脫氧核糖核苷酸。此外,部分RNA5′端或3′端有特殊的核苷酸序列,而且RNA一級結構中沒有DNA那樣復雜的順序組織。3.絕大多數RNA為單鏈分子,單鏈可自身折迭形成發夾(hairpin)樣結構而有局部雙螺旋結構的特征,這是各種RAN空間結構的共同特征。RNA局部雙螺旋結構中堿基互補配對規律是A對U和G對C。由于RNA分子內部不能較全形成堿基配對,故其堿基克分子比A不等于U,G不等于C,不存在DNA堿基比例的Chargaff規律。南京正規RNA提取試劑進貨價
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