加入漂洗緩沖液(體積是樹脂柱床體積的7.5倍)并離心。< 500μL樹脂時1,000×g離心1 min;≥ 500μL樹脂時2,000×g離心4 min。 4. 使用一個新的50 mL離心管作為收集管。 5. 加入洗脫緩沖液(體積是樹脂柱床體積的5倍)與樹脂混勻并離心。< 500μL樹脂時1,000×g離心1 min;≥ 500μL樹脂時2,000×g離心4 min。回收管中即純化好的蛋白。 6. 如果是純化抗體,在純化產物中加入中和緩沖液。 * 進行較大體積操作時,可以延長結合反應時間,并用膠帶密封上樣池上沿以便顛倒混勻操作。離心前去除膠帶即可。選購不帶Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管的Amicon? Pro時請使用目錄號ACS500024。超濾濃縮管的好處有很多。南京默克離心濃縮管聯系電話
外泌體用于細胞學或動物實驗前的無菌處理 已經經過上述方法制備的外泌體在進行細胞或動物實驗之前還需進行一步除菌過濾,這個時候考慮到得率,應該采用離心法處理,以減少過濾時的外泌體樣品損失。 超濾方法純化具體操作步驟舉例 Amicon? Ultra-15 超濾管 (10 kDa MWCO) 用Steriflip?真空抽濾對樣品進行澄清[目錄號SCGP00525; 0.22 μm Millipore Express PLUS (PES)膜] 用PBS平衡Amicon? Ultra-15 超濾管(目錄號UFC901024,10 kDa MWCO) ,4000g離心 X 10 min。 從超濾管內管及收集管吸走PBS。向超濾管加入15 mL 樣品。4000g 離心30 min 濃縮。倒空收集管。加入14 mL PBS 進行緩沖液置換,溫柔吸打樣品數次。4000g離心 30 min。從濃縮管吸回處理好的樣品。(30X 濃縮) 注意 : 所有 Amicon? Ultra 超濾管 (0.5, 2, 4 和 15 mL) 與此操作流程兼容 *南京默克離心濃縮管聯系電話超濾濃縮管的主要優勢是什么。
基于 Millipore? 先進的膜過濾技術,默克密理博開發了獨特的腺***及慢***純化與濃縮試劑盒。試劑盒中已經包括了必需的 Steriflip? 過濾裝置和超濾管,能在短短 2 小時內安全、快捷地獲得高產***。 節約時間:整個操作需 2 小時。 產量高:***回收率超過 70%。 整體體驗極好:流程簡便而***質量高。 設計新穎易操作:Steriflip? 過濾裝置可以替代昂貴的設備,使原本繁瑣凌亂的操作變得簡單而標準。 安全:封閉的真空抽濾設計,完全避免樣品飛濺造 成的***污染和損失。
無血清樣品選擇 3kDa 孔徑是為了盡可能提高外泌體的回收率。 有血清樣品選擇100kDa/500kDa孔徑是為了盡可能去除細胞分泌蛋白以及血清成分中小于外泌體的白蛋白造成的影響。 研究者可根據樣品的粘稠程度,以及需要制備的目標外泌體 / 囊泡 / 顆粒的大小分布來選擇和優化超濾孔徑(3kDa/10kDa/30kDa/50kDa/100kDa),以便達到更好的得率和操作體驗。 樣品體積大于 30mL 時可以考慮用超濾杯或 Centricon-70 超濾管,請注意攪拌式超濾杯在200mL 以內時吸附損耗可能較離心式超濾管略偏高。如需進一步提高特定外泌體的純度,可選用包被相應抗體的磁珠進行親和純化精制。上海Millipore超濾濃縮管授權代理商!
溫和的高濃度樣品濃縮、脫鹽裝置 Amicon? stirred cells 攪拌式超濾杯 Amicon? stirred cells 攪拌式超濾裝置對于高濃度(達 百分之十)達分子溶液快速濃縮和脫鹽提供了的可行方法。做蛋白濃縮時,向超濾裝置中導入氣壓,大于超濾膜截留分子量的溶質將被截留在容器內,水及小于超濾膜截留分子量的溶質(如鹽分)會被過濾并排出。加壓拌式設計防止濃縮的樣品發生沉淀,比離心超濾溫和,對于高濃度、易沉淀樣品的進一步濃縮同時脫鹽等應用是比較好選擇。配套選擇的超濾膜可以滅菌并經處理后反復使用,更為經濟。超濾濃縮管咨詢服務電話多少呢。南京默克離心濃縮管聯系電話
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大體積樣品濃縮 Centricon? Plus-70離心濃縮裝置 用于15-70mL生物溶液的快速濃縮等操作。70mL的樣品在25分鐘內濃縮至350μL;死體積設計確保樣品不會被離干而損失。依起始材料不同、起始體積不同,樣品可被濃縮50-200倍。低吸附豎向再生纖維素超濾膜及雙超濾柱設計,加快處理速度;反轉離心操作進一步使寶貴的濃縮樣品回收率得以提高。這個產品替代傳統的透析、凍干、沉淀或攪拌式濃縮等技術和方法,是非常方便的工具。 特別推薦的應用: 色譜洗脫產物的濃縮和脫鹽 單克隆抗體濃縮 培養上清中蛋白和***的濃縮 組織勻漿液和細胞裂解液澄清南京默克離心濃縮管聯系電話