首先,Amicon? Ultra超濾管的蛋白比較低起始濃度為25ug/ml。請確保樣本的起始濃度大于這個濃度。其次,如果問題仍然出現,請不要丟棄樣本濾過液以便用于分析可能的原因: 1)如果目的樣本在濾過液中,那么請排查: a)是否選擇了合適截留分子量的超濾管(目的蛋白分子量的1/2或者1/3)? b)使用的離心力是否是在限定范圍內?如果使用的是rpm,請換算成相應的g離心力,具體換算方法請垂詢。 c)離心機**近是否有校準過? d)是否***嘗試這個蛋白?益啟生物公司主營超濾濃縮管銷售。江蘇Merck超濾濃縮管代理商
特點與優點: 高產:沒有樣品轉移,損失更少 溫和:特別的滲濾設計使換液過程更溫和 快速:從細胞裂解到純化、優化一共需要5次低速離心 靈活:一種離心方法,***支持各種樣品制備所需 蛋白緩沖液置換、脫鹽和透析 每一種蛋白的制備都是***的,常常需要摸索和優化。應該考慮為特定蛋白選擇相應的工具進行換液和透析。您可以從操作較快 Amicon? Pro 的滲濾法或更溫和的 D-Tube?透析法中選擇更適合樣品的操作方法。 選擇更直接而有效的方法! Amicon? Pro能做到一步離心完成脫鹽換液嘉定區超濾濃縮管超濾濃縮管的好處有很多。
抗體標記 適合25-200μg樣品操作 5次低速離心,總耗時~50分鐘 1. 在上樣池中加入0.5 mL TBS-T預濕Amicon? Pro。1,000×g離心1 min。 2. 加入抗體樣品 ? 對于比較稀釋的樣品(< 1 mg/mL) - 上樣池下端接上Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管(建議使用50k MWCO)。 - 加上至多1 mL抗體樣品, 4,000×g離心15 min。 ? 對于濃度較高的的樣品(≥ 1 mg/mL) - 在Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管(建議使用50k MWCO)中加入至多100μL樣品。 - 在Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管(建議使用50k MWCO)中加入至多100μL樣品。 大體積樣品濃縮 Centricon? Plus-70離心濃縮裝置 用于15-70mL生物溶液的快速濃縮等操作。70mL的樣品在25分鐘內濃縮至350μL;死體積設計確保樣品不會被離干而損失。
外泌體用于細胞學或動物實驗前的無菌處理 已經經過上述方法制備的外泌體在進行細胞或動物實驗之前還需進行一步除菌過濾,這個時候考慮到得率,應該采用離心法處理,以減少過濾時的外泌體樣品損失。 超濾方法純化具體操作步驟舉例 Amicon? Ultra-15 超濾管 (10 kDa MWCO) 用Steriflip?真空抽濾對樣品進行澄清[目錄號SCGP00525; 0.22 μm Millipore Express PLUS (PES)膜] 用PBS平衡Amicon? Ultra-15 超濾管(目錄號UFC901024,10 kDa MWCO) ,4000g離心 X 10 min。 從超濾管內管及收集管吸走PBS。向超濾管加入15 mL 樣品。4000g 離心30 min 濃縮。倒空收集管。加入14 mL PBS 進行緩沖液置換,溫柔吸打樣品數次。4000g離心 30 min。從濃縮管吸回處理好的樣品。(30X 濃縮) 注意 : 所有 Amicon? Ultra 超濾管 (0.5, 2, 4 和 15 mL) 與此操作流程兼容 *上海Millipore超濾濃縮管授權代理商!
創新的純化 - 濃縮 - 換液一體化系統 Amicon? Pro 純化超濾系統 目前的蛋白純化常常包括很多步驟,用到多種器具,卻又因此帶來蛋白降解和損失的問題。為了避免因樣品轉移帶來的各種風險,減少您在樣品孵育、漂洗、洗脫、濃縮及換液各步上耗費的時間,默克密理博的研發團隊創新地推出了Amicon?Pro一體化純化超濾系統。Amicon?Pro提供了對小量蛋白樣品的標準化操作,使純化濃縮蛋白變得簡便高效,數據穩定易得。 開放的設計使您可以根據實際需要靈活使用,Amicon?Pro將成為實驗室小量蛋白純化、濃縮、換液各種操作的多功能工具。你知道上海超濾濃縮管代理銷售哪家比較好嗎?嘉定區超濾濃縮管
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離心方式的超濾方法進行溶液置換也被稱為“滲濾”,操作時樣品首先被濃縮,繼而加入新的溶液,再次濃縮時,原溶液已經被換成選定的溶液。 化學相容性與溶出 樣品的化學背景有時很多樣而復雜,過濾的過程中很重要的一點是操作過程不應給樣品帶來新的污染。所以濾膜和裝置與樣品接觸的其它部分都不能與樣品中的化學成分發生反應而產生溶出污染。關于默克密理博各種微濾、超濾產品的化學相容性請參考產品使用說明書或垂詢技術支持專線 。回收率及其重要性超濾的**終目的常常是很大程度地回收目標溶質,但膜的很多特性會對這一目的產生影響。影響回收的因素包括:? 標稱分子量限制(NMWL)/ 核酸截留分子量(NCO)? 截留 ? 濃差極化 ? 通量江蘇Merck超濾濃縮管代理商
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