薩氏液體培養基SDY(SabouraudDextroseMediumwithYeastExtract)在實驗室中的滅菌方法應該遵循以下步驟:1.**稱量培養基**:首先,根據需要的體積,稱量適量的薩氏液體培養基SDY干粉,通常為60克干粉培養基用于制備1升培養基。2.**溶解**:將稱量好的干粉加入到蒸餾水或去離子水中,加熱并攪拌直至完全溶解。注意,薩氏液體培養基SDY的配方中通常包含蛋白胨10.0g、酵母提取物10.0g、葡萄糖40.0g,pH值控制在6.0±0.2(25℃)。3.**調整pH值**:在使用前,根據需要調整培養基的pH值至7.0,以適應的生長條件。4.**分裝**:將溶解并調整好pH值的培養基分裝到適合的容器中,準備進行滅菌。5.**滅菌**:有兩種推薦的滅菌方法,一種是在121℃下高溫滅菌15分鐘,另一種是在115℃下滅菌20至30分鐘。6.**注意事項**:-滅菌過程中應注意無菌操作,避免微生物污染。-滅菌后應讓培養基冷卻至室溫,并儲存在適當的條件下。-使用時應注意個人防護,穿好實驗服并佩戴一次性手套和口罩,以避免粉塵引起的不適。通過遵循這些步驟,可以確保薩氏液體培養基SDY在實驗室中得到正確的滅菌處理,為培養提供適宜的環境。甘油天門冬素瓊脂培養基可以用于培養和鑒定鏈霉菌屬的微生物,為這類微生物提供適宜的生長環境 。察氏酵母膏瓊脂(CYA)
乳糖亞硫酸鹽培養基(LactoseSulfiteMedium,簡稱LS)是一種用于產氣莢膜梭菌確認試驗的培養基,具有以下特點:1.**用途**:-主要用于產氣莢膜梭菌的確認試驗,通過檢測其發酵乳糖產酸產氣的能力。2.**成分組成**:-培養基的主要成分包括胰酪胨、酵母膏、氯化鈉、乳糖和L-半胱氨酸鹽酸鹽。具體配方為每升含有胰酪胨15.0g、酵母膏2.5g、氯化鈉2.5g、乳糖10.0g、L-半胱氨酸鹽酸鹽0.3g,pH值控制在7.1±0.2(25℃)。3.**添加劑**:-每瓶培養基需配套添加焦亞硫酸鈉溶液和檸檬酸鐵銨溶液,每8mL乳糖亞硫酸鹽培養基(LS)需要1支焦亞硫酸鈉和1支檸檬酸鐵銨溶液。這些添加劑用于檢測硫化氫的產生,使菌落呈黑色。4.**配制方法**:-稱取30.3g培養基粉末,加熱溶解于1000mL蒸餾水中,分裝至含有倒置小導管的試管中,每管8mL,121℃高壓滅菌15分鐘,冷卻,臨用前,每管添加0.5mL過濾除菌的焦亞硫酸鈉溶液和0.5mL檸檬酸鐵銨溶液。5.**培養條件**:-將培養基放置于36℃±1℃的厭氧環境中培養18-24小時。6.**結果觀察**:-接種質控菌株如產氣莢膜梭菌(ATCC13124),觀察其生長情況和特征。產氣莢膜梭菌在該培養基上生長良好,菌落變黑,表明其發酵乳糖產酸產氣的能力。BL瓊脂基礎TBA培養皿的使用方法通常有將待測樣本接種到培養皿中,然后在適宜的溫度下培養一定時間,觀察菌落的生長。
YEPD培養基(YeastExtractPeptoneDextroseMedium)是一種常用于酵母菌和細菌培養的培養基,具有以下特點:1.**成分**:-**酵母提取物**:提供豐富的B族維生素、氨基酸和礦物質,促進酵母菌和細菌的生長。-**蛋白胨**:提供氮源和必需氨基酸,支持細菌的生長。-**葡萄糖**:作為主要碳源,提供能量和代謝底物。-**蒸餾水**:作為溶劑,溶解其他成分。2.**營養成分**:-YEPD培養基的典型配方為:1%酵母提取物、2%蛋白胨和2%葡萄糖。3.**pH值**:-通常在pH5.0-6.0之間,適合酵母菌和大多數細菌的生長。4.**應用范圍**:-用于酵母菌和細菌的培養、篩選和研究。-常用于分子生物學實驗中的酵母菌轉化和篩選。5.**制備方法**:-將YEPD培養基粉末按比例稱取,加入蒸餾水,加熱至完全溶解,然后進行高壓蒸汽滅菌。6.**儲存條件**:-滅菌后的YEPD培養基應儲存在2-8°C的冰箱中,避免反復凍融。7.**使用說明**:-培養基在使用前應充分搖勻,確保成分均勻分布。-接種時需在無菌條件下進行,避免污染。8.**培養條件**:-通常在30°C的恒溫條件下培養,培養時間根據實驗需要而定。
LPM瓊脂培養皿的制備方法LPM瓊脂培養皿的制備通常遵循以下步驟:稱量:首先,根據需要的培養基體積,準確稱量LPM瓊脂粉末。溶解:將稱量好的LPM瓊脂粉末溶解在蒸餾水中,通常使用1000毫升水溶解50.5克培養基粉末。滅菌:將溶解后的培養基溶液進行高壓滅菌,通常在121℃下保持15分鐘。冷卻:滅菌后的培養基需要冷卻至45-50℃,以便于后續添加添加劑。添加添加劑:在冷卻后的培養基中加入LPM瓊脂添加劑,如拉氧頭孢,每100毫升培養基中加入1支。混合:將添加劑與培養基混合均勻。傾倒入平皿:將混合好的培養基溶液倒入無菌平皿中,待其凝固后即可使用。由于含有不溶性活性炭,BCYE瓊脂培養基整體呈現黑色,這有助于在培養過程中觀察到的特征性變化 。
TCBS瓊脂培養皿是一種選擇性差異培養基,專門設計用于分離和鑒定腸道致病性弧菌,尤其是霍亂弧菌和副溶血性弧菌。這種培養基的名稱來源于其主要成分:硫代硫酸鈉(Thiosulfate)、檸檬酸鈉(Citrate)、膽汁鹽(Bile Salts)和蔗糖(Sucrose),這些成分共同作用以實現對目標菌種的選擇性生長和鑒別。成分與原理TCBS瓊脂培養皿的主要成分包括:酵母粉和蛋白胨:提供氮源、碳源、維生素和生長因子,支持細菌生長。氯化鈉:提供弧菌嗜鹽生長的比較好的環境,同時形成的高滲透壓抑制其他細菌生長。蔗糖:作為可發酵的碳源,用于檢測細菌的代謝活動。膽酸鈉、牛膽粉、硫代硫酸鈉:與高pH值一起抑制革蘭氏陽性菌和大腸菌群的生長。檸檬酸鐵:與硫代硫酸鈉反應,作為檢測硫化氫產生的指示劑。溴麝香草酚蘭和麝香草酚蘭:作為pH指示劑,能夠根據細菌代謝產物改變顏色。瓊脂:作為凝固劑,使培養基凝固成固體狀態。胡蘿卜浸出液含有多種維生素、礦物質和植物化學成分,這些成分可以為微生物提供必需的營養物質,促進生長。緩沖葡萄糖煌綠膽鹽肉湯(EE肉湯)
BCYE瓊脂培養皿在自然光下可以觀察到博茲曼軍團菌形成的藍白色菌落,而在紫外燈照射下則有藍白熒光 。察氏酵母膏瓊脂(CYA)
TSA0.25%青霉素酶培養皿(TryptoseSoyaAgarwithPenicillin)是一種用于微生物檢測的培養基,具有以下特點:1.**成分組成**:-TSA培養基的主要成分包括胰酪蛋白胨、大豆木瓜蛋白酶消化物、氯化鈉、瓊脂和青霉素酶。具體配方為每升含有胰酪蛋白胨15g,大豆木瓜蛋白酶消化物5g,氯化鈉5g,瓊脂15g,青霉素酶100萬IU,蒸餾水1000ml,pH值調至7.3±0.2(25℃)。2.**用途**:-該培養基主要用于醫藥環境監測、空氣沉降菌檢測、設備、車間、人員、包裝材料等表面微生物的測定。3.**包裝方式**:-通常采用一次性無菌塑料平皿或接觸皿,輻照滅菌,確保無菌性。4.**保存條件**:-保存溫度為2-25℃,避免高溫和直接陽光照射。5.**微生物生長特征**:-不同細菌在含青霉素酶TSA培養基平板上的生長特征不同。例如,金黃色葡萄球菌會產生黃色的色素,大腸埃希氏菌形成無色透明大菌落,鼠傷寒沙門氏菌和枯草芽孢桿菌形成無色大菌落,銅綠假單胞菌產生綠色的色素。6.**微生物靈敏度試驗**:-接種質控菌株后,放置在30-35℃需氧條件下培養18-24小時,進行微生物靈敏度試驗。察氏酵母膏瓊脂(CYA)