麥康凱瓊脂培養(yǎng)基(MacConkeyAgar,簡稱MacC培養(yǎng)基)是一種用于微生物學(xué)研究和臨床診斷中分離和識別腸道細(xì)菌的培養(yǎng)基,具有以下特點:1.**選擇性培養(yǎng)**:利用膽鹽抑制革蘭氏陽性細(xì)菌的生長,同時促進(jìn)革蘭氏陰性細(xì)菌,特別是大腸桿菌的生長。2.**成分**:包含蛋白胨、乳糖、牛膽鹽、氯化鈉、中性紅和瓊脂。其中乳糖作為可發(fā)酵的糖類,中性紅作為pH指示劑,瓊脂作為凝固劑。3.**pH值**:pH值控制在7.4±0.2(25℃),為細(xì)菌提供適宜的生長環(huán)境。4.**菌落特征**:大腸桿菌在MacC培養(yǎng)基上生長時,由于發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸,菌落周圍會出現(xiàn)膽鹽沉淀的渾濁圈,并且菌落本身可能呈現(xiàn)粉紅色。5.**檢驗原理**:通過乳糖發(fā)酵和中性紅的顏色變化,可以將分解乳糖和不分解乳糖的細(xì)菌區(qū)分開。6.**制備方法**:通常需要將培養(yǎng)基粉末溶解在蒸餾水中,121℃高壓滅菌15分鐘后備用。7.**微生物靈敏度試驗**:使用質(zhì)控菌株進(jìn)行微生物靈敏度試驗,以確保培養(yǎng)基的適用性。8.**應(yīng)用**:主要用于腸道致病菌的選擇性分離培養(yǎng),如大腸埃希氏菌和志賀氏菌等。9.**注意事項**:在制備和使用過程中,需要做好防護(hù)措施,確保無菌操作。當(dāng)大腸桿菌等革蘭氏陰性菌在培養(yǎng)皿上形成典型的紅色或粉紅色菌落時,這表明它們具有葡萄糖發(fā)酵的能力。ISP Medium 5預(yù)裝培養(yǎng)皿
硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基(FT)是一種專門用于培養(yǎng)需氧、厭氧和微需氧微生物的培養(yǎng)基,尤其適合作為培養(yǎng)厭氧菌的優(yōu)先培養(yǎng)基。以下是硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基的一些主要特點:1.**多方面的營養(yǎng)**:培養(yǎng)基中包含胰酪胨和酵母浸粉,提供氮源以及合成蛋白質(zhì)所需的氨基酸和生長因子;葡萄糖作為碳源和能源;氯化鈉維持滲透壓平衡。2.**氧含量梯度環(huán)境**:培養(yǎng)基的不同深度可以模擬有氧、弱氧至無氧的環(huán)境,從而滿足厭氧細(xì)菌、兼性厭氧細(xì)菌和好氧菌的生長需求。3.**降低氧化還原電位**:胱氨酸、硫乙醇酸鹽和葡萄糖可以降低氧化還原電位,防止過氧化物積累對某些細(xì)菌產(chǎn)生毒性,有利于厭氧菌的生長。4.**鈍化重金屬防腐劑**:硫乙醇酸鹽具有鈍化含砷和汞等重金屬防腐劑的有害作用。5.**氧化還原指示劑**:刃天青作為氧化還原指示劑,氧化時呈紅色,還原時無色,有助于監(jiān)測培養(yǎng)基的氧化還原狀態(tài)。6.**瓊脂的作用**:少量的瓊脂可以防止液體對流,有利于厭氧環(huán)境的形成。7.**制作簡便**:培養(yǎng)基成分相對簡單,易于制備。8.**流動性特點**:由于含有少量瓊脂,其流動性與普通液體培養(yǎng)基有所區(qū)別。改良TJA平板EMB培養(yǎng)皿是用于培養(yǎng)和檢測腸道革蘭氏陰性桿菌的一種特殊培養(yǎng)基。
4-甲基傘形酮葡糖苷酸(MUG)培養(yǎng)基是一種專門用于檢測β-葡萄糖醛酸苷酶(GUS)活性的培養(yǎng)基,具有以下特點:1.**熒光檢測**:MUG作為熒光底物,在β-葡萄糖醛酸苷酶作用下,裂解后產(chǎn)生藍(lán)色熒光終產(chǎn)物,可通過紫外線監(jiān)測。2.**應(yīng)用廣**:MUG培養(yǎng)基用于熒光檢測大鼠體內(nèi)的β-葡萄糖醛酸苷酶基因表達(dá),也用于植物中葡萄糖醛酸酶基因的表達(dá)進(jìn)行熒光檢測。3.**產(chǎn)品特性**:MUG具有純度≥99%,熔點102°C,分子量為352.29(無水基礎(chǔ)),在冷凍(-20℃)條件下儲存。4.**培養(yǎng)基配方**:包含蛋白胨、磷酸鹽緩沖系統(tǒng)、硫酸錳、亞硫酸鈉、去氧膽酸鈉、硫酸鎂、氯化鈉、氯化鈣和MUG等成分,pH值控制在7.3±0.1(25℃)。5.**操作步驟**:包括稱取培養(yǎng)基粉末溶解、分裝、滅菌、接種質(zhì)控菌液、培養(yǎng)和觀察有無熒光等步驟。6.**試驗現(xiàn)象**:接種大腸埃希氏菌等質(zhì)控菌株,在30-35℃培養(yǎng)后,通過366nm紫外燈下觀察有無熒光,再滴加靛基質(zhì)試劑觀察有無玫紅色環(huán)出現(xiàn)。7.**安全性**:操作MUG時應(yīng)穿實驗服并戴一次性手套,以確保安全。8.**應(yīng)用示例**:包括細(xì)菌培養(yǎng)物的熒光檢測和轉(zhuǎn)基因植物GUS基因的表達(dá)測定。9.**儲存與運(yùn)輸**:MUG培養(yǎng)基應(yīng)-20℃干燥保存,有效期2年,運(yùn)輸時使用冰袋。
連四硫酸鹽肉湯培養(yǎng)基(TetrathionateBroth,TTB)主要是用于分離和富集沙門氏菌的選擇性富集培養(yǎng)基。這種培養(yǎng)基通過特定的化學(xué)成分抑制非目標(biāo)細(xì)菌的生長,同時促進(jìn)沙門氏菌的生長。它的配方中含有硫代硫酸鈉和碘液,它們反應(yīng)生成四硫磺酸鈉,這種物質(zhì)對許多腸道細(xì)菌具有抑制作用,但沙門氏菌能夠還原四硫磺酸鈉并在此培養(yǎng)基中生長。除了沙門氏菌,連四硫酸鹽肉湯培養(yǎng)基也可能適用于其他具有類似代謝特性的細(xì)菌。例如,某些具有連四硫酸鹽還原酶的細(xì)菌也能在這種培養(yǎng)基中繁殖。然而,這種培養(yǎng)基的選擇性和特異性主要是針對沙門氏菌屬設(shè)計的,因此在其他類型的細(xì)菌培養(yǎng)中的應(yīng)用可能受到限制。在實際應(yīng)用中,連四硫酸鹽肉湯培養(yǎng)基通常用于從糞便、污水等樣品中富集沙門氏菌,以便于后續(xù)的分離和鑒定。它的使用需要嚴(yán)格按照實驗室標(biāo)準(zhǔn)操作程序進(jìn)行,以確保結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。根據(jù)搜索結(jié)果,連四硫酸鹽肉湯培養(yǎng)基的基礎(chǔ)配方通常包含胰酪蛋白胨、胃酶消化動物組織、碳酸鈣、膽鹽、硫代硫酸鈉等成分,這些成分共同作用以實現(xiàn)對沙門氏菌的選擇性富集。具體的配方和制備方法可能會根據(jù)不同的生產(chǎn)廠家和產(chǎn)品有所差異。在使用前,應(yīng)仔細(xì)閱讀產(chǎn)品說明書,以確保正確配制和使用培養(yǎng)基。NAC瓊脂培養(yǎng)皿具有較高的選擇性,能夠有效地抑制不同種類的微生物,有助于分離目標(biāo)微生物。
葉酸測定培養(yǎng)基是一種專門用于測定食品中葉酸含量的微生物培養(yǎng)基,具有以下特點:1.**營養(yǎng)成分**:該培養(yǎng)基包含酪蛋白氨基酸和葡萄糖作為氮源和碳源,乙酸鈉作為選擇劑和能量物質(zhì),以及氯化鈉、硫酸錳等鹽離子和多種維生素成分,為鼠李糖乳桿菌(Lactobacillusrhamnosus)等微生物提供所需的生長因子。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值調(diào)節(jié)至6.8±0.2,以適應(yīng)特定微生物的生長需求。3.**用途**:主要用于食品中葉酸的微生物測定,如GB5009.211-2022《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中葉酸的測定》中所述。4.**制備方法**:通常將干粉培養(yǎng)基與蒸餾水或去離子水混合,攪拌加熱煮沸至完全溶解,分裝試管中,每管5ml,加入標(biāo)準(zhǔn)品或測試樣品,用無菌蒸餾水或去離子水調(diào)整體積至10ml,121℃高壓滅菌5分鐘。5.**質(zhì)量控制**:使用特定的質(zhì)控菌株(如鼠李糖乳桿菌ATCC7469)接種待測試培養(yǎng)基,在36±1℃下培養(yǎng)20-40小時,觀察生長情況,如肉湯混濁和試管呈梯度渾濁。6.**儲存條件**:應(yīng)在避光、干燥處儲存,未開封保質(zhì)期通常為三年。7.**注意事項**:在配制和使用過程中,應(yīng)遵循無菌操作,避免污染,確保水的潔凈程度,因為水中的葉酸殘留或容器的污染直接影響試驗結(jié)果。改良后的Letheen瓊脂培養(yǎng)基不僅限于傳統(tǒng)的應(yīng)用,還可能拓展到食品微生物學(xué)、環(huán)境微生物學(xué)等領(lǐng)域。氣單胞菌鑒別瓊脂培養(yǎng)皿
使用VRBA培養(yǎng)皿時,通常將待測樣品涂布在培養(yǎng)皿表面,然后進(jìn)行培養(yǎng),觀察并鑒定產(chǎn)生的菌落。ISP Medium 5預(yù)裝培養(yǎng)皿
膽鹽硫乳瓊脂培養(yǎng)基(DHL)是一種用于選擇性分離培養(yǎng)腸道致病菌,特別是沙門氏菌和志賀氏菌的培養(yǎng)基。以下是DHL培養(yǎng)基的一些主要特點:1.**用途**:主要用于腸道致病菌的選擇性分離培養(yǎng),特別是沙門氏菌和志賀氏菌。2.**成分**:包含蛋白胨、牛肉浸粉、乳糖、蔗糖、去氧膽酸鈉、硫代硫酸鈉、檸檬酸鈉、檸檬酸鐵銨、中性紅和瓊脂,pH值控制在7.2±0.1(25℃)。3.**檢驗原理**:去氧膽酸鈉和檸檬酸鈉抑制革蘭氏陽性菌及大多數(shù)大腸菌群和變形桿菌,但不影響沙門氏菌的生長;硫代硫酸鈉和檸檬酸鐵銨用于檢測硫化氫產(chǎn)生,使菌落中心呈黑色;中性紅作為pH指示劑,發(fā)酵糖產(chǎn)酸的菌落呈紅色,不發(fā)酵糖的菌落為無色。4.**用法**:稱取65.2g培養(yǎng)基,加熱溶解在1000ml蒸餾水中,待冷至60℃時傾入無菌平皿,無需高壓滅菌。5.**質(zhì)量控制**:使用質(zhì)控菌株進(jìn)行微生物靈敏度試驗,例如鼠傷寒沙門氏菌ATCC14028和福氏志賀氏菌CMCC(B)51572,觀察其生長率和特異性反應(yīng)。6.**儲存條件**:貯存于避光、干燥處,用后立即旋緊瓶蓋,保質(zhì)期通常為三年。ISP Medium 5預(yù)裝培養(yǎng)皿