酵母浸粉葡萄糖瓊脂(YPDA)是一種常用的微生物培養(yǎng)基,尤其是在酵母菌的培養(yǎng)中。以下是它的一些主要特點:1.**成分**:YPDA的主要成分包括酵母浸粉、蛋白胨(或胰化胨)、葡萄糖和瓊脂。具體配方為1%酵母浸粉、2%蛋白胨、2%葡萄糖,若制固體培養(yǎng)基,加入2%瓊脂粉。2.**pH值**:YPDA的pH值通常調(diào)節(jié)在6.0±0.2(25℃)。3.**滅菌處理**:制備好的培養(yǎng)基需要進行121℃高壓滅菌15分鐘。葡萄糖溶液滅菌后加入,以避免高溫下可能發(fā)生的化學(xué)反應(yīng)導(dǎo)致培養(yǎng)基成分變化。4.**用途**:YPDA主要用于酵母菌的培養(yǎng),也用于藥品和生物制品中含王漿和蜂蜜的合劑酵母菌數(shù)測定。5.**配制方法**:首先溶解10g酵母浸粉和20g蛋白胨于900ml水中,如制平板加入20g瓊脂粉,然后進行高壓滅菌。滅菌后加入100ml20g葡萄糖溶液。6.**儲存條件**:液體YPDA培養(yǎng)基可常溫保存;瓊脂YPDA平板在4℃可保存幾個月。7.**微生物生長特征**:不同細(xì)菌在酵母浸粉葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基上的生長特征不同,例如酵母菌形成白色凸起光滑菌落,白色念珠菌也形成白色凸起光滑菌落,而黑曲霉菌則有黑色孢子。使用VRBA培養(yǎng)皿時,通常將待測樣品涂布在培養(yǎng)皿表面,然后進行培養(yǎng),觀察并鑒定產(chǎn)生的菌落。SDA預(yù)裝培養(yǎng)皿
牛津瓊脂(OXA)基礎(chǔ)的pH值對李斯特氏菌的生長有影響。李斯特氏菌的適生長pH值為7.0±0.2(25℃),這與牛津瓊脂(OXA)基礎(chǔ)的pH值相匹配。在這個pH值下,李斯特氏菌能夠良好地生長并表現(xiàn)出其特有的生物學(xué)特性,如β-溶血和七葉苷的水解。pH值對微生物生長至關(guān)重要,因為它可以影響:1.**酶活性**:許多微生物的代謝酶在特定的pH值范圍內(nèi)活性高。2.**細(xì)胞膜功能**:pH值的變化可能會干擾細(xì)胞膜的完整性和功能,影響營養(yǎng)物質(zhì)的吸收和廢物的排出。3.**代謝途徑**:pH值的變化可能會改變微生物的代謝途徑,從而影響其生長和繁殖。牛津瓊脂(OXA)基礎(chǔ)中的pH值是通過添加特殊蛋白胨和可溶性淀粉等成分來維持的,這些成分不僅提供碳氮源、維生素和生長因子,還有助于維持培養(yǎng)基的pH值。如果pH值偏離了范圍,可能會抑制李斯特氏菌的生長,或者導(dǎo)致其他非目標(biāo)微生物過度生長,影響結(jié)果的準(zhǔn)確性。因此,為了確保牛津瓊脂(OXA)基礎(chǔ)能夠準(zhǔn)確地分離和培養(yǎng)李斯特氏菌,實驗室人員需要仔細(xì)控制和監(jiān)測培養(yǎng)基的pH值。25%甘油硝酸鹽瓊脂預(yù)裝培養(yǎng)皿EMB培養(yǎng)基成為鑒定腸道細(xì)菌的一種常用工具,特別是在食品衛(wèi)生和臨床微生物學(xué)方面。
TGY肉湯培養(yǎng)基(TryptoneGlucoseYeastBrothMedium)是一種用于微生物培養(yǎng)的培養(yǎng)基,特別適合于芽孢菌的培養(yǎng)。以下是它的一些主要特點和用途:1.**配方成分**:TGY肉湯培養(yǎng)基的主要成分包括胰蛋白胨(或胰酪蛋白胨)、酵母浸粉、葡萄糖和瓊脂。胰蛋白胨和酵母浸粉提供氮源、維生素和礦物質(zhì),葡萄糖作為碳源和能源,瓊脂用于固化培養(yǎng)基。2.**pH值**:該培養(yǎng)基的pH值通常控制在7.0至7.5之間,為微生物提供適宜的生長環(huán)境。3.**用途**:TGY肉湯培養(yǎng)基主要用于細(xì)菌的培養(yǎng),特別是對于需要營養(yǎng)豐富環(huán)境的細(xì)菌,如芽孢桿菌屬的細(xì)菌。它也適用于細(xì)菌總數(shù)的測定和微生物的增菌培養(yǎng)。4.**配制方法**:通常需要稱取一定量的培養(yǎng)基粉末,加入蒸餾水或去離子水中,加熱煮沸至完全溶解,然后進行高壓滅菌。滅菌后,冷卻至適當(dāng)溫度,分裝于無菌容器中備用。5.**質(zhì)量控制**:通過接種質(zhì)控菌株,如大腸埃希氏菌、金黃色葡萄球菌和枯草芽孢桿菌等,來驗證培養(yǎng)基的性能。這些菌株在TGY肉湯培養(yǎng)基上應(yīng)表現(xiàn)出良好的生長特性。6.**儲存條件**:干燥培養(yǎng)基應(yīng)放置于陰暗干燥處,室溫保存。制備好的培養(yǎng)基應(yīng)避免光線直接照射,并保存于2-8℃。
疊氮鈉血瓊脂基礎(chǔ)(AzideBloodAgarBase)是一種選擇性培養(yǎng)基,主要用于從糞便、污水和其他樣本中分離和檢測鏈球菌和葡萄球菌。以下是它的一些特點和配制方法:**特點**:1.**成分**:含有胰蛋白胨、肉浸粉、氯化鈉、疊氮鈉和瓊脂等成分,其中疊氮鈉作為選擇性抑制劑,對大多數(shù)革蘭氏陰性菌具有抑制作用,但允許某些革蘭氏陽性菌如鏈球菌和葡萄球菌的生長。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值控制在7.2±0.2(25℃),為細(xì)菌提供適宜的生長環(huán)境。3.**應(yīng)用**:除了用于分離培養(yǎng)鏈球菌和葡萄球菌,疊氮鈉血瓊脂基礎(chǔ)還可用于測定溶血反應(yīng)。4.**溶血反應(yīng)**:在該培養(yǎng)基上,可以觀察到α溶血(培養(yǎng)基變綠)、β溶血(菌落周圍培養(yǎng)基變透明)和γ溶血(培養(yǎng)基無變化)。**配制方法**:1.稱取33.2g培養(yǎng)基粉末,加入1000mL蒸餾水或去離子水中。2.加熱煮沸至完全溶解。3.121℃高壓滅菌15分鐘。4.冷卻至50℃左右,加入50mL無菌羊血,混勻后倒入無菌培養(yǎng)皿中。**注意事項**:-避免攝入、吸入、皮膚接觸疊氮鈉,配制時應(yīng)在通風(fēng)櫥中進行,并佩戴適當(dāng)?shù)膫€人防護裝備。-培養(yǎng)基中含有的疊氮鈉具有劇毒,應(yīng)妥善處理和保存。改良Letheen瓊脂培養(yǎng)基的配方根據(jù)具體的應(yīng)用需求可能會有所不同。
酚紅葡萄糖肉湯(PhenolRedGlucoseBroth)是一種常用的微生物學(xué)培養(yǎng)基,主要用于鑒定細(xì)菌是否具有發(fā)酵葡萄糖的能力。以下是它的一些主要特點:1.**成分**:酚紅葡萄糖肉湯的配方包含月示胨(或稱為蛋白胨)、牛肉浸粉、氯化鈉、葡萄糖和酚紅。其中,月示胨和牛肉浸粉提供氮源、維生素和生長因子;葡萄糖作為可發(fā)酵的糖類;氯化鈉維持滲透壓;酚紅作為pH指示劑。2.**pH值**:該培養(yǎng)基的pH值通常調(diào)節(jié)在7.4±0.1(25℃)。3.**滅菌處理**:制備好的培養(yǎng)基需要進行121℃高壓滅菌10-15分鐘。4.**使用方法**:稱取培養(yǎng)基粉末,溶解于蒸餾水中,分裝試管,每管3ml。5.**質(zhì)量控制**:接種蠟樣芽孢桿菌后,在厭氧條件下35℃培養(yǎng)24小時,培養(yǎng)基由紅色變?yōu)辄S色,表明細(xì)菌發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸。6.**用途**:酚紅葡萄糖肉湯用于蠟樣芽孢桿菌葡萄糖分解試驗(SN標(biāo)準(zhǔn)),也用于檢測大腸菌群。7.**結(jié)果觀察**:如果培養(yǎng)基顏色由紅色變?yōu)辄S色,說明細(xì)菌發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸;如果培養(yǎng)基顏色不變或紅色加深,說明該微生物葡萄糖發(fā)酵陰性。8.**儲存條件**:避光,密封,陰涼干燥處保存。"去氧膽酸鹽瓊脂培養(yǎng)皿"(Deoxycholate Agar Plate)是一種用于微生物學(xué)實驗室中細(xì)菌分離和鑒定的培養(yǎng)基。三糖鐵瓊脂(TSI)培養(yǎng)皿
VRBA也被用于監(jiān)測食品和水的衛(wèi)生質(zhì)量,以及在臨床微生物學(xué)實驗室中進行一些腸道細(xì)菌的鑒定工作。SDA預(yù)裝培養(yǎng)皿
溶菌酶營養(yǎng)肉湯基礎(chǔ)是一種用于微生物學(xué)研究的培養(yǎng)基,特別是在鑒定某些細(xì)菌對溶菌酶的敏感性方面。以下是它的一些主要特點:1.**成分**:溶菌酶營養(yǎng)肉湯基礎(chǔ)的主要成分包括牛肉浸粉和蛋白胨,這些成分為細(xì)菌的生長提供碳源、氮源、維生素和生長因子。此外,還需要添加0.1%的溶菌酶溶液,溶菌酶是一種能夠水解細(xì)菌細(xì)胞壁的酶,主要用于檢測細(xì)菌對溶菌酶的耐受性。2.**pH值**:該培養(yǎng)基的pH值通常調(diào)節(jié)在6.8±0.1(25℃),以保證細(xì)菌在比較好pH環(huán)境下生長。3.**滅菌處理**:制備好的培養(yǎng)基需要進行121℃高壓滅菌15分鐘,以確保無菌。4.**使用方法**:稱取培養(yǎng)基粉末,溶解于蒸餾水中,分裝于燒瓶中,每瓶99ml,高壓滅菌后冷卻至50℃左右時,每瓶中加入0.1%溶菌酶溶液1ml,混勻后分裝無菌試管,每管2.5ml,備用。5.**用途**:溶菌酶營養(yǎng)肉湯基礎(chǔ)主要用于蠟樣芽孢桿菌的溶菌酶試驗,如GB4789.14-2014標(biāo)準(zhǔn)所述。它可以用來鑒定細(xì)菌是否能夠在溶菌酶存在的情況下生長,從而幫助鑒別不同的細(xì)菌種類。6.**添加劑**:每瓶培養(yǎng)基需配套添加0.1%溶菌酶溶液使用,每支添加于99mL溶菌酶營養(yǎng)肉湯中。SDA預(yù)裝培養(yǎng)皿