疊氮鈉血瓊脂基礎(chǔ)(AzideBloodAgarBase)是一種選擇性培養(yǎng)基,主要用于從糞便、污水和其他樣本中分離和檢測(cè)鏈球菌和葡萄球菌。以下是它的一些特點(diǎn)和配制方法:**特點(diǎn)**:1.**成分**:含有胰蛋白胨、肉浸粉、氯化鈉、疊氮鈉和瓊脂等成分,其中疊氮鈉作為選擇性抑制劑,對(duì)大多數(shù)革蘭氏陰性菌具有抑制作用,但允許某些革蘭氏陽(yáng)性菌如鏈球菌和葡萄球菌的生長(zhǎng)。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值控制在7.2±0.2(25℃),為細(xì)菌提供適宜的生長(zhǎng)環(huán)境。3.**應(yīng)用**:除了用于分離培養(yǎng)鏈球菌和葡萄球菌,疊氮鈉血瓊脂基礎(chǔ)還可用于測(cè)定溶血反應(yīng)。4.**溶血反應(yīng)**:在該培養(yǎng)基上,可以觀察到α溶血(培養(yǎng)基變綠)、β溶血(菌落周圍培養(yǎng)基變透明)和γ溶血(培養(yǎng)基無(wú)變化)。**配制方法**:1.稱取33.2g培養(yǎng)基粉末,加入1000mL蒸餾水或去離子水中。2.加熱煮沸至完全溶解。3.121℃高壓滅菌15分鐘。4.冷卻至50℃左右,加入50mL無(wú)菌羊血,混勻后倒入無(wú)菌培養(yǎng)皿中。**注意事項(xiàng)**:-避免攝入、吸入、皮膚接觸疊氮鈉,配制時(shí)應(yīng)在通風(fēng)櫥中進(jìn)行,并佩戴適當(dāng)?shù)膫€(gè)人防護(hù)裝備。-培養(yǎng)基中含有的疊氮鈉具有劇毒,應(yīng)妥善處理和保存。去氧膽酸鹽瓊脂這種瓊脂培養(yǎng)基在檢測(cè)大腸桿菌等腸道革蘭氏陰性菌方面具有一定的選擇性。溴甲酚紫瓊脂(糖發(fā)酵)培養(yǎng)皿
使用TCBS瓊脂進(jìn)行細(xì)菌分離實(shí)驗(yàn)的步驟如下:1.**準(zhǔn)備工作**:-確保實(shí)驗(yàn)室無(wú)菌操作條件,穿戴適當(dāng)?shù)膶?shí)驗(yàn)服和手套。-準(zhǔn)備無(wú)菌的接種環(huán)、涂布器、無(wú)菌吸管和移液器等工具。2.**配制培養(yǎng)基**:-按照培養(yǎng)基包裝上的說(shuō)明,稱取適量的TCBS瓊脂粉末。-將稱取的TCBS瓊脂粉末加入到適量的蒸餾水中,通常為100mL。-將混合物加熱至沸騰,以確保瓊脂完全溶解。3.**冷卻和傾注平板**:-將溶解好的培養(yǎng)基冷卻至50℃左右(避免過(guò)熱,以免殺死細(xì)菌),此時(shí)瓊脂應(yīng)該仍然是液體狀態(tài)。-將冷卻的培養(yǎng)基倒入無(wú)菌的培養(yǎng)皿中,一般傾注量為15-20mL/平皿。-等待瓊脂凝固,形成固體培養(yǎng)基平板。4.**接種樣品**:-使用無(wú)菌操作,將待檢測(cè)的樣品涂布或劃線接種到TCBS瓊脂平板上。-可以使用稀釋涂布法、螺旋接種法或其他適當(dāng)?shù)慕臃N方法。5.**培養(yǎng)**:-將接種后的平板倒置,放入恒溫培養(yǎng)箱中。-根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求,通常在36±1℃下培養(yǎng)18-24小時(shí)。6.**觀察和選擇菌落**:-培養(yǎng)結(jié)束后,觀察平板上的生長(zhǎng)情況,記錄不同類型菌落的特征。-選擇性地挑選出特定的菌落,如藍(lán)綠色或黃色菌落,這些可能是目標(biāo)弧菌。
酵母浸粉葡萄糖瓊脂(YPDA)是一種常用的微生物培養(yǎng)基,尤其是在酵母菌的培養(yǎng)中。以下是它的一些主要特點(diǎn):1.**成分**:YPDA的主要成分包括酵母浸粉、蛋白胨(或胰化胨)、葡萄糖和瓊脂。具體配方為1%酵母浸粉、2%蛋白胨、2%葡萄糖,若制固體培養(yǎng)基,加入2%瓊脂粉。2.**pH值**:YPDA的pH值通常調(diào)節(jié)在6.0±0.2(25℃)。3.**滅菌處理**:制備好的培養(yǎng)基需要進(jìn)行121℃高壓滅菌15分鐘。葡萄糖溶液滅菌后加入,以避免高溫下可能發(fā)生的化學(xué)反應(yīng)導(dǎo)致培養(yǎng)基成分變化。4.**用途**:YPDA主要用于酵母菌的培養(yǎng),也用于藥品和生物制品中含王漿和蜂蜜的合劑酵母菌數(shù)測(cè)定。5.**配制方法**:首先溶解10g酵母浸粉和20g蛋白胨于900ml水中,如制平板加入20g瓊脂粉,然后進(jìn)行高壓滅菌。滅菌后加入100ml20g葡萄糖溶液。6.**儲(chǔ)存條件**:液體YPDA培養(yǎng)基可常溫保存;瓊脂YPDA平板在4℃可保存幾個(gè)月。7.**微生物生長(zhǎng)特征**:不同細(xì)菌在酵母浸粉葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)特征不同,例如酵母菌形成白色凸起光滑菌落,白色念珠菌也形成白色凸起光滑菌落,而黑曲霉菌則有黑色孢子。
PALCAM瓊脂基礎(chǔ)是一種專門設(shè)計(jì)用于分離和培養(yǎng)單核細(xì)胞增生李斯特氏菌(Listeriamonocytogenes)的選擇性培養(yǎng)基。除了李斯特氏菌,它也可以用來(lái)分離其他類型的細(xì)菌,盡管其選擇性成分主要針對(duì)李斯特氏菌。**特點(diǎn)**:1.**成分**:PALCAM瓊脂基礎(chǔ)包含酪蛋白胰酶消化物、心胰酶消化物、肉胃酶消化物、玉米淀粉、酵母浸膏、甘露醇、七葉苷、檸檬酸鐵銨、葡萄糖、氯化鋰、瓊脂和酚紅等成分。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值控制在7.2±0.2(25℃),為細(xì)菌提供適宜的生長(zhǎng)環(huán)境。3.**選擇性**:氯化鋰和抗生物質(zhì)添加劑(如鹽酸吖啶黃素、硫酸多粘菌素B和頭孢他啶)能夠抑制革蘭氏陰性菌和大多數(shù)革蘭氏陽(yáng)性菌,特別是非李斯特氏菌的生長(zhǎng)。4.**應(yīng)用**:主要用于食品、水和污水樣本中單核細(xì)胞增生李斯特氏菌的選擇性分離培養(yǎng)。5.**結(jié)果觀察**:李斯特氏菌在PALCAM瓊脂上生長(zhǎng)時(shí),會(huì)水解七葉苷生成黑色的6,7-二羥基香豆素,形成灰綠色菌落,中心凹陷,周圍有黑色環(huán)。盡管PALCAM瓊脂基礎(chǔ)主要用于李斯特氏菌的分離,但某些非李斯特氏菌,如葡萄球菌和腸球菌等,偶爾也能在該培養(yǎng)基上生長(zhǎng),利用甘露醇產(chǎn)酸使菌落和其周圍的培養(yǎng)基呈黃色。
葡萄糖肉湯培養(yǎng)基(DextroseBroth)是一種常用的微生物培養(yǎng)基,它主要含有蛋白胨、牛肉膏粉、氯化鈉和葡萄糖等成分。這種培養(yǎng)基的pH值通常控制在7.3±0.2(25℃),為細(xì)菌提供適宜的生長(zhǎng)環(huán)境。**特點(diǎn)介紹**:1.**營(yíng)養(yǎng)成分**:葡萄糖肉湯培養(yǎng)基含有的蛋白胨和牛肉膏粉提供氮源、維生素和生長(zhǎng)因子,氯化鈉維持滲透壓,而葡萄糖則提供碳源。2.**應(yīng)用范圍**:它適用于營(yíng)養(yǎng)要求高的細(xì)菌培養(yǎng),特別是用于一次性使用衛(wèi)生用品中溶血性鏈球菌的檢測(cè)和腸桿菌科細(xì)菌的葡萄糖產(chǎn)氣試驗(yàn)。3.**制備方法**:一般操作是稱取一定量的培養(yǎng)基粉末,加入到一定量的蒸餾水或去離子水中,加熱攪拌煮沸至完全溶解,然后進(jìn)行高壓滅菌。4.**質(zhì)量控制**:通過(guò)使用特定的質(zhì)控菌株進(jìn)行測(cè)試,可以確保培養(yǎng)基支持目標(biāo)菌株的生長(zhǎng)。例如,乙型溶血性鏈球菌ATCC21059在該培養(yǎng)基中應(yīng)表現(xiàn)出良好的生長(zhǎng),而大腸埃希氏菌ATCC25922則用于測(cè)試培養(yǎng)基的特異性。葡萄糖肉湯培養(yǎng)基因其營(yíng)養(yǎng)均衡和制備簡(jiǎn)單,被用于微生物實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行細(xì)菌的分離、鑒定和培養(yǎng)研究。CASO AGAR+20g/L尿素是一種用于巴氏芽孢桿菌的培養(yǎng)基,其成分包括酪蛋白胨、氯化鈉和瓊脂,pH值為7.3 。R2A平板
PYG培養(yǎng)基的干粉應(yīng)在避光、干燥處保存,未開(kāi)封的保質(zhì)期通常為三年。使用后應(yīng)立即旋緊瓶蓋,避免吸潮結(jié)塊 。溴甲酚紫瓊脂(糖發(fā)酵)培養(yǎng)皿
蠟狀芽孢桿菌瓊脂基礎(chǔ)(TSSB)是一種用于分離和培養(yǎng)蠟樣芽孢桿菌(Bacilluscereus)的培養(yǎng)基。以下是它的一些主要特點(diǎn):1.**成分**:蠟狀芽孢桿菌瓊脂基礎(chǔ)的配方包含胰酪蛋白胨、牛肉浸粉、D-甘露醇、氯化鈉、苯酚紅和瓊脂等成分。其中,胰酪蛋白胨和牛肉浸粉提供碳源和氮源,D-甘露醇作為可發(fā)酵的糖,氯化鈉維持滲透壓,苯酚紅作為pH指示劑,瓊脂作為凝固劑。2.**pH值**:該培養(yǎng)基的pH值通常調(diào)節(jié)在7.2±0.2(25℃)。3.**滅菌處理**:制備好的培養(yǎng)基需要進(jìn)行121℃高壓滅菌15分鐘。4.**添加劑**:每瓶需配套添加多粘菌素B和50%卵黃乳液使用,每100ml蠟樣芽孢桿菌選擇性瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ)中添加1支多粘菌素B和2支50%卵黃乳液。5.**用法**:稱取本品43.0g加熱溶解于1000ml蒸餾水中,分裝每瓶100ml,121℃高壓滅菌15分鐘,冷至50℃左右時(shí),每瓶加入10ml50%的無(wú)菌卵黃乳液和多粘菌素B10000IU混勻,傾入無(wú)菌平皿,備用。6.**菌落特征**:蠟樣芽孢桿菌在TSSB上生長(zhǎng)時(shí),菌落通常為微粉紅色,周圍有淡粉紅色沉淀環(huán),這有助于識(shí)別蠟樣芽孢桿菌。7.**質(zhì)量控制**:進(jìn)行微生物靈敏度試驗(yàn)時(shí),按標(biāo)簽用法制備培養(yǎng)基,接種質(zhì)控菌株,放置36±1℃需氧培養(yǎng)24-48小時(shí)。溴甲酚紫瓊脂(糖發(fā)酵)培養(yǎng)皿