TthDNAPolymerase(5U/μL)在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中的應(yīng)用非常廣,主要包括以下幾個(gè)方面:1.**常規(guī)PCR擴(kuò)增**:TthDNAPolymerase能夠在74°C下進(jìn)行DNA復(fù)制,具有5′-3′DNA聚合酶活性和5′-3′核酸外切酶活性,適用于常規(guī)PCR反應(yīng),可以高效地?cái)U(kuò)增目標(biāo)DNA片段。2.**逆轉(zhuǎn)錄PCR(RT-PCR)**:在Mn2+存在的條件下,TthDNAPolymerase表現(xiàn)出較強(qiáng)的逆轉(zhuǎn)錄活性,可以用于一步法RT-PCR反應(yīng),有效地將RNA逆轉(zhuǎn)錄為cDNA,并進(jìn)行后續(xù)的PCR擴(kuò)增。這種特性使得TthDNAPolymerase在RNA樣本檢測(cè)中非常有用,尤其是在需要快速?gòu)腞NA得到cDNA的實(shí)驗(yàn)中。3.**熱啟動(dòng)PCR(HotStartPCR)**:TthDNAPolymerase可以用于熱啟動(dòng)PCR,這是一種提高PCR反應(yīng)特異性的技術(shù)。通過(guò)在低溫下封閉DNA聚合酶的活性部位,避免非特異性擴(kuò)增,然后在高溫下解除封閉,從而保證只產(chǎn)生特異性擴(kuò)增。4.**耐受PCR抑制成分**:TthDNAPolymerase對(duì)于血液、肌肉等生物組織中含有的肌紅蛋白等PCR抑制成分具有較強(qiáng)的耐受性,十分適用于粗樣本快速檢測(cè)。5.**高靈敏度檢測(cè)**:TthDNAPolymerase的PCR擴(kuò)增檢測(cè)靈敏度可達(dá)100pg,這使得它在需要高靈敏度檢測(cè)的實(shí)驗(yàn)中非常有用。
在醫(yī)藥領(lǐng)域,可能更關(guān)注酶對(duì)特定藥物分子的催化效率和選擇性。經(jīng)過(guò)一輪輪的篩選和進(jìn)化,終獲得性能提升的酶。江酶定向進(jìn)化技術(shù)服務(wù)在多個(gè)領(lǐng)域展現(xiàn)出了巨大的應(yīng)用價(jià)值。在工業(yè)生產(chǎn)中,它可以用于改進(jìn)現(xiàn)有酶制劑的性能,提高生產(chǎn)效率,降低生產(chǎn)成本。例如,在食品加工行業(yè),通過(guò)定向進(jìn)化技術(shù)獲得的新型淀粉酶能夠更高效地分解淀粉,改善食品的口感和品質(zhì);在化工領(lǐng)域,進(jìn)化后的酶可以用于更環(huán)保、更經(jīng)濟(jì)地合成化學(xué)產(chǎn)品。在醫(yī)藥研發(fā)方面,定向進(jìn)化的酶可以作為藥物合成的催化劑,提高藥物的純度和產(chǎn)量,同時(shí)也為新型藥物的研發(fā)提供了新的工具和思路。吉林漢遜酵母表達(dá)HPV VLP技術(shù)服務(wù)開(kāi)發(fā)類人膠原蛋白(HLC)開(kāi)始被用作涂層來(lái)修飾組織工程支架,后來(lái)加入交聯(lián)劑增加其機(jī)械強(qiáng)度后用作支架。
1stStrandcDNASynthesisKit(RNaseH-)withgDNAEraser是一種設(shè)計(jì)用于從RNA模板合成cDNA 鏈的試劑盒,它包含gDNAEraser以去除基因組DNA的污染,以及RNaseH-逆轉(zhuǎn)錄酶以減少RNA模板的降解。以下是該試劑盒的一些關(guān)鍵特點(diǎn)和應(yīng)用:1.**去除基因組DNA污染**:試劑盒中的gDNAEraser能有效去除RNA模板中的基因組DNA污染,確保后續(xù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。2.**RNaseH-逆轉(zhuǎn)錄酶**:該試劑盒使用的逆轉(zhuǎn)錄酶缺乏RNaseH活性,有助于保護(hù)RNA模板不被過(guò)早降解,從而可以合成更長(zhǎng)的cDNA鏈。3.**高溫穩(wěn)定性**:逆轉(zhuǎn)錄酶經(jīng)過(guò)基因工程改造,具有較高的熱穩(wěn)定性,可以在高溫條件下(如50°C)進(jìn)行cDNA 鏈的合成,有助于打開(kāi)RNA的二級(jí)結(jié)構(gòu)。4.**合成長(zhǎng)鏈cDNA的能力**:能夠合成長(zhǎng)達(dá)5kb甚至更長(zhǎng)的cDNA片段,適合于需要合成全長(zhǎng)或長(zhǎng)片段cDNA的實(shí)驗(yàn)。5.**包含所有必需組分**:試劑盒包含cDNA 鏈合成所需的所有試劑,如逆轉(zhuǎn)錄酶、RNase抑制劑、隨機(jī)引物、寡聚dT引物、dNTPs、緩沖液等。6.**適用于多種RNA模板**:可以用于從總RNA或mRNA模板合成cDNA 鏈,適用于實(shí)時(shí)熒光定量RT-qPCR、3'-和5'-RACE等實(shí)驗(yàn)。
dNTPs是去氧核苷酸三磷酸(DeoxyribonucleotideTriphosphates)的縮寫(xiě),它們是DNA合成和修復(fù)過(guò)程中必需的分子。在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中,dNTPs是構(gòu)建DNA鏈的基本單元,通常用于DNA聚合酶催化的DNA合成反應(yīng),如PCR(聚合酶鏈反應(yīng))、DNA測(cè)序和cDNA合成等。dNTPs由四種不同的分子組成,每一種都對(duì)應(yīng)于DNA中的一個(gè)堿基:1.**dATP**(去氧腺苷三磷酸):含有腺嘌呤堿基(A)。2.**dCTP**(去氧胞嘧啶三磷酸):含有胞嘧啶堿基(C)。3.**dGTP**(去氧鳥(niǎo)嘌呤三磷酸):含有鳥(niǎo)嘌呤堿基(G)。4.**dTTP**(去氧胸腺嘧啶三磷酸):含有胸腺嘧啶堿基(T)。在實(shí)驗(yàn)中,dNTPs通常以一組混合的形式提供,每種dNTP的濃度相等,以確保DNA聚合酶能夠高效且均勻地合成DNA鏈。dNTPs的濃度對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果有重要影響,例如在PCR中,dNTPs的濃度需要精確控制以避免非特異性擴(kuò)增。dNTPs的穩(wěn)定性和純度對(duì)實(shí)驗(yàn)的成功至關(guān)重要。在儲(chǔ)存和使用過(guò)程中,需要避免污染和降解,通常建議在-20℃下保存dNTPs,以保持其活性和穩(wěn)定性。此外,dNTPs的制備過(guò)程中可能會(huì)引入雜質(zhì),如二價(jià)陽(yáng)離子(如Mg2+)和未去氧的核苷酸(如NTPs),這些雜質(zhì)可能會(huì)影響DNA聚合酶的活性,因此在實(shí)驗(yàn)中使用高純度的dNTPs是非常重要的。使用如高效液相色譜(HPLC)、毛細(xì)管電泳(CE-SDS)、質(zhì)譜等技術(shù),評(píng)估蛋白的純度和均一性。
AdvanceFast1stStrandcDNASynthesisKit(RNaseH-)Plus是一款快速逆轉(zhuǎn)錄試劑盒,它基于Hifair®III1stStrandcDNASynthesisKit開(kāi)發(fā),專為PCR擴(kuò)增和RT-qPCR實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)。以下是該試劑盒的一些特點(diǎn):1.**快速逆轉(zhuǎn)錄**:與Hifair®III1stStrandcDNASynthesisKit相比,該試劑盒的反轉(zhuǎn)錄總時(shí)長(zhǎng)可以縮短至6分鐘以內(nèi),減少實(shí)驗(yàn)時(shí)間。2.**去除基因組DNA污染**:包含gDNADigesterMix,能夠有效去除RNA模板中殘留的基因組DNA污染,確保后續(xù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性。3.**提供多種引物**:試劑盒提供RandomPrimersN6和Oligo(dT)18兩種cDNA合成引物,用戶可以根據(jù)需要選擇使用,以滿足不同的實(shí)驗(yàn)需求。合成的單鏈cDNA產(chǎn)物可以直接用于后續(xù)的PCR或qPCR反應(yīng)。4.**高效率和高產(chǎn)量**:該試劑盒能夠提供穩(wěn)定的檢出率、特異性和產(chǎn)量保證。5.**適用性廣**:適用于從各種組織中提取的總RNA或mRNA為模板合成cDNA鏈,也適合于實(shí)時(shí)熒光定量RT-qPCR、3’-和5’-RACE等實(shí)驗(yàn)。6.**操作簡(jiǎn)便**:試劑盒為即用型預(yù)混液,包含除RNA模板以外的所有組分,極大地方便了實(shí)驗(yàn)人員使用。用精細(xì)化酶法提取技術(shù),通過(guò)控制酶解條件,有效去除膠原蛋白的端肽,降低免疫原性,同時(shí)保持膠原蛋白活性 。遼寧畢赤酵母表達(dá)病毒樣顆粒技術(shù)服務(wù)
通過(guò)將編碼病毒結(jié)構(gòu)蛋白的基因克隆到畢赤酵母的表達(dá)載體中,利用畢赤酵母的高效表達(dá)系統(tǒng)進(jìn)行生產(chǎn)。黑龍江酵母表達(dá)高通量篩選技術(shù)服務(wù)
TthDNAPolymerase(5U/μL)是一種從嗜熱菌_Thermusthermophilus_HB8中發(fā)現(xiàn)的耐熱DNA聚合酶。以下是其主要特點(diǎn)和應(yīng)用:1.**熱穩(wěn)定性**:TthDNAPolymerase在高溫下具有高穩(wěn)定性,其在74°C時(shí)可進(jìn)行DNA復(fù)制,在95°C的半衰期為20分鐘。這種熱穩(wěn)定性使得該酶在高溫下的PCR反應(yīng)中保持活性。2.**催化活性**:該酶在Mg2+存在的條件下具有5′-3′DNA聚合酶活性和5′-3′核酸外切酶活性,無(wú)3′-5′核酸外切酶活性。在Mn2+存在的條件下,該酶在55-70℃條件下表現(xiàn)出較強(qiáng)的逆轉(zhuǎn)錄活性,可用于一步法RT-PCR反應(yīng)。3.**高純度**:TthDNAPolymerase的蛋白純度(SDS-PAGE)≥95%,無(wú)核酸外切酶、DNase、RNase殘留。4.**PCR應(yīng)用**:適用于常規(guī)PCR和RT-PCR。在PCR擴(kuò)增中,TthDNAPolymerase能夠擴(kuò)增DNA片段,且具有5′→3′外切酶活性。在RT-PCR中,由于其內(nèi)在的Mn依賴性逆轉(zhuǎn)錄酶(RT)活性,可以有效地將靶標(biāo)RNA轉(zhuǎn)錄為cDNA。5.**靈敏度**:PCR擴(kuò)增檢測(cè)靈敏度可達(dá)100pg。6.**單位定義**:在70°C條件下,30分鐘內(nèi)催化10nmoldNTP摻入到TCA不溶性物質(zhì)所需的酶量為一個(gè)單位。7.**儲(chǔ)存條件**:干冰運(yùn)輸。-20℃以下儲(chǔ)存,有效期2年。黑龍江酵母表達(dá)高通量篩選技術(shù)服務(wù)
安徽HPV疫苗開(kāi)發(fā)服務(wù)技術(shù)服務(wù)研發(fā)
支持IND的GMP蛋白生產(chǎn)技術(shù)服務(wù)臨床前研究
安徽類人源膠原蛋白技術(shù)服務(wù)臨床前研究
上海重組人源膠原蛋白技術(shù)服務(wù)
河北人源膠原蛋白開(kāi)發(fā)技術(shù)服務(wù)
福建大腸桿菌表達(dá)技術(shù)服務(wù)臨床前研究
上海大腸桿菌表達(dá)技術(shù)服務(wù)研發(fā)
安徽重組類人源膠原蛋白技術(shù)服務(wù)研發(fā)
吉林酵母表達(dá)高通量篩選技術(shù)服務(wù)研發(fā)
浙江漢遜酵母表達(dá)人膠原蛋白技術(shù)服務(wù)臨床前研究