甘氨酸培養(yǎng)基是一種專門用于微生物培養(yǎng)的培養(yǎng)基,其特點(diǎn)主要包括:1.**培養(yǎng)基成分**:甘氨酸培養(yǎng)基通常包含布氏肉湯、瓊脂和甘氨酸。其中,甘氨酸是該培養(yǎng)基的關(guān)鍵成分,通常添加量為10.0克/升。2.**pH調(diào)節(jié)**:甘氨酸培養(yǎng)基的pH值一般調(diào)節(jié)在7.0±0.2(25℃)。3.**滅菌處理**:制備好的培養(yǎng)基需要進(jìn)行滅菌處理,通常采用121℃高壓滅菌15分鐘。4.**用途**:甘氨酸培養(yǎng)基主要用于彎曲桿菌甘氨酸耐受性試驗(yàn),如GB標(biāo)準(zhǔn)所規(guī)定的。它特別適用于空腸彎曲菌和大腸彎曲菌的分離和培養(yǎng),因?yàn)檫@些細(xì)菌對甘氨酸有耐受性。在微需氧環(huán)境下,于42℃培養(yǎng)48小時(shí)后,若培養(yǎng)基表面出現(xiàn)云霧狀現(xiàn)象,則為陽性結(jié)果。5.**培養(yǎng)特征**:在甘氨酸培養(yǎng)基上,空腸彎曲桿菌能夠產(chǎn)生灰色、濕潤、平鋪的菌落,并且可能帶有金色金屬光澤。6.**制備方法**:將甘氨酸培養(yǎng)基的粉末成分溶解在適量的蒸餾水中,加熱以幫助溶解,然后進(jìn)行滅菌處理。在冷卻至大約50°C時(shí),可以進(jìn)行倒平板或分裝試管。7.**儲存條件**:甘氨酸培養(yǎng)基通常需要在干燥、避光的條件下儲存,以保持其有效性。水瓊脂培養(yǎng)基的凝膠結(jié)構(gòu)在不同溫度下可能會發(fā)生變化,因此需要根據(jù)微生物的特性調(diào)控培養(yǎng)溫度。改良NBB瓊脂平板
芽孢桿菌培養(yǎng)基基礎(chǔ)是一種專為芽孢桿菌屬細(xì)菌設(shè)計(jì)的微生物培養(yǎng)基,具有以下特點(diǎn):1.**營養(yǎng)成分**:通常包含碳源、氮源以及促進(jìn)芽孢形成的必需微量元素。例如,葡萄糖作為碳源,硫酸銨或酵母提取物作為氮源。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值通??刂圃?.0±0.2(25℃),以保證細(xì)菌的良好生長。3.**配方**:一個(gè)典型的芽孢桿菌培養(yǎng)基配方可能包含葡萄糖、磷酸鈣、硫酸銨、氯化鉀、七水硫酸鎂、硫酸錳、硫酸亞鐵和酵母提取物等成分。4.**制備方法**:首先稱取培養(yǎng)基粉末,加熱溶解于蒸餾水中,分裝后進(jìn)行高壓滅菌。滅菌后,冷卻至適當(dāng)溫度,接種菌種,并在恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)一定時(shí)間。5.**應(yīng)用**:主要用于芽孢桿菌的平板計(jì)數(shù),可以用于檢測和分離芽孢桿菌,包括枯草芽孢桿菌、蠟樣芽孢桿菌等。6.**注意事項(xiàng)**:由于培養(yǎng)基中含有不溶性磷酸鈣,滅菌后可能會有白色沉淀,因此在倒平板前需要充分搖勻培養(yǎng)基,以確保磷酸鈣均勻分布。7.**質(zhì)量控制**:接種質(zhì)控菌株后,應(yīng)在36℃±1℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48-72小時(shí),以驗(yàn)證培養(yǎng)基的性能和菌株的生長情況。溴化十六烷基三甲銨瓊脂預(yù)裝培養(yǎng)皿小牛浸液瓊脂的pH值通常控制在7.4±0.2(25℃),這為微生物生長提供了適宜的酸堿環(huán)境 。
細(xì)菌固體分離培養(yǎng)基是用于分離和培養(yǎng)細(xì)菌的固體培養(yǎng)基,通常包含瓊脂作為凝固劑。這種培養(yǎng)基能夠?yàn)榧?xì)菌提供穩(wěn)定的生長環(huán)境,并有助于觀察微生物的菌落特征。以下是細(xì)菌固體分離培養(yǎng)基的一些關(guān)鍵特點(diǎn):1.**成分**:細(xì)菌固體分離培養(yǎng)基通常包含蛋白質(zhì)來源(如蛋白胨)、碳源(如葡萄糖)、無機(jī)鹽(如氯化鈉)和瓊脂等。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值對細(xì)菌的生長至關(guān)重要,通常需要調(diào)節(jié)至適宜的pH值,如7.3±0.1(25℃)。3.**滅菌**:培養(yǎng)基在制備過程中需要進(jìn)行高壓滅菌,通常是121℃滅菌15分鐘或115℃滅菌30分鐘。4.**用途**:主要用于細(xì)菌的分離、計(jì)數(shù)和鑒定。通過稀釋倒平板法、涂布平板法或平板劃線法等技術(shù),可以從混合的微生物群體中分離出單一的細(xì)菌菌落。5.**保存**:培養(yǎng)基通常在室溫、避光、干燥的條件下保存。6.**操作**:在無菌條件下操作,避免污染。使用時(shí),將培養(yǎng)基加熱至液態(tài),然后倒入無菌培養(yǎng)皿中,冷卻凝固后即可用于接種細(xì)菌。7.**菌落特征**:不同種類的細(xì)菌在固體培養(yǎng)基上形成的菌落具有特定的形態(tài)特征,如大小、形狀、顏色、邊緣等,這些特征可以用于細(xì)菌的鑒定。
CIN-1培養(yǎng)基基礎(chǔ)是一種用于分離小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌的選擇性培養(yǎng)基。其配方包含胰蛋白胨、酵母浸粉、甘露醇、氯化鈉、去氧膽酸鈉、硫酸鎂、瓊脂、Irgasan、中性紅、結(jié)晶紫和氯化鍶等成分,pH值約為7.5±0.1(25℃)。這種培養(yǎng)基通過其成分的選擇性作用,可以有效地促進(jìn)目標(biāo)菌的生長,同時(shí)抑制其他非目標(biāo)菌。**CIN-1培養(yǎng)基基礎(chǔ)的用途**:主要用于分離小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌(GB標(biāo)準(zhǔn))。**添加劑**:每瓶需配套添加CIN-1添加劑,每200mlCIN-1培養(yǎng)基基礎(chǔ)添加1支HB0269-2。**配制方法**:稱取58.0gCIN-1培養(yǎng)基基礎(chǔ),加熱溶解于1000ml蒸餾水中,分裝三角瓶,每瓶200ml,121℃高壓滅菌15分鐘,冷卻至50℃左右時(shí),加入一支過濾除菌的CIN-1添加劑(含頭孢菌素3mg,新生霉素0.5mg),混勻,傾入無菌平皿。**檢驗(yàn)原理**:胰蛋白胨和酵母浸粉提供菌體生長所需要的氮源、碳源和微量元素;甘露醇作為可發(fā)酵碳源;氯化鈉維持培養(yǎng)基體系滲透壓;硫酸鎂提供菌體生長的微量元素;去氧膽酸鈉和結(jié)晶紫能夠抑制革蘭氏陽性菌;中性紅作為酸堿指示劑;瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑。CAS培養(yǎng)基包含鉻天青S(CAS)、十六烷基三甲基溴化銨、鐵離子等成分,這些成分與微生物分泌的鐵載體反應(yīng)。
腦心浸出液肉湯(BHI/BHIB)是一種微生物培養(yǎng)基,特別適用于培養(yǎng)營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌。以下是BHI培養(yǎng)基的一些關(guān)鍵特點(diǎn):1.**配方組成**:-蛋白胨:10.0g-脫水小牛腦浸粉:12.5g-脫水牛心浸粉:5.0g-氯化鈉:5.0g-葡萄糖:2.0g-磷酸氫二鈉:2.5g-pH值:7.4±0.2(25℃)2.**配制方法**:-稱取38.5gBHI培養(yǎng)基粉末,加入1000ml蒸餾水。-加熱攪拌至完全溶解,通常在121℃下高壓滅菌15分鐘。3.**用途**:-用于培養(yǎng)各種苛養(yǎng)型致病微生物,如鏈球菌、腦膜炎球菌、肺炎球菌。-用于培養(yǎng)單增李斯特菌,可極大的增加李斯特菌培養(yǎng)時(shí)的OD值。-加入腹水后,可用于淋球菌的培養(yǎng)。-用于葡萄球菌的血漿凝固酶試驗(yàn)。-作為檢測培養(yǎng)基,用于檢測水、廢水、肉類和食品。-作為藥敏實(shí)驗(yàn)的接種用培養(yǎng)基。-可用來配制血液培養(yǎng)基。4.**培養(yǎng)條件**:-通常在36℃±1℃的條件下培養(yǎng)。5.**保存條件**:-2-8°C保存。6.**注意事項(xiàng)**:-避免吸入和皮膚接觸。-使用前請檢查平板內(nèi)是否干裂或染菌,若長菌請勿使用。-4°C儲存的平板出現(xiàn)冷凝水屬正常現(xiàn)象,請?jiān)跐崈舡h(huán)境下將水倒出后使用。-請?jiān)跐崈舡h(huán)境下操作,開封后請盡快使用,避免雜菌干擾。TSFA是一種通用的營養(yǎng)培養(yǎng)基,用于各種微生物的培養(yǎng),如細(xì)菌總數(shù)的測定,特別是適用于濾膜法細(xì)菌總數(shù)測定 。胰酪大豆蛋白胨瓊脂平板
海藻糖-脯氨酸培養(yǎng)基被推薦用于稀有放線菌的分離培養(yǎng)基,因?yàn)樗兄谔岣呦∮蟹啪€菌的出菌率 。改良NBB瓊脂平板
使用TCBS瓊脂進(jìn)行細(xì)菌分離實(shí)驗(yàn)的步驟如下:1.**準(zhǔn)備工作**:-確保實(shí)驗(yàn)室無菌操作條件,穿戴適當(dāng)?shù)膶?shí)驗(yàn)服和手套。-準(zhǔn)備無菌的接種環(huán)、涂布器、無菌吸管和移液器等工具。2.**配制培養(yǎng)基**:-按照培養(yǎng)基包裝上的說明,稱取適量的TCBS瓊脂粉末。-將稱取的TCBS瓊脂粉末加入到適量的蒸餾水中,通常為100mL。-將混合物加熱至沸騰,以確保瓊脂完全溶解。3.**冷卻和傾注平板**:-將溶解好的培養(yǎng)基冷卻至50℃左右(避免過熱,以免殺死細(xì)菌),此時(shí)瓊脂應(yīng)該仍然是液體狀態(tài)。-將冷卻的培養(yǎng)基倒入無菌的培養(yǎng)皿中,一般傾注量為15-20mL/平皿。-等待瓊脂凝固,形成固體培養(yǎng)基平板。4.**接種樣品**:-使用無菌操作,將待檢測的樣品涂布或劃線接種到TCBS瓊脂平板上。-可以使用稀釋涂布法、螺旋接種法或其他適當(dāng)?shù)慕臃N方法。5.**培養(yǎng)**:-將接種后的平板倒置,放入恒溫培養(yǎng)箱中。-根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求,通常在36±1℃下培養(yǎng)18-24小時(shí)。6.**觀察和選擇菌落**:-培養(yǎng)結(jié)束后,觀察平板上的生長情況,記錄不同類型菌落的特征。-選擇性地挑選出特定的菌落,如藍(lán)綠色或黃色菌落,這些可能是目標(biāo)弧菌。