彎曲桿菌瓊脂基礎(chǔ)是一種專門用于分離和培養(yǎng)彎曲桿菌屬(Campylobacter)細菌的培養(yǎng)基,尤其是空腸彎曲桿菌(Campylobacterjejuni)和大腸彎曲桿菌(Campylobactercoli)。以下是它的一些主要特點:1.**選擇性培養(yǎng)**:彎曲桿菌瓊脂基礎(chǔ)通常與特定的選擇性添加劑一起使用,如改良Karmali選擇性添加劑或彎曲桿菌選擇性添加劑,這些添加劑含有抗生物質(zhì),如萬古霉素和兩性霉素B,以抑制其他非目標微生物的生長,提高目標彎曲桿菌的分離率。2.**無血培養(yǎng)基**:某些類型的彎曲桿菌瓊脂基礎(chǔ)是無血的,這使得它在某些應(yīng)用中比需要添加血液的培養(yǎng)基更為方便和經(jīng)濟。無血培養(yǎng)基通常使用活性炭、硫酸亞鐵和酸鈉替代血液。3.**微需氧環(huán)境**:彎曲桿菌是微需氧菌,生長環(huán)境是含氧氣5%、二氧化碳10%、氮氣85%。因此,彎曲桿菌瓊脂基礎(chǔ)通常在微需氧條件下使用,這有助于彎曲桿菌的生長。4.**菌落特征**:在適宜的條件下,空腸彎曲桿菌在彎曲桿菌瓊脂基礎(chǔ)中生長,形成灰色、濕潤、平鋪的菌落,這些特征有助于識別彎曲桿菌。5.配方:彎曲桿菌瓊脂基礎(chǔ)的配方可能包含蛋白胨、酵母浸粉、胰酪蛋白胨、氯化鈉、瓊脂等,提供碳、氮源、維生素和生長因子。
營養(yǎng)瓊脂方瓶(羅氏瓶)通常是指營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基的一種包裝形式,適合實驗室進行微生物培養(yǎng)使用。營養(yǎng)瓊脂是一種基礎(chǔ)培養(yǎng)基,用于非苛養(yǎng)微生物的培養(yǎng),以及在生化或血清學(xué)測試前的質(zhì)量控制和純度檢查。以下是營養(yǎng)瓊脂的典型配方:1.**成分**:-蛋白胨:10.0g/L-牛肉膏粉:3.0g/L-氯化鈉:5.0g/L-瓊脂:15.0g/L-終pH值:7.3±0.2(25℃)2.**配制方法**:-稱取33g營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基粉末,加入1000mL蒸餾水或去離子水。-攪拌加熱煮沸至完全溶解。-分裝到方瓶(羅氏瓶)中,通常分裝量為100mL或500mL。-121℃高壓滅菌15分鐘。3.**使用方法**:-滅菌完成后,取出方瓶并冷卻至大約40-45°C。-如果需要富集,可在滅菌后加入血液或其他生物液體。-在無菌條件下,將培養(yǎng)基倒入無菌的培養(yǎng)皿中或作為液體培養(yǎng)基使用。-培養(yǎng)基凝固后,可將培養(yǎng)皿放置在熱空氣烤箱中,用較低溫度烘烤幾分鐘,以去除使用前培養(yǎng)皿上的任何水分。4.**儲存方法**:-粉末形式的培養(yǎng)基應(yīng)儲存在10至30°C之間,容器需緊密封閉。-制備好的培養(yǎng)基應(yīng)在20-30°C的環(huán)境中儲存。低限瓊脂培養(yǎng)皿巴氏芽孢桿菌的芽孢因其高抵抗力和在惡劣條件下存活的能力,在生物技術(shù)領(lǐng)域具有重要的應(yīng)用潛力。
使用TCBS瓊脂進行細菌分離實驗的步驟如下:1.**準備工作**:-確保實驗室無菌操作條件,穿戴適當?shù)膶嶒灧褪痔住?準備無菌的接種環(huán)、涂布器、無菌吸管和移液器等工具。2.**配制培養(yǎng)基**:-按照培養(yǎng)基包裝上的說明,稱取適量的TCBS瓊脂粉末。-將稱取的TCBS瓊脂粉末加入到適量的蒸餾水中,通常為100mL。-將混合物加熱至沸騰,以確保瓊脂完全溶解。3.**冷卻和傾注平板**:-將溶解好的培養(yǎng)基冷卻至50℃左右(避免過熱,以免殺死細菌),此時瓊脂應(yīng)該仍然是液體狀態(tài)。-將冷卻的培養(yǎng)基倒入無菌的培養(yǎng)皿中,一般傾注量為15-20mL/平皿。-等待瓊脂凝固,形成固體培養(yǎng)基平板。4.**接種樣品**:-使用無菌操作,將待檢測的樣品涂布或劃線接種到TCBS瓊脂平板上。-可以使用稀釋涂布法、螺旋接種法或其他適當?shù)慕臃N方法。5.**培養(yǎng)**:-將接種后的平板倒置,放入恒溫培養(yǎng)箱中。-根據(jù)實驗要求,通常在36±1℃下培養(yǎng)18-24小時。6.**觀察和選擇菌落**:-培養(yǎng)結(jié)束后,觀察平板上的生長情況,記錄不同類型菌落的特征。-選擇性地挑選出特定的菌落,如藍綠色或黃色菌落,這些可能是目標弧菌。
DTA培養(yǎng)基(葡萄糖胰蛋白胨瓊脂)是一種用于微生物培養(yǎng)的培養(yǎng)基,其特點和使用方法如下:1.**用途**:DTA培養(yǎng)基主要用于嗜熱菌芽孢(包括需氧芽孢總數(shù)、平酸芽孢和厭氧芽孢)的分離培養(yǎng)。2.**成分**:該培養(yǎng)基的成分通常包括胰酪蛋白胨、葡萄糖、瓊脂和溴甲酚紫。具體成分比例為胰酪蛋白胨10.0g/L、葡萄糖5.0g/L、瓊脂15.0g/L以及溴甲酚紫0.04g/L。3.**pH值**:pH值控制在6.7±0.1(25℃)。4.**檢驗原理**:胰酪蛋白胨提供碳氮源、維生素和生長因子;葡萄糖作為可發(fā)酵的糖,溴甲酚紫作為酸堿指示劑;瓊脂作為凝固劑。5.**配制方法**:稱取30.0gDTA培養(yǎng)基粉末,加熱溶解于1000ml蒸餾水中,然后在121℃下高壓滅菌15分鐘,備用。6.**使用方法**:在加熱滅菌前,培養(yǎng)基成分應(yīng)邊攪拌邊溶解于水中。滅菌時間通常要在121℃下保持15~20分鐘,這個時間從中心溫度達到121℃開始計算。7.**結(jié)果觀察**:嗜熱脂肪芽孢桿菌在DTA培養(yǎng)基上的生長特征為黃色菌落。8.**微生物靈敏度試驗**:按標簽用法制備培養(yǎng)基,接種質(zhì)控菌株,放置于55℃需氧培養(yǎng)48小時,以驗證培養(yǎng)基的性能。由于其營養(yǎng)成分的豐富性,不同類型的微生物在血瓊脂基礎(chǔ)2號上能夠迅速生長,并形成明顯的菌落。
乙基紫疊氮鈉肉湯(EthylVioletAzideBroth,EVA)是一種用于微生物培養(yǎng)的選擇性培養(yǎng)基,特別適合于鏈球菌的增菌培養(yǎng)。以下是它的一些特點和用法:**特點**:1.**成分**:含有酪蛋白胨、酵母浸粉、葡萄糖、氯化鈉、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉、疊氮鈉和乙基紫等成分。2.**pH值**:pH值控制在7.0±0.2(25℃),為細菌提供適宜的生長環(huán)境。3.**選擇性**:疊氮鈉可以抑制革蘭氏陰性細菌的生長,特別是對變形桿菌的抑制效果好。4.**應(yīng)用**:主要用于鏈球菌的增菌培養(yǎng),也可用于其他需氧菌和兼性厭氧菌的培養(yǎng)。**配制方法**:1.稱取35.8g培養(yǎng)基粉末,加入1000mL蒸餾水。2.加熱攪拌至完全溶解。3.分裝后,在121℃高壓下滅菌15分鐘。**質(zhì)量控制**:-制備好的培養(yǎng)基應(yīng)進行pH值、無菌性檢查和適用性檢查。-培養(yǎng)基的保存應(yīng)避光、密封,并在已驗證的條件下貯藏。**應(yīng)用**:-用于鏈球菌的分離培養(yǎng),通過觀察菌落的生長情況和特征進行鑒定。**注意事項**:-在配制和操作過程中,應(yīng)避免攝入、吸入、皮膚接觸,并在通風(fēng)櫥中進行,佩戴適當?shù)膫€人防護裝備。PK瓊脂培養(yǎng)基的制備通常包括將干燥的培養(yǎng)基粉末與適量的水混合,加熱至瓊脂完全溶解,然后分裝到培養(yǎng)皿中。2216E瓊脂預(yù)裝培養(yǎng)皿
卵磷脂和吐溫80的加入使得培養(yǎng)基能夠中和樣品中的防腐劑,這對于化妝品等含有防腐劑的樣品尤為重要。CC瓊脂預(yù)裝培養(yǎng)皿
改良亞硫酸鹽瓊脂(ModifiedSulfiteAgar)是一種用于微生物培養(yǎng)的培養(yǎng)基,具有以下特點:1.**用途**:主要用于食品中嗜熱菌芽孢(包括需氧芽孢總數(shù)、平酸芽孢和厭氧芽孢)的分離培養(yǎng)和計數(shù)。2.**成分**:通常包含蛋白胨、無水亞硫酸鈉和瓊脂。具體配方為每升培養(yǎng)基含蛋白胨10.0克、無水亞硫酸鈉1.0克、瓊脂20.0克。3.**配制方法**:稱取31.0g培養(yǎng)基粉末,加熱溶解于1000ml蒸餾水中,分裝試管,再于各試管內(nèi)加入適量清潔的混鐵粉或鐵屑,不調(diào)pH,121℃高壓滅菌20分鐘,備用。4.**微生物靈敏度試驗**:按標簽用法制備培養(yǎng)基,接種質(zhì)控菌株,放置于55℃厭氧培養(yǎng)48小時以驗證培養(yǎng)基的性能。5.**加熱滅菌**:在加熱滅菌前,培養(yǎng)基成分應(yīng)邊攪拌邊溶解于水中。滅菌時間通常要在121℃下保持15~20分鐘,從中心溫度達到121℃開始計算。6.**儲存條件**:未提供具體儲存條件,但一般培養(yǎng)基應(yīng)密封保存于2-25°C的環(huán)境中。7.**注意事項**:避免攝入、吸入、皮膚接觸,并確保在制備和使用過程中遵循適當?shù)陌踩胧8牧紒喠蛩猁}瓊脂因其特定的成分和用途,在食品衛(wèi)生檢驗、醫(yī)藥、水質(zhì)檢測等領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用。CC瓊脂預(yù)裝培養(yǎng)皿