酵母浸粉葡萄糖瓊脂(YPDA)是一種常用的微生物培養基,尤其是在酵母菌的培養中。以下是它的一些主要特點:1.**成分**:YPDA的主要成分包括酵母浸粉、蛋白胨(或胰化胨)、葡萄糖和瓊脂。具體配方為1%酵母浸粉、2%蛋白胨、2%葡萄糖,若制固體培養基,加入2%瓊脂粉。2.**pH值**:YPDA的pH值通常調節在6.0±0.2(25℃)。3.**滅菌處理**:制備好的培養基需要進行121℃高壓滅菌15分鐘。葡萄糖溶液滅菌后加入,以避免高溫下可能發生的化學反應導致培養基成分變化。4.**用途**:YPDA主要用于酵母菌的培養,也用于藥品和生物制品中含王漿和蜂蜜的合劑酵母菌數測定。5.**配制方法**:首先溶解10g酵母浸粉和20g蛋白胨于900ml水中,如制平板加入20g瓊脂粉,然后進行高壓滅菌。滅菌后加入100ml20g葡萄糖溶液。6.**儲存條件**:液體YPDA培養基可常溫保存;瓊脂YPDA平板在4℃可保存幾個月。7.**微生物生長特征**:不同細菌在酵母浸粉葡萄糖瓊脂培養基上的生長特征不同,例如酵母菌形成白色凸起光滑菌落,白色念珠菌也形成白色凸起光滑菌落,而黑曲霉菌則有黑色孢子。長雙歧桿菌和嬰兒雙歧桿菌在PYG培養基上的生長情況通常表現為圓形凸起,奶油色,邊緣整齊光滑的菌落 。改良TJA培養皿
SlantzandBartley培養基是一種專門設計用于分離和計數腸球菌的選擇性培養基,廣泛應用于水和食品樣本中的腸球菌檢測。以下是它的一些特點:1.**成分**:包含胰蛋白胨、酵母提取物、葡萄糖、磷酸二氫鉀、疊氮鈉和瓊脂等成分。其中,胰蛋白胨和酵母提取物提供細菌生長所需的營養物質,葡萄糖作為碳源,磷酸二氫鉀作為緩沖劑,疊氮鈉作為抑菌劑抑制革蘭氏陰性菌的生長,瓊脂作為凝固劑。2.**pH值**:培養基的pH值控制在7.2±0.2(25°C),為腸球菌提供適宜的生長環境。3.**選擇性**:疊氮鈉對革蘭氏陰性菌具有抑制作用,確保培養基的選擇性。4.**應用**:開始設計用于通過膜過濾技術檢測和計數腸球菌,但也證明作為直接涂布培養基同樣有效。5.**配制方法**:通常稱取41.5g培養基粉末,加入1升蒸餾水,加熱至沸騰以溶解瓊脂,高壓滅菌20分鐘。滅菌后冷卻至45-50°C,并分裝進培養皿。6.**質量控制**:通過特定的質控菌株進行測試,確保培養基支持目標菌株的生長。例如,腸球菌ATCC29212在該培養基上應表現出良好的生長,而大腸桿菌ATCC25922則應被抑制。7.**儲存條件**:未配制的培養基粉末應密封保存在15-30°C的陰涼干燥處。配制好的培養基應保存在2-8°C。改良TJA培養皿明膠的凝固點在28℃左右,受運輸過程的溫度及震蕩影響,出現培養基在管壁凝固形成不規則狀,此為正常現象。
營養瓊脂方瓶(羅氏瓶)通常是指營養瓊脂培養基的一種包裝形式,適合實驗室進行微生物培養使用。營養瓊脂是一種基礎培養基,用于非苛養微生物的培養,以及在生化或血清學測試前的質量控制和純度檢查。以下是營養瓊脂的典型配方:1.**成分**:-蛋白胨:10.0g/L-牛肉膏粉:3.0g/L-氯化鈉:5.0g/L-瓊脂:15.0g/L-終pH值:7.3±0.2(25℃)2.**配制方法**:-稱取33g營養瓊脂培養基粉末,加入1000mL蒸餾水或去離子水。-攪拌加熱煮沸至完全溶解。-分裝到方瓶(羅氏瓶)中,通常分裝量為100mL或500mL。-121℃高壓滅菌15分鐘。3.**使用方法**:-滅菌完成后,取出方瓶并冷卻至大約40-45°C。-如果需要富集,可在滅菌后加入血液或其他生物液體。-在無菌條件下,將培養基倒入無菌的培養皿中或作為液體培養基使用。-培養基凝固后,可將培養皿放置在熱空氣烤箱中,用較低溫度烘烤幾分鐘,以去除使用前培養皿上的任何水分。4.**儲存方法**:-粉末形式的培養基應儲存在10至30°C之間,容器需緊密封閉。-制備好的培養基應在20-30°C的環境中儲存。
四號瓊脂基礎(No.4AgarBase)是一種用于微生物培養的固體培養基,主要用于霍亂弧菌的選擇性分離培養。以下是它的一些關鍵特點和配制方法:1.**成分**:-蛋白胨:20.0g-牛肉膏粉:5.0g-氯化鈉:5.0g-無水亞硫酸鈉:3.0g-十二烷基硫酸鈉:0.5g-豬膽汁粉:5.0g-雷佛奴爾:0.03g-慶大霉素:500U-瓊脂:15.0g-pH值約為8.5±0.2(25℃)2.**用途**:用于霍亂弧菌的選擇性分離培養。3.**配制方法**:-稱取53.5g干粉,加入到1L蒸餾水或去離子水中。-加熱煮沸以幫助成分溶解。-冷卻至50-55℃時,每500mL培養基加入配套試劑1支(SR0080)(5mg亞碲酸鉀),搖勻立即傾注平皿。-待凝固后備用。4.**檢驗原理**:-蛋白胨、牛肉粉提供碳氮源、維生素和生長因子。-氯化鈉維持均衡的滲透壓。-亞硫酸鈉可刺激弧菌生長。-檸檬酸鈉、十二烷基硫酸鈉、牛膽粉、利凡諾、慶大霉素和亞碲酸鉀及較高的pH可抑制革蘭氏陽性菌和部分革蘭氏陰性雜菌。-霍亂弧菌對酸性環境比較敏感,因此該pH值可增強其生長。-瓊脂是培養基的凝固劑。BHI瓊脂能夠支持包括細菌、酵母和霉菌在內的多種微生物的生長,尤其適合培養營養苛求的細菌。
腦心浸出液肉湯(BHI/BHIB)是一種微生物培養基,特別適用于培養營養要求較高的細菌。以下是BHI培養基的一些關鍵特點:1.**配方組成**:-蛋白胨:10.0g-脫水小牛腦浸粉:12.5g-脫水牛心浸粉:5.0g-氯化鈉:5.0g-葡萄糖:2.0g-磷酸氫二鈉:2.5g-pH值:7.4±0.2(25℃)2.**配制方法**:-稱取38.5gBHI培養基粉末,加入1000ml蒸餾水。-加熱攪拌至完全溶解,通常在121℃下高壓滅菌15分鐘。3.**用途**:-用于培養各種苛養型致病微生物,如鏈球菌、腦膜炎球菌、肺炎球菌。-用于培養單增李斯特菌,可極大的增加李斯特菌培養時的OD值。-加入腹水后,可用于淋球菌的培養。-用于葡萄球菌的血漿凝固酶試驗。-作為檢測培養基,用于檢測水、廢水、肉類和食品。-作為藥敏實驗的接種用培養基。-可用來配制血液培養基。4.**培養條件**:-通常在36℃±1℃的條件下培養。5.**保存條件**:-2-8°C保存。6.**注意事項**:-避免吸入和皮膚接觸。-使用前請檢查平板內是否干裂或染菌,若長菌請勿使用。-4°C儲存的平板出現冷凝水屬正常現象,請在潔凈環境下將水倒出后使用。-請在潔凈環境下操作,開封后請盡快使用,避免雜菌干擾。CAS培養基的pH值通常控制在6.8±0.1(25℃),以保證微生物的生長和鐵載體的活性 。改良亮綠瓊脂平板
TSFA主要用于乳制品中嗜冷菌菌落總數和需氧芽孢總數的測定,對于確保乳制品的質量和安全至關重要 。改良TJA培養皿
PALCAM瓊脂基礎是一種專門設計用于分離和培養單核細胞增生李斯特氏菌(Listeriamonocytogenes)的選擇性培養基。除了李斯特氏菌,它也可以用來分離其他類型的細菌,盡管其選擇性成分主要針對李斯特氏菌。**特點**:1.**成分**:PALCAM瓊脂基礎包含酪蛋白胰酶消化物、心胰酶消化物、肉胃酶消化物、玉米淀粉、酵母浸膏、甘露醇、七葉苷、檸檬酸鐵銨、葡萄糖、氯化鋰、瓊脂和酚紅等成分。2.**pH值**:培養基的pH值控制在7.2±0.2(25℃),為細菌提供適宜的生長環境。3.**選擇性**:氯化鋰和抗生物質添加劑(如鹽酸吖啶黃素、硫酸多粘菌素B和頭孢他啶)能夠抑制革蘭氏陰性菌和大多數革蘭氏陽性菌,特別是非李斯特氏菌的生長。4.**應用**:主要用于食品、水和污水樣本中單核細胞增生李斯特氏菌的選擇性分離培養。5.**結果觀察**:李斯特氏菌在PALCAM瓊脂上生長時,會水解七葉苷生成黑色的6,7-二羥基香豆素,形成灰綠色菌落,中心凹陷,周圍有黑色環。盡管PALCAM瓊脂基礎主要用于李斯特氏菌的分離,但某些非李斯特氏菌,如葡萄球菌和腸球菌等,偶爾也能在該培養基上生長,利用甘露醇產酸使菌落和其周圍的培養基呈黃色。