雖然影響因素較多，我們通常建議截留分子量約為目的分子分子量一半的膜，這樣可以比較大化樣品的回收，同時(shí)節(jié)省過(guò)濾時(shí)間。截留微濾中膜的孔徑大小通常以微米計(jì)，表示大于這一規(guī)格的顆粒將被膜截留。超濾膜根據(jù)NMWL分級(jí)，有時(shí)也用截留分子量（MWCO）。NMWL表示大多數(shù)大于這個(gè)值的分子將在超濾時(shí)截留。一個(gè)確定NMWL的超濾膜應(yīng)該截留至少90%以上的這個(gè)大小的球形分子。但為了保險(xiǎn)起見(jiàn)，實(shí)踐中選擇的膜孔徑要小于目的分子。緩沖液置換時(shí) 膜截留分子量應(yīng)該充分大于流過(guò)的溶質(zhì)。當(dāng)膜材料相同時(shí)，孔徑減小 會(huì)增加排阻而減小濾過(guò)率。截留及產(chǎn)物回收的影響因素包括分子的形狀、帶電性質(zhì)、樣品濃度及組成成分、操作條件、使用的設(shè)備構(gòu)造等。因此常常發(fā)生同樣 NMWL 的膜對(duì)一定范圍內(nèi)的不同分子截留效果有一定差異的情況。使用超濾方法進(jìn)行樣品濃縮或除鹽時(shí)，需要謹(jǐn)慎地選擇合適的 NMWL膜和設(shè)備。雖然影響因素較多，我們通常建議截 留分子量約為目的分子分子量一半的膜，這樣可以比較大化樣品的回收，同時(shí)節(jié)省過(guò)濾時(shí)間。您了解超濾濃縮管的優(yōu)勢(shì)嗎？金山區(qū)默克2ml超濾濃縮管咨詢問(wèn)價(jià)

外泌體用于細(xì)胞學(xué)或動(dòng)物實(shí)驗(yàn)前的無(wú)菌處理 已經(jīng)經(jīng)過(guò)上述方法制備的外泌體在進(jìn)行細(xì)胞或動(dòng)物實(shí)驗(yàn)之前還需進(jìn)行一步除菌過(guò)濾，這個(gè)時(shí)候考慮到得率，應(yīng)該采用離心法處理，以減少過(guò)濾時(shí)的外泌體樣品損失。 超濾方法純化具體操作步驟舉例 Amicon? Ultra-15 超濾管 (10 kDa MWCO) 用Steriflip?真空抽濾對(duì)樣品進(jìn)行澄清[目錄號(hào)SCGP00525; 0.22 μm Millipore Express PLUS (PES)膜] 用PBS平衡Amicon? Ultra-15 超濾管(目錄號(hào)UFC901024,10 kDa MWCO) ，4000g離心 X 10 min。 從超濾管內(nèi)管及收集管吸走PBS。向超濾管加入15 mL 樣品。4000g 離心30 min 濃縮。倒空收集管。加入14 mL PBS 進(jìn)行緩沖液置換，溫柔吸打樣品數(shù)次。4000g離心 30 min。從濃縮管吸回處理好的樣品。(30X 濃縮) 注意 : 所有 Amicon? Ultra 超濾管 (0.5, 2, 4 和 15 mL) 與此操作流程兼容 *寶山區(qū)Merck超濾濃縮管銷售益啟生物公司的超濾濃縮管種類繁多。

特點(diǎn)與優(yōu)點(diǎn)： 高產(chǎn)：沒(méi)有樣品轉(zhuǎn)移，損失更少 溫和：特別的滲濾設(shè)計(jì)使換液過(guò)程更溫和 快速：從細(xì)胞裂解到純化、優(yōu)化一共需要5次低速離心 靈活：一種離心方法，***支持各種樣品制備所需 蛋白緩沖液置換、脫鹽和透析 每一種蛋白的制備都是***的，常常需要摸索和優(yōu)化。應(yīng)該考慮為特定蛋白選擇相應(yīng)的工具進(jìn)行換液和透析。您可以從操作較快 Amicon? Pro 的滲濾法或更溫和的 D-Tube?透析法中選擇更適合樣品的操作方法。 選擇更直接而有效的方法！ Amicon? Pro能做到一步離心完成脫鹽換液

創(chuàng)新的純化 - 濃縮 - 換液一體化系統(tǒng) Amicon? Pro 純化超濾系統(tǒng) 目前的蛋白純化常常包括很多步驟，用到多種器具，卻又因此帶來(lái)蛋白降解和損失的問(wèn)題。為了避免因樣品轉(zhuǎn)移帶來(lái)的各種風(fēng)險(xiǎn)，減少您在樣品孵育、漂洗、洗脫、濃縮及換液各步上耗費(fèi)的時(shí)間，默克密理博的研發(fā)團(tuán)隊(duì)創(chuàng)新地推出了Amicon?Pro一體化純化超濾系統(tǒng)。Amicon?Pro提供了對(duì)小量蛋白樣品的標(biāo)準(zhǔn)化操作，使純化濃縮蛋白變得簡(jiǎn)便高效，數(shù)據(jù)穩(wěn)定易得。 開放的設(shè)計(jì)使您可以根據(jù)實(shí)際需要靈活使用，Amicon?Pro將成為實(shí)驗(yàn)室小量蛋白純化、濃縮、換液各種操作的多功能工具。對(duì)于不同的需求我們選擇不同的超濾濃縮管系列。

外泌體的精制磁珠法富集精制外泌體：300μg樣品（相當(dāng)于300μg總蛋白）用含有5μg anti-CD63抗體的溶液稀釋，與protein A/G磁珠共孵育1hr，漂洗后用0.2M glycine洗脫。如果要先將抗體偶聯(lián)在磁珠上（以避免抗體洗脫下來(lái)對(duì)外泌體的干擾），請(qǐng)參考默克磁珠操作說(shuō)明書。（Protocol C - Antibody Crosslinking Using Bis(sulfosuccinimidyl) suberate (BS3)）。推薦使用試劑目錄號(hào)信息：cat# CBL553t 和cat# OP171以及LSKMAGAG02。 默克已經(jīng)建立了基于“微濾+超濾”的外泌體制備操作標(biāo)準(zhǔn)，相較于需要昂貴的設(shè)備及繁瑣操作的超速密度梯度離心，用實(shí)驗(yàn)室常見(jiàn)的工具解決外泌體制備的高大上問(wèn)題，真是惠而不費(fèi)，不亦樂(lè)乎？一個(gè)好的超濾濃縮管代理銷售需要具備哪些特點(diǎn)您了解嗎？崇明區(qū)超濾濃縮管規(guī)格

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多臺(tái)同時(shí)操作模式 借助Amicon?超濾杯多臺(tái)操作連接裝置可以同時(shí)運(yùn)行多達(dá)3個(gè)超濾杯。 Amicon? stirred cells 耐溶劑型攪拌式超濾杯 用于對(duì)在有機(jī)溶劑中的樣品進(jìn)行濃縮和緩沖液置換。有 47mm 和 76mm 兩種規(guī)格。需要注意醛、酮（如**）、醚酯等會(huì)降低碳氟化合物材質(zhì) O 形圈的使用壽命。 特點(diǎn)與優(yōu)點(diǎn)： 采用圓柱形硼硅酸鹽玻璃容器和 PTFE 超好化學(xué)兼容性超濾膜 可預(yù)裝膜后進(jìn)行高壓滅菌 直接從上面操作，避免拆卸裝置的麻煩 組件少，易于清潔和組裝 配套使用 47 或 76 mm 直徑預(yù)切膜片 應(yīng)用： 帶有有機(jī)成分的樣品的濃縮、換液金山區(qū)默克2ml超濾濃縮管咨詢問(wèn)價(jià)

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